决明酮苷在制备黄嘌呤氧化酶抑制剂中的应用制造技术

本发明专利技术提供了决明酮苷在制备黄嘌呤氧化酶抑制剂中的应用。经体外试验证实，决明酮苷对黄嘌呤氧化酶活性有明显抑制作用；经实验性高尿酸血症小鼠模型试验证实，决明酮苷显著降低模型小鼠血清尿酸水平，可用于制备黄嘌呤氧化酶抑制剂，用于制备抑制黄嘌呤氧化酶活性治疗高尿酸血症的产品。

【技术实现步骤摘要】
决明酮苷在制备黄嘌呤氧化酶抑制剂中的应用
本专利技术属于医药领域，涉及决明酮苷在制备黄嘌呤氧化酶抑制剂中的应用。
技术介绍
高尿酸血症是嘌呤代谢紊乱或（和）尿酸排泄减少所引起的一组异质性疾病，是引发痛风的重要生化基础，与心血管疾病、慢性肾脏病及代谢综合征，如糖尿病、肥胖等密切相关，是一种严重影响公共健康的疾病。来自中国、美国和英国等国的流行病学调查显示高尿酸血症的发病率呈急速上升趋势，被世界卫生组织列为二十世纪人类十大顽症之一。高尿酸血症不仅严重影响病人的生活质量，甚至威胁患者生命，严重威胁到公共卫生健康状态，给社会带来沉重的经济负担。黄嘌呤氧化酶作为尿酸生成关键酶是降低尿酸药物的作用靶点。黄嘌呤氧化酶是一种黄素蛋白酶，存在于各种生物体中，可催化体内的嘌呤底物形成尿酸。黄嘌呤氧化酶的晶体结构由1330个氨基酸构成，其氨基酸序列在鼠和人之间具有90%的同源性，它是由两个完全对称的结构单元构成。每个结构单元为145ku，其催化中心包括一个钼蝶玲中心、两个铁-硫中心和一个黄素腺嘌呤二核苷酸，其中钼蝶玲中心是黄嘌呤氧化酶催化黄嘌呤生成尿酸的关键位点。人体内尿酸的来源有内源性和外源性之分，外源性尿酸来源于食物，占体内尿酸来源的20%；内源性尿酸源于体内氨基酸、磷酸核糖及其他小分子合成和核酸分解代谢，占体内尿酸来源的80%。尿酸生成过多是高尿酸血症的一个主要发病原因。黄嘌呤氧化酶广泛分布于人体心、肺、肝等组织细胞浆内，能催化黄嘌呤和次黄嘌呤的氧化生成尿酸，并产生过氧化物自由基，尿酸浓度过高会导致高尿酸血症，并可引起痛风发作。别嘌呤醇和非布索坦是在临床上使用的黄嘌呤氧化酶抑制剂，但皮肤过敏、肝炎、超敏反应综合征等不良反应在一定程度上限制了其使用。2013年国家食品药品监督管理总局发布第57期《药品不良反应信息通报》，提示别嘌呤醇引起重症药疹的安全问题。为筛选黄嘌呤氧化酶抑制剂，本案专利技术人构建了以黄嘌呤为底物，HPLC法测定尿酸生成量的黄嘌呤氧化酶抑制活性评价体系，从毒副作用小的天然产物中寻找黄嘌呤氧化酶抑制剂，发现了高活性化合物决明酮苷。决明酮苷，又名决明酮-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，属于奈苷类化合物，英文名称torachrysone-8-O-β-D-glucopyranoside，主要存在于虎杖、巴天酸模、尼泊尔酸模、戟叶酸模、何首乌、掌叶大黄、唐古特大黄、喜马拉雅大黄、长柱琉璃草、刺亦模、毛脉廖等植物中。具有具有α-葡萄糖苷酶抑制作用（BabuKS，TiwariAK，SrinivasPV，AliAZ，RajuBC，RaoJM.BioorgMedChemLett，2004，14：3841-3845）、神经保护作用（XiangL，LeiFan，XingDM，WangW，ZhengJH.TsinghuaScienceandTechnology，2005，10（4）：426-429）、促进毛发生长作用（SunYN，CuiL，LiW，YanXT，YangSY，KangJI，KangHK，KimYH.BioorgMedChemLett，2013，23：4801-4805）和抗炎作用（MatsudaH，KageuraT，MorikawaT，ToguchidaI，HarimaS，YoshikawaM.BioorgMedChemLett，2000，10：323-327）。但未见决明酮苷抑制黄嘌呤氧化酶活性作用和抗高尿酸血症作用的研究报道。
技术实现思路
本案专利技术人以组分结构理论为指导，从宏观到微观解析，微观到宏观表征虎杖抗高尿酸血症有效部位组分结构，以抗高尿酸血症主要靶点寻找活性化合物。采用黄嘌呤氧化酶抑制活性指标指导下的导向分离模式虎杖提取物抗高尿酸血症活性物质基础，从有效部位中分离鉴定了决明酮苷、大黄素-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、虎杖苷、白藜芦醇、大黄酚。发现其中决明酮苷对黄嘌呤氧化酶活性有显著地抑制作用，因而完成了本专利技术。本专利技术目的是提供决明酮苷在制备黄嘌呤氧化酶抑制剂中的应用。决明酮苷是如下结构式的化合物：。决明酮苷抑制黄嘌呤氧化酶活性，可在制备黄嘌呤氧化酶抑制剂中应用，通过抑制黄嘌呤氧化酶活性，抑制催化黄嘌呤和次黄嘌呤的氧化生成尿酸，可在制备抑制黄嘌呤氧化酶活性治疗高尿酸血症产品中应用。本专利技术的决明酮苷在制备黄嘌呤氧化酶抑制剂中的应用优点为作用机制明确，决明酮苷可从虎杖、巴天酸模、尼泊尔酸模、戟叶酸模、何首乌、掌叶大黄、唐古特大黄、喜马拉雅大黄、长柱琉璃草、刺亦模、毛脉廖等植物中分离，毒副作用小。本专利技术还提供用本专利技术所述的决明酮苷以及药学上可接受的载体或赋形剂制备的药物制剂。这些药物制剂选自以下剂型：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、泡腾片剂、舌下片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、微球剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂、膏剂、口服液、混悬剂、溶液剂、气雾剂、注射剂，注射乳剂、冻干粉针，还可以根据需要制备成缓释或控释制剂。本专利技术的含有所述决明酮苷的药物制剂，在制备药物制剂时可加入药物可接受的载体，所述药物可接受的载体来自：抗氧剂、鏊合剂、表面活性剂、填充剂、崩解剂、湿润剂、溶剂、缓释材料、肠溶材料、pH调节剂、矫味剂、色素等，常用载体如：甘露糖醇、右旋糖苷、乳糖、葡萄糖、山梨醇、木糖醇、注射用水、注射用乙醇、氯化钠、硅衍生物、纤维素、纤维素衍生物、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、吐温80、琼脂、碳酸钙、聚乙二醇、环糊精、磷脂类材料、滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙等。附图说明图1决明酮苷对黄嘌呤氧化酶抑制动力学Lineweaver-Burk双倒数图以下通过具体实施例对本专利技术作进一步的说明，并非对本专利技术的限定，依照本领域公知的现有技术，本专利技术的实施方式并不限于具体实施例。具体实施方式实施例1决明酮苷对黄嘌呤氧化酶抑制作用半数抑制浓度IC50测定HPLC测定方法：DiamonsilODS色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：100mmol/L磷酸二氢钠溶液（pH=3.5）；检测波长：290nm；流速：1.0mL/min。测定体系：不同浓度测试品溶液（含0.25%DMSO的0.07mol/L磷酸盐缓冲液）200μL加入0.07mol/L磷酸盐缓冲液140μL，黄嘌呤氧化酶溶液120μL（0.02unit/mL，0.07mol/L磷酸盐缓冲液），25℃保温15min，加入黄嘌呤溶液240μL（300μmol/L，0.07mol/L磷酸盐缓冲液），25℃保温15min，加入1mol/L盐酸100μL终止反应。空白对照测定，供试品溶液用含1%DMSO的0.07mol/L磷酸盐缓冲液代替。HPLC法测定尿酸生成量，每组浓度平行三次，计算抑制率。以测试品浓度为横坐标，抑制剂对黄嘌呤氧化酶抑制率为纵坐标绘制IC50曲线，通过SPSS统计学软件计算出决明酮苷的IC50为8.31μM；临床治疗药物别嘌呤醇的IC50为3.42μM。实施例2决明酮苷对黄嘌呤氧化酶抑制作用类型测定HPLC测定方法：DiamonsilODS色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：100mmol/L磷酸二氢钠溶液（pH=3.5）；检测波长：290nm；流本文档来自技高网...

【技术保护点】
决明酮苷在黄嘌呤氧化酶抑制剂中的应用，其特征在于，所述决明酮苷是如下结构式的化合物：。

【技术特征摘要】
1.决明酮苷在制备抑制黄嘌呤氧化酶活性治疗高尿酸血症产品...

【专利技术属性】
技术研发人员：王威，刘坤，韩立春，刘小红，高华，
申请(专利权)人：青岛大学，
类型：发明
国别省市：山东;37