检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条制造技术

本实用新型专利技术涉及一种检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条，其包括底板，所述底板具有相对的检测始端和检测终端，所述底板上从检测始端到检测终端依次贴有样品垫、结合垫、反应膜以及吸收垫，所述结合垫、吸收垫分别层叠在反应膜的两端。该胶体金试纸条是基于层析法，检测时能直观看到结果，而且该方法检测时间短，灵敏度高，稳定性好、操作简便，携带方便，无需其他贵重仪器设备，结果判断直观可靠、形象、准确，适用于进行现场快速筛选。

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及食品检测
，具体涉及一种检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条。
技术介绍
麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisons，PSPs)是有毒赤潮中的一些有毒藻的天然产物。当贝类摄食这类有毒藻后，PSPs在其体内发生代谢转化并在特定部位累积，因贝类对PSPs不敏感，所以不会造成伤害；人食入此贝类后，毒素经消化迅速扩散，出现头痛恶心、流涎发烧和皮瘆等症状，严重时导致肌肉麻痹，呼吸困难，甚至死亡。麻痹性贝类毒素受体蛋白一Saxiphilin (SAX)是一种可溶性蛋白，广泛分布于节肢动物、鱼类、两栖动物和爬行动物中。现有多种方法和设备用来检测麻痹性贝类毒素，例如当前的国标检测方法:小鼠生物法，这种小鼠生物法操作时间长，流程复杂。
技术实现思路
有鉴于此，提供一种检测时间更短、稳定性好、操作简便的检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条。一种检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条，其包括底板，所述底板具有相对的检测始端和检测终端，所述底板上从检测始端到检测终端依次贴有样品垫、结合垫、反应膜以及吸收垫，所述结合垫、吸收垫分别层叠在反应膜的两端。进一步地，所述反应膜上具有包被有麻痹性贝类毒素抗体受体-胶体金偶联物构成的检测线印迹和包被His-tag单抗构成的质控线印迹，所述检测线印迹和质控线印迹都呈“ I ”形状。进一步地，所述检测线和质控线相互平行，均呈与底板的长度方向垂直的条状或带状。进一步地，所述质控线位于距离吸收垫与反应膜相连处5_8mm，所述检测线距离质控线5_6mm。进一步地，所述样品垫层叠于结合垫上，两者重叠2_4mm。进一步地，所述结合垫、吸收垫分别与反应膜重叠2mm。进一步地，所述底板的检测始端和检测终端都包覆有保护膜，两端的保护膜分别包覆样品垫和吸收垫，并分别缠绕至底板底面。进一步地，所述底板为PVC板，所述样品垫为吸滤纸，所述吸收垫为吸水纸，所述反应膜为硝酸纤维素膜，所述保护膜为PE膜。进一步地，所述检测线距离质控线5_6mm。进一步地，所述样品垫中冻干有麻痹性贝类毒素抗体受体-胶体金偶联物。上述检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条是用于层析法，检测时能直观看到结果，形象、准确，而且该方法检测时间更短，灵敏度高，稳定性好、操作简便，携带方便，无需其他仪器设备，结果判断直观可靠，适用于进行现场快速筛选。【附图说明】图1是本技术实施例一的检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条的结构示意图。图2是本技术实施例一的检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条的剖视结构示意图。【具体实施方式】以下将结合具体实施例和附图对本技术进行详细说明。请参阅图1，显示本技术实施例一的检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条10，其包括底板11，所述底板11具有相对的检测始端和检测终端，所述底板11上从检测始端到检测终端依次贴有样品垫12、结合垫13、反应膜14以及吸收垫15，所述结合垫13、吸收垫15分别层叠在反应膜14的两端。具体地，底板11优选为PVC板，通常采用4mm宽的长板。反应膜14上具有包被有麻痹性贝类毒素抗体受体-胶体金偶联物构成的检测线印迹16和包被His-tag单抗构成的质控线印迹17，检测线印迹16和质控线印迹17都呈“ I ”形状，两条印迹16和17相互平行，均呈与底板11的长度方向垂直的条状或带状。进一步地，所述质控线位于距离吸收垫与反应膜14相连处(D4) 5-8mm，所述检测线与质控线的距离D3为5_6mm。反应膜14优选为硝酸纤维素膜，反应膜14位于底板11大致中间位置，检测线印迹16和质控线印迹17位于反应膜14大致中间位置。样品垫12中冻干有麻痹性贝类毒素抗体受体-胶体金偶联物。样品垫12位于检测始端，靠内一端层叠于结合垫13上，两者重叠长度Dl优选为4mm。结合垫13、吸收垫15分别与反应膜14重叠长度D2优选为2mm，样品垫12优选为吸滤纸。吸收垫15位于底板11的检测终端，吸收垫15优选为吸水纸。结合垫13—端被样品垫12压着，另一端压在反应膜14上，结合垫13优选为包被有抗体-纳米颗粒偶联物的玻璃纤维膜。结合垫的制备方法为:用点膜仪吸取抗体-纳米颗粒偶联物悬液按照25yL/cm的量喷于结合垫基材上，真空干燥，真空包装，备用。样品垫的制备方法为:将样品垫基材浸泡于PH7.4的磷酸盐缓冲液中(20g BSA牛血清白蛋白，25g海藻糖，3g聚乙烯吡咯烷酮PVP-40,0.2g NaN3，8gNaCl，0.2g KCl，2.9g Na2HPO4* 12H20,0.2g KH2PO4，用超纯水定容至100mL)中30min后，37°C真空烘干，4°C备用。请参阅图2，显示本技术实施例二的检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条20，其结构材料组成与实施例一的胶体金试纸条10的结构材料组成基本相同，不同之处主要在于，胶体金试纸条20还包括两个个保护膜18，分别包覆于底板11的检测始端和检测终端，两端的保护膜18分别包覆样品垫12和吸收垫15，并分别缠绕至底板11底面，所述保护膜为PE膜。在其它实施例中，两端的保护膜18可进一步分别包覆到反应膜14两端位置，给各层都提供保护。保护膜18上还具有MAX标记线(图未示)。检测时，取100 μ L待检样品液滴加到试纸条的样品垫上，5?1min内自然光下读取结果。若样品液中含有PSPs，则PSPs将与结合垫上胶体金-受体蛋白结合，并朝着吸收垫方向移动，当移动至检测线时将被PSPs将与检测线上的STX-BSA竞争结合位点，随着PSPs浓度的不同在醋酸纤维膜上可以看到颜色深浅不同的检测线；未被捕获的胶体金-受体或者胶体金-受体-PSPs继续朝着吸收垫方向移动，当移动至质控线时，偶联物上的His标签将被质控线上的His-tag单抗所捕获，可见明亮的质控线。如果质控线没有出现，则检测结果无效；如果有质控线无检测线，则结果为阴性。试纸条以显示红色线“ I ”或“ Il ”印迹作为阳性和阴性标记，即，当在硝酸纤维素膜上显示一条红线“ I ”印迹表示在被检测样本液中麻痹性贝类毒素含量高于或等于试纸条对麻痹性贝类毒素的最低检测限，两条红线“ Il ”印迹表示在被检测样本中麻痹性贝类毒素含量低于试纸条对麻痹性贝类毒素的最低检测限，这种结果判定形象、直观、准确、简单明了，不容易出现结果误判。本实施例的检测麻痹性贝类毒素胶体金试纸条以胶体金标记高亲和力的受体蛋白为基础制备而成，其中的麻痹性贝类毒素抗体受体-胶体金偶联物冻干在样品垫中，在检测过程中，能够使金标抗体与待检样品液充分接触，充分反应，从而减少误差，增加整个体系的反应灵敏度。因此，本技术试纸条具有较高的特异性和灵敏度。本试纸条对食品中麻痹性贝类毒素检测限为1.3 yg STXeq/lOOgo上述检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条是基于免疫层析法，检测时能直观看到结果，而且该方法检测时间更短，灵敏度高，稳定性好、操作简便，携带方便，无需其他仪器设备，结果判断直观可靠、形象、准确，适用于进行现场快速筛选。另外，本技术的胶体金试纸条，使现场检测一步到位，成本低廉，投资少，见效快。而且本技术的胶体金试纸条操作简单，能较好满足食品检测的需求，具有广阔的市场前景和较大的经济、社本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测麻痹性贝类毒素的胶体金试纸条，包括底板，所述底板具有相对的检测始端和检测终端，其特征在于，所述底板上从检测始端到检测终端依次贴有样品垫、结合垫、反应膜以及吸收垫，所述结合垫、吸收垫分别层叠在反应膜的两端。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吕敬章，黄李华，张恒，黄欣迪，
申请(专利权)人：深圳市检验检疫科学研究院，深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心，
类型：新型
国别省市：广东;44