基于液相色谱-串联质谱联用同时测定烟草及烟草制品中四种黄曲霉毒素含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于液相色谱-串联质谱联用同时测定烟草及烟草制品中四种黄曲霉毒素含量的方法，该方法是先对烟叶或烟丝样品进行干燥、粉碎等前处理后，从烟叶或烟丝样品中提取黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，再采用免疫亲和柱净化提取液，建立定量分析标准曲线、用液相色谱-串联质谱联用方法检测；该方法实现了对黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2四种进行同时测定，且具有灵敏度高、定量限低、回收率高、重复性好、操作简便等优势。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
基于液相色谱‑串联质谱联用同时测定烟草及烟草制品中四种黄曲霉毒素含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：样品前处理将烟叶和/或烟丝样品烘干后，粉碎，过筛，得到烟末样品；步骤二：提取黄曲霉毒素在步骤一所得的烟末样品中加入氯化钠，混合均匀后，用甲醇/水的混合溶剂对烟末样品进行振荡提取，离心分离，取上层清液；所得上层清液通过PBS缓冲溶液稀释后，用玻璃纤维滤纸过滤，收集滤液，即得提取液；步骤三：净化提取液净化提取液依次经过A～E步骤：A、采用PBS缓冲溶液对免疫亲和柱进行淋洗，弃去免疫亲和柱的流出液；B、将步骤二所得提取液缓慢通过免疫亲和柱，弃去免疫亲和柱的流出液；C、依次用含吐温‑20的PBS溶液和水对免疫亲和柱进行淋洗，弃去免疫亲和柱的流出液；D、用乙腈对免疫亲和柱进行至少两次洗脱，收集从免疫亲和柱流出的洗脱液；E、取洗脱液，氮气吹干后，用乙腈溶解定容，再过有机滤膜，得到待测液；步骤四：建立标准曲线用乙腈配制一系列含黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2四种组分的混合标准工作溶液，采用液相色谱‑串联质谱联用同时检测混合标准工作溶液中的四种黄曲霉毒素，建立相应的标准曲线；步骤五：检测待测液采用液相色谱‑串联质谱联用同时检测待测液中四种黄曲霉毒素的含量，根据步骤四中建立的标准曲线进行定量分析。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘巍，毛友安，杜文，牛承岗，
申请(专利权)人：湖南中烟工业有限责任公司，湖南大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43