石蜡包埋对照物悬液的制备方法及应用技术

石蜡包埋对照物悬液的制备方法及应用，属于生物医学技术领域。它主要包括以下步骤：石蜡包埋切片确定有对照价值的组织蜡块，按免疫组化、原位杂交组织切片厚度切片，收集进入容器中；脱蜡、清洗后处理得到切片碎屑或微切片；经不水化或水化处理后，保存备用，其对照物可来自不同的组织等，对照时可选用多种组合，可进行点涂物内部或外部组合，可减少对照物的种类，增加其利用价值，增加了对照物的特异性，将其用于石蜡切片的免疫组化、特殊染色、原位杂交等染色作为质控对照物时，不仅使用方便，而且与切片对照时其厚度基本相同，参照对比更为可靠，可大大地改变观察者的视觉感官，尤其是细胞膜、浆阳性的结构及组织的结构更为清晰。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
石蜡包埋对照物悬液的制备方法，其特征在于包括如下步骤：1）石蜡包埋对照物切片脱蜡进行免疫组化、原位杂交等，观察切片中某种细胞丰富的成分，确定那些抗体阳性、核酸扩增或异常的对照物蜡块，对照切片修去不需要的组织备用；2）选定步骤1）得到的对照物蜡块，按常规免疫组化、原位杂交组织切片厚度进行切片，便于用于组织切片免疫组化、原位杂交染色观察时保持同样的组织厚度，连续切完组织，将切下来的对照物切片移入不会被有机溶剂溶解的容器中备用；3）向步骤2）的容器中加入能够溶解石蜡的溶剂，离心洗涤3次，除去不溶于水的溶剂，再加入梯度酒精离心处理，通过震荡、切割搅拌、超声波或移液器吸头破碎对照物切片，100‑300μm过滤，得到对照物切片碎屑，有水化及不水化两种处理，梯度酒精按高浓度到低浓度的顺序；4）不水化处理：将步骤3）得到的对照物切片碎屑加入低浓度酒精保存，依据点涂器具的不同及实际效果调整组织碎屑大小及浓度；5）水化处理：将步骤3）得到的对照物切片碎屑彻底水化，加入蒸馏水或PBS或TBS缓冲液冲洗，离心沉积，将沉积物用能用于抗原保存的液体按体积比为1:1‑3的比例稀释。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：丁伟，任兴昌，
申请(专利权)人：丁伟，任兴昌，
类型：发明
国别省市：浙江;33