一种固定化纤维素酶制备的方法技术

本发明专利技术涉及一种固定化纤维素酶制备的方法。由于游离酶混溶在反应体系中不仅不易分离回收，难以反复或连续使用，因此，将游离的纤维素酶进行固定化。将醋酸纤维素酶固定在不同孔径的聚丙烯复合膜上，通过电镜扫描观察酶固定在复合膜的效果，选出最佳孔径的聚丙烯复合膜，将选出的最佳复合酶膜固定在辊上。本发明专利技术对游离的纤维素酶进行固定化的条件选择戊二醛浓度为0.45~0.55%时，固定化温度48~49℃，选择固定化pH为3.9~4.0，交联时间为3~4h，吸附时间为3.0~3.1h，纤维素酶浓度为1.0~2.0%。测定游离纤维素酶的活力为5.103U/cm2，将固定化纤维素酶辊连续碾压大豆胚片24h，结果酶活力仍保持在80%左右，得到的固定化纤维素酶活力为4.732U/cm2。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种固定化纤维素酶制备的方法，其特征在于将纤维素酶进行固定化通过以下步骤实现：一、复合膜的制备：将5g醋酸纤维素溶于100mL丙酮中，待溶解完全成均一的膜液后，取实验前制备好的聚丙烯膜浸于溶有醋酸纤维素的丙酮溶液中，自然成膜，以去离子水冲洗醋酸纤维素/聚丙烯复合膜数次干燥备用；二、酶的固定化：将酶液浓度为0.5~2.5%的纤维素酶和磷酸氢二钠‑磷酸二氢钾缓冲液在pH为2~6条件下混合，并加入醋酸纤维素/聚丙烯复合膜，在35~75℃的温度搅拌1~5h后，再加入0.35~0.55%的戊二醛进行交联反应1~5h，取出酶膜缠绕在圆柱体的表面上制得固定化纤维素酶辊；三、测定固定化酶相对活力：纤维素酶的活力为5.103 U/cm2，将固定化纤维素酶辊连续碾压大豆胚片24h，结果酶活力仍保持在80%左右，得到的固定化纤维素酶酶活力为4.732U/cm2。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙树坤，陈昊，解桂东，胡立志，于殿宇，王喜泉，许慧，郑环宇，朱秀清，姚磊，
申请(专利权)人：黑龙江省大豆技术开发研究中心，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23