一种快速选育土霉素菌种的方法技术

技术编号:11439994 阅读:110 留言:0更新日期:2015-05-13 09:52
一种快速选育土霉素菌种的方法,包括以下步骤:a、试管斜面陪养,b、孢子悬液的制备,c、分离培养,d、发酵培养,e、菌株复试。通过将分离培养得到的单菌落直接接种到发酵培养基中发酵培养,不仅筛选得到的土霉素的效价高,更有意义是将单菌落效价验证时间缩短为48-50h,大大提高了工作效率。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种快速选育土霉素菌种的方法,其特征在于:包括以下步骤:a.试管斜面培养:将土霉素生产菌株砂土孢子接种于试管斜面培养基中,在温度37.0±0.5℃,湿度40%‑60%的条件下培养3‑5天,得到斜面孢子;b.孢子悬液制备:向步骤a试管斜面培养基中加入无菌水,将步骤a得到的斜面孢子刮下,混匀,制成孢子悬液,用血球计数板计数,使孢子浓度为1012‑1014个/mL;c.分离培养:将步骤b所得的孢子悬液用无菌水稀释至101‑107倍,稀释液涂布在分离培养基上,于温度37.0±0.5℃,湿度40%‑60%的条件下暗培养3‑5天,培养时第一天正置,第二天起倒置培养;d.发酵培养:在分离培养基上挑取直径在5mm以上的单菌落接种到25mL发酵培养基中,于32.0±0.5℃,湿度为40‑60%,转速为200‑220rpm条件下震荡培养48‑50h,生长到周期后检测发酵液中土霉素含量,选高于效价500U/mL的菌株进行砂土干燥保藏;e.菌株复试:取步骤d沙土干燥保藏的菌株转接试管斜面培养基,于37.0±0.5℃,40%‑60%湿度条件下培养3‑5天,得斜面孢子,将所得的斜面孢子转接至种子培养基中,于30.0±0.5℃,220rpm条件下震荡培养24‑30h,将培养好的种液转接至复试用发酵培养基中,于30.0±0.5℃,200‑220rpm条件下震荡培养5‑7天,取样检测效价。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张慧赵丽红
申请(专利权)人:河北圣雪大成制药有限责任公司
类型:发明
国别省市:河北;13

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