一种土茯苓提取物的制备方法及其制备的土茯苓提取物和用途技术

本发明专利技术提供一种土茯苓提取物的制备方法，包括超声波辅助乙醇提取土茯苓。本发明专利技术还提供所述制备方法得到土茯苓提取物，以及该土茯苓提取物在制备抑制柑橘采后病原菌的药物组合物中的用途。土茯苓提取物对柑橘采后病原菌具有较强的抑制作用，用于柑橘保鲜后无化学残留，对人体无健康危害，对环境无污染，不易产生抗药性。

【技术实现步骤摘要】
一种土茯苓提取物的制备方法及其制备的土茯苓提取物和用途
本专利技术属于水果病害防治和保鲜领域，具体涉及一种具有抑制柑橘采后病原菌作用的土茯苓提取物及其制备方法和新用途。
技术介绍
柑橘是世界第一大贸易水果，也是第三大贸易农产品。我国柑橘资源丰富、种植历史悠久。目前我国柑橘的种植面积和产量均居世界第一位，2013年柑橘种植面积达3600多万亩，总产量约为3200多万吨，柑橘产业在我国农业经济中占有非常重要的地位。柑橘果实组织细嫩多汁且富含糖分，在采摘、贮运和销售等过程中容易发生机械损伤，果皮损伤后易受多种病原真菌的侵染而产生采后病害。柑橘采后发生的病理性病害种类多达20余种，主要有意大利青霉(Penicilliumitalicum)引起的青霉病和指状青霉(Penicilliumdigitatum)引起的绿霉病，这些病害易造成果实腐烂变质，腐烂率一般为10％～30％，严重时可高达40％～50％以上，造成巨大的经济损失。柑橘其它的病理性病害还包括黑腐病、酸腐病、褐腐病、褐色帝腐病、炭疽病和焦腐病等。长期以来，人们主要采用化学合成物质作为保鲜剂对柑橘进行保鲜，不同时期使用的化学杀菌剂有所不同。硼砂、山梨酸及其盐类等是最早使用的柑橘防腐剂；包括苯菌灵(Benomyl)、托布津(Thiophanate)、甲基托布津(Thiophanatemethyl)、多菌灵(Carbendazim)、噻菌灵(Thiabendazole)等的苯并咪唑类杀菌剂是70年代应用的第二代柑橘防腐剂；目前使用的第三代柑橘防腐剂包括抑霉唑(Imazalil)、双胍盐(Guazatine)、咪鲜胺(Prochloraz)等。这些化学杀菌剂能杀死或抑制病原微生物的生长，有较好的防腐保鲜效果。由于化学杀菌剂会造成药剂残留、污染环境，以及长期使用导致柑橘采后病菌产生抗药性等原因使得化学杀菌剂的使用安全性日益得到人们的关注。另外，随着科技的发展、检测分析手段的完善和化学杀菌剂毒理的深入研究，发现一些化学防腐剂有致癌或潜在致癌、致突变、致畸的可能性。目前一些化学杀菌剂已被欧美等发达国家禁止或限制使用，如苯菌灵和双胍盐类杀菌剂等己被美国环保局明令禁止使用或在部分果实产品上限制使用。近年来，人们开始转向天然植物源保鲜剂的研发。天然植物源保鲜剂具有高效、低毒、低残留、无污染、使用安全等优点，采用其处理柑橘进行防腐保鲜将受到消费者的普遍欢迎。另外，植物源药剂是通过多成分，多靶点发挥抑菌作用，不易产生抗药性。因此，有必要从天然植物中寻找、开发天然植物源防腐剂对柑橘进行保鲜以减少对化学药剂的依赖。土茯苓(SmilacisglabraeRhizoma)为百合科植物光叶菝葜(SmilaxglabraRoxb.)的干燥根茎，收载于历年《中国药典》、《中药大辞典》、《全国中草药汇编》等多种中药学书籍中。土茯苓又名禹余粮，刺猪苓，过山龙等，性平，味甘、淡，具有清热利湿、泄浊解毒、健脾和胃、通利关节的功效，可用于梅毒、淋浊、泄泻、筋骨疼痛、脚气、痈肿、疮廯、瘰疬、瘿瘤等症。现代药理学研究表明，土茯苓提取物对多种消化道肿瘤细胞具有抑制增殖、诱导S期细胞增加和诱导肿瘤细胞凋亡的作用，细胞增殖抑制率、细胞凋亡率随药物浓度的增加而增加(杨晓鲲，苏杰，徐贵森；土茯苓提取物对消化道肿瘤细胞的体外作用[J].西南国防医药，2014，24(3):253-256)。土茯苓能够改善汞中毒大鼠肝肾功能、去除体内汞蓄积的作用，对汞中毒大鼠具有一定的防治作用(郑捷，郑宇翔，肖凤霞，林励，林靖然；土茯苓对急性汞中毒大鼠的保护作用研究[J].中国实验方剂学杂志，2014，20(4):163-166.)。土茯苓对高尿酸血症模型小鼠肾功能有保护作用，可以降低模型小鼠黄嘌呤氧化酶(XOD)活性，降低胆固醇含量(郭淑云，张薇，张琰，杜小燕；土茯苓水提物对高尿酸血症模型小鼠血清尿酸和甘油三酯、胆固醇的影响[J].中国药房，2011，22(47):4439-4440.)。现有技术中，还有多篇专利文件公开了土茯苓提取物的制备方法及其用途。如，专利技术名称“一种天然植物土茯苓提取物的应用方法”(公开号CN101612292A)的中国专利技术专利申请，公开了土茯苓提取物应用于抑制组胺释放的药物、化妆品及保健食品中的用途。专利技术名称“土茯苓皂甙、黄酮类提取物及其制备方法”(公开号CN101524458A)的中国专利技术专利申请，公开了一种土茯苓皂甙、黄酮类提取物及其制备方法。专利技术名称“土茯苓总苷提取物及其制备方法和用途”(公开号CN1772170A)的中国专利技术专利申请，公开了土茯苓总苷提取物的制备及其在抗炎和免疫抑制作用的药物中应用。另外，公开号CN102688422A的中国专利技术专利申请公开了一种含土茯苓的治疗慢性肝炎土茯苓中药口服液。公开号CN102698156A的中国专利技术专利申请公开了一种含土茯苓的治疗水肿的土茯苓中药汤剂。可见现有技术对土茯苓的研究主要局限在以人为施用对象，用于抗过敏、免疫抑制、治疗肝炎等方面的医药用途。迄今，尚未见土茯苓提取物对柑橘采后病原真菌作用的报道，也没有关于超声波辅助提取制备土茯苓提取物的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术的不足，提供一种土茯苓提取物的制备方法及其制备的土茯苓提取物新用途。本专利技术以天然的中草药植物为原料，制备的土茯苓提取物对柑橘采后病原真菌的抑菌效果明显且无化学残留，对人体无健康危害，对环境无污染，预示着很好的应用前景。为解决上述技术问题，本专利技术采用如下的技术方案：一种土茯苓提取物的制备方法，采用超声波辅助提取，以乙醇为提取溶剂，包括如下步骤：所述土茯苓中加入土茯苓重量10～40倍的质量百分比浓度为70％～100％的乙醇，在提取温度为40～60℃，提取时间为30min～120min，超声频率为30～40KHz的条件下提取；过滤，回收乙醇至无醇味，即得。在本专利技术所述制备方法中，优选的，乙醇的重量为所述土茯苓重量的20～40倍；更优选为30倍。优选的，乙醇的质量百分比浓度优选为80％～100％；更优选为95％～100％。优选的，超声波辅助提取时间优选为40～100min，更优选为60min。优选的，超声波辅助提取的温度为45℃。还优选的，乙醇提取前，所述土茯苓40～50℃烘干，粉碎后过40目筛，取筛下粉末进行超声波辅助提取。作为一个优选的具体实施方式，本专利技术提供一种土茯苓提取物的制备方法，包括如下步骤：I.将土茯苓40～50℃烘干，粉碎后过40目筛，取筛下粉末；II.步骤I得到的粉末中加入所述土茯苓重量20～40倍的质量百分比浓度为80％～100％的乙醇进行超声波辅助提取，提取温度为40℃～60℃，提取时间为40min～100min，超声频率为30～40KHz；过滤，得到醇提取液；III.步骤II得到的醇提取液，减压回收乙醇至无醇味，即得。作为一个更优选的具体实施方式，本专利技术提供一种土茯苓提取物的制备方法，包括如下步骤：I.将土茯苓40～50℃烘干，粉碎后过40目筛，取筛下粉末；II.步骤I得到的粉末中加入所述土茯苓重量30倍的质量百分比浓度为95％～100％的乙醇进行超声波辅助提取，提取温度为45℃，提取时间为60min，超声频率为30～40KHz；过滤，得到醇提取液；II本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种土茯苓提取物的制备方法，采用超声波辅助提取技术，以乙醇为提取溶剂，包括如下步骤：将所述土茯苓中加入土茯苓重量10～40倍的质量百分比浓度为70％～100％的乙醇，在提取温度为40～60℃，提取时间为30min～120min，超声频率为30～40KHz的条件下提取；过滤，回收乙醇至无醇味，即得。

【技术特征摘要】
2014.10.08 CN 20141052355731.土茯苓提取物在制备用于防治柑橘采后病原菌的药物组合物和/或柑橘采后保鲜剂中的用途；所述土茯苓提取物通过如下制备方法制备得到：将所述土茯苓中加入土茯苓重量10～40倍的质量百分比浓度为70％～100％的乙醇，在提取温度为40～60℃，提取时间为30min～120min，超声频率为30～40KHz的条件下提取；过滤，回收乙醇至无醇味，即得。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，乙醇的重量为所述土茯苓重量20～40倍。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，乙醇的重量为所述土茯苓重量30倍。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，乙醇的质量百分比浓度为80％～100％。5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，乙醇的质量百分比浓度为95％～...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈金印，万春鹏，陈楚英，
申请(专利权)人：江西农业大学，
类型：发明
国别省市：江西;36