一种石斛红曲制备方法技术

本发明专利技术涉及发酵领域，特别涉及一种石斛红曲制备方法，是将红曲霉在添加有金钗石斛的培养基培养，得到的培养产物即为石斛红曲。本发明专利技术提供的石斛红曲制备方法，结合中草药和微生物源性生成抗氧化活性物质的共同特点，利用抗氧化作用疗效确切的金钗石斛与已有研究报道具有生成抗氧化性物质的红曲霉进行共同发酵培养，在红曲霉代谢转化金钗石斛的同时，金钗石斛也对红曲霉的代谢流产生影响，两者产生互补及增效的作用，得到的石斛红曲达到了非常显著的抗氧化效果，这种效果是单纯利用红曲霉发酵或金钗石斛无法达到的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及发酵领域，具体而言，涉及一种石斛红曲制备方法。
技术介绍
健康长寿是人类共同的愿望，也是医学和生命科学研究的永恒主题。现代医学研究表明：活性氧自由基不仅会使人体内的脂质与蛋白质发生链式氧化反应导致细胞膜、组织、酶和基因受损，对肌体造成了损害和衰老，而且会促使有关的基因突变，诱发相关的疾病(如早衰、关节炎、局部缺血与再灌注损伤、老年痴呆及癌症等)。因此，清除自由基的抗氧化药物在抗衰老和防治多种相关疾病中具有重要的作用。近时以来，抗氧化作用的研究发展到一个非常的高度，许多文章、鉴定和研究报告层出不穷。结合中草药源性和微生物源性抗氧化物质的特点，利用微生物转化中药活性成分，微生物转化的本质是利用微生物生长代谢过程中产生的酶对特定底物进行结构修饰的化学反应，利用微生物发酵炮制中药的过程实际上就是一种生物转化反应，中药成分的生物转化是研究开发新药的重要方面。微生物在生长过程中可以分泌几十种胞外酶于培养基中，其生命活动所产生的胞内酶更是成百上千，这些丰富而强大的酶系就可能成为中药发生化学反应的物质基础。由于微生物具有种类繁多、繁殖快等特点，所以微生物转化常被用来对天然产物的结构进行修饰，以获得一些结构更合理或活性更好的先导化合物。其优点可概括为：1)保护中药活性成分免遭破坏，使药物的有效组分、活性物质最大限度地得以提取、利用；2)提高中药药性，降低药物的毒副作用；3)所优选的有益菌种本身能补充或增强原有药物的功能；4)产生新的活性物质；5)为中药活性成分结构修饰提供新途径；6)节省药材资源，保护环境；7)是实现中药现代化、具有高科技水平的又一新技术，生产工艺可控，所得产物精确，制剂方便，便于与国际接轨。石斛作为传统珍稀名贵中药，石斛在临床上广泛用于慢性萎缩性胃炎及降血糖、抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力等多种疾病，而这些疾病的产生在很大程度上都与体内活性氧的代谢失调有关，目前有研究表明联苄类和酚酸类成分具有抗氧化活性。同时，有研究报道红曲霉次级代谢产物中的Dimerumic acid、酚类、色素、黄酮、dihydromonacolin-MV、他汀类、类黄酮等都具有较好的抗氧化作用。特别是Dimerumic acid，在较低的浓度就表现出很强的抗氧化活性。所以红曲霉无论直接食用还是作为添加剂，都可以为人体提供抗氧化物质，减少氧化损伤。红曲霉不但自身丰富的代谢产物具有很高的药用价值，而且它丰富的酶系对中草药活性成分的转化与修饰存在巨大的潜力，是双向发酵体系用菌种的良好选择，石斛作为传统珍稀名贵中药，石斛在临床上广泛用于慢性萎缩性胃炎及降血糖、抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力等多种疾病，而这些疾病的产生在很大程度上都与体内活性氧的代谢失调有关，目前有研究表明联苄类和酚酸类成分具有抗氧化活性。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种石斛红曲制备方法，金钗石斛与红曲霉互相影响，协同增效，达到预料不到的抗氧化效果。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：一种石斛红曲制备方法，将红曲霉在添加有金钗石斛的培养基培养，得到的培养产物即为石斛红曲。本专利技术提供的石斛红曲制备方法，结合中草药和微生物源性生成抗氧化活性物质的共同特点，利用抗氧化作用疗效确切的金钗石斛与已有研究报道具有生成抗氧化性物质的红曲霉进行共同发酵培养，在红曲霉代谢转化金钗石斛的同时，金钗石斛也对红曲霉的代谢流产生影响，两者产生互补及增效的作用，得到的石斛红曲达到了非常显著的抗氧化效果，这种效果是单纯利用红曲霉发酵或金钗石斛无法达到的。其中，红曲霉为市售菌株。进一步地，所述红曲霉在添加有金钗石斛的培养基培养前，先将红曲霉菌株培养成发酵种子液，将所述发酵种子液接种于添加有金钗石斛的培养基培养。先将红曲霉制成发酵种子液，此时菌体的浓度为，得到的种子液中菌体数量大，菌体生长旺盛，利于下一步的发酵培养。具体地，每升添加有金钗石斛的培养基含有以下成分：20-50g米粉，由金钗石斛制成的金钗石斛汁，蛋白胨9-11g，加水定容。本专利技术提供的添加有金钗石斛的培养基营养成分全面，红曲霉能很好的生长，并且红曲霉能很好的转化利用培养基中的金钗石斛，红曲霉与金钗石斛两者相互作用，得到的石斛红曲抗氧化能力大大增强。进一步地，所述由金钗石斛制成的金钗石斛汁为：由50-60g新鲜金钗石斛或4-5g干的金钗石斛制成的金钗石斛汁。每升培养基添加该含量的金钗石斛，很好的满足了红曲霉与金钗石斛两者之间的相互作用，得到的斛红曲抗氧化能力大大增强。进一步地，所述金钗石斛汁由以下方法制备：称取50-60g新鲜或4-5g干的金钗石斛，加水250-400ml，打成混合浆液即得。该方法易于制得金钗石斛汁，并且其中的成分分布更为均匀。优选地，所述发酵种子液按体积百分比为8％-11％进行接种于添加有金钗石斛的培养基培养。以该百分比的接种量进行接种，既利于红曲霉在添加有金钗石斛的培养基快速扩增，并很好的转化金钗石斛的成分，获得的石斛红曲抗氧化成分含量高，且活性强。进一步地，所述发酵种子液由以下方法制备：将浓度为3×106-7×106cfu的红曲霉孢子悬液按体积百分比为6-10％接种于种子培养基，30℃±1，180-250r/min振荡培养72-80h，制备得到发酵种子液；每升所述种子培养基包括以下成分：麦芽糖4-6g，蛋白胨9-11g，酵母膏4-6g，葡萄糖19-21g，加水定容。制得的发酵种子液的OD600值达到0.7-0.9，菌体生长旺盛，利于下一步的发酵培养。优选地，所述孢子悬液在制备前先进行活化；所述活化优选为：将保存的红曲霉菌种转接斜面培养基，30℃±1培养4-6d取出；再将培养好的斜面菌种转接斜面培养基，30℃±1培养7-8d，即可。菌种在培养前先进行活化，以增强菌体的活力。进一步地，每升所述斜面培养基包括以下成分：麦芽糖4-6g，蛋白胨9-11g，酵母膏4-6g，琼脂19-21g，葡萄糖19-21g，加水定容。该斜面培养基使红曲霉菌种很好的生长，得到的菌株活力高。优选地，所述将红曲霉在添加有金钗石斛的培养基培养的条件具体为：30℃±1℃，180-210rmp振荡培养3-4d；然后27℃±1℃静止培养4-6d发酵终止。先对红曲霉进行振荡培养，以使红曲霉快速扩增，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种石斛红曲制备方法，其特征在于，将红曲霉在添加有金钗石斛的培养基培养，得到的培养产物即为石斛红曲。

【技术特征摘要】
1.一种石斛红曲制备方法，其特征在于，将红曲霉在添加有
金钗石斛的培养基培养，得到的培养产物即为石斛红曲。
2.根据权利要求1所述的石斛红曲制备方法，其特征在于，
所述红曲霉在添加有金钗石斛的培养基培养前，先将红曲霉培养成
发酵种子液，将所述发酵种子液接种于添加有金钗石斛的培养基培
养。
3.根据权利要求1所述的石斛红曲制备方法，其特征在于，
每升所述添加有金钗石斛的培养基含有以下成分：20-50g米粉，由
金钗石斛制成的金钗石斛汁，蛋白胨9-11g，加水定容。
4.根据权利要求3所述的石斛红曲制备方法，其特征在于，
所述由金钗石斛制成的金钗石斛汁为：由50-60g新鲜金钗石斛或
4-5g干的金钗石斛制成的金钗石斛汁。
5.根据权利要求3所述的石斛红曲制备方法，其特征在于，
所述金钗石斛汁由以下方法制备：称取50-60g新鲜或4-5g干的金
钗石斛，加水250-400ml，打成混合浆液即得。
6.根据权利要求2所述的石斛红曲制备方法，其特征在于，
所述发酵种子液按体积百分比为8％-11％进行接种于添加有金钗石
斛的培养基培养。
7.根据权利要求2所述的石斛红曲制备方法，其特征在于，

【专利技术属性】
技术研发人员：周礼红，侯素媛，
申请(专利权)人：周礼红，
类型：发明
国别省市：贵州;52