一种紫萁离体培养各阶段的培养基，各阶段的培养基如下：①诱导孢子萌发较好的培养基为：1/2MS+2-3%蔗糖琼脂培养基，②原叶体(配子体)增殖培养基配方MS+0.2-0.6mg/L KT+1.0-1.5mg/L IBA琼脂培养基。③诱导原叶体受精萌发孢子体配方为：MS液体培养基，④孢子体增殖较好的培养基为：MS+0.2-0.6mg/L NAA+0.5-1.0mg/L 6-BA液体培养基。有益效果：提供繁殖各阶段的培养基配方，有助于提高紫萁的繁殖能力，高效简捷的培养方法有利于实现紫萁的规模化生产，无论对于企业还是农民，都有相当大的经济效益和社会效益。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及蕨类植物的组织培养技术，尤其涉及紫萁离体培养各阶段的培养基。
技术介绍
紫萁Thunb)属于蕨类植物门，真蕨类，原始厚囊蕨纲，紫萁 目，紫萁科，紫萁属的一种多年生草本植物，既是一种山野菜又是一种名贵中药材。贵州境 内各县都有紫萁（薇菜）分布，老百姓每年春季采摘野生紫萁加工成薇菜干销售或食用，。 紫萁中含有黄酮类、内酯类、留酮类、多糖类、鞣质及氨基酸类成分。薇菜干富含蛋白质、氨 基酸、纤维素、碳水化合物，以及钾、娃、镁、磷、铁、锌等营养成分，营养品质优良，可与金菜 干、木耳、竹荪等名贵山珍食品媲美，是目前我国主销日本、韩国等地的一种名贵山野菜。紫 萁的根茎及叶柄残基能清热解毒，止血杀虫，有小毒。利用紫萁为原材料提取有效成分用于 医药用品及开发保健食品，符合当今世界食品营养学和预防医学的发展方向。但由于紫萁 自然繁殖力低，大量的采掘野生蕨类资源作为母种，对于水土保持和野生资源的保护是不 利的，限制了薇菜的规模化生产，因此，以孢子体为材料进行组织培养在紫萁规模化生产上 有很大的发展和应用前景。 紫萁(薇菜)，在其生活史中，要经历孢子体和配子体两个世代，其配子体有性生活 世代的授精过程中需要水作为介质，用常规的离体培养方法很难获得成功，本专利技术根据蕨 类植物的这一特点，探索出一套紫萁(薇菜）离体培养的组合配方。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种紫萁离体培养各阶段的培养基，以孢子体为材料进行组 织培养，克服紫萁自然繁殖力低，限制了薇菜的规模化生产，为紫萁规模化生产提供技术条 件。 具体各阶段的培养基如下： 1)诱导孢子体萌发形成原叶体培养基配方： 1/2MS+2-3%蔗糖琼脂培养基。 2)原叶体（配子体）增殖培养基配方： MS+0. 2-0. 6mg/LKT+1.O-L5mg/LIBA琼脂培养基。 3)诱导原叶体受精萌发孢子体配方： MS液体培养基。 4 )孢子体增殖培养基配方： MS+0. 2-0. 6mg/LNAA+0. 5-1.Omg/L6-BA液体培养基。 本技术方案的有益效果：提供繁殖各阶段的培养基配方，有助于提高紫萁的繁殖 能力，高效简捷的培养方法有利于实现紫萁的规模化生产，无论对于企业还是农民，都有相 当大的经济效益和社会效益。【具体实施方式】 下面由具体实施例说明 采集不同成熟度植株数株，分别剪取不同成熟度的紫萁的孢子囊穗，将其用洗衣粉浸 泡5min，洗去表面灰尘，再用自来水冲洗30min,无菌条件下，用75%的酒精消毒60s，无菌 水冲洗3次,再用0. 1%的升萊溶液灭菌8min,无菌水冲洗4?5次,再用无菌吸水纸吸干 表面水分，切成〇. 5cm长的小段，然后将其接种于孢子萌发培养基中。 诱导孢子体萌发形成原叶体 诱导孢子体萌发形成原叶体的培养基以MS培养基为基本培养基，MS分为1/4、1/2、1 三个水平浓度，蔗糖分为2%、3%两个水平(见表1)，接种材料紫萁孢子囊穗成熟度分为嫩绿 色的幼苗、深绿色的壮苗和褐色的老苗三个水平，分别记为成熟度I、成熟度II、成熟度III， 接入1个0. 5cm长的孢子囊穗段，放入培养室培养。观察统计存活率，并结合成活率与生长 状态，筛选出较好的培养基配方。 表1诱导孢子体萌发的培养基配方【主权项】1. 一种紫萁离体培养各阶段的培养基，其特征在于，具体各阶段的培养基如下： 1) 诱导孢子体萌发形成原叶体培养基配方： 1/2MS+2-3%蔗糖琼脂培养基； 2) 原叶体即配子体增殖培养基配方： MS+O. 2-0. 6mg/LKT+1.O-L5mg/LIBA琼脂培养基； 3) 诱导原叶体受精萌发孢子体配方： MS液体培养基； 4) 孢子体增殖培养基配方： MS+O. 2-0. 6mg/LNAA+0. 5-1.Omg/L6-BA液体培养基。【专利摘要】一种紫萁离体培养各阶段的培养基，各阶段的培养基如下：①诱导孢子萌发较好的培养基为：1/2MS+2-3%蔗糖琼脂培养基，②原叶体(配子体)增殖培养基配方MS+0.2-0.6mg/L KT+1.0-1.5mg/L IBA琼脂培养基。③诱导原叶体受精萌发孢子体配方为：MS液体培养基，④孢子体增殖较好的培养基为：MS+0.2-0.6mg/L NAA+0.5-1.0mg/L 6-BA液体培养基。有益效果：提供繁殖各阶段的培养基配方，有助于提高紫萁的繁殖能力，高效简捷的培养方法有利于实现紫萁的规模化生产，无论对于企业还是农民，都有相当大的经济效益和社会效益。【IPC分类】A01H4-00【公开号】CN104542300【申请号】CN201510042794【专利技术人】邓坦 【申请人】遵义师范学院【公开日】2015年4月29日【申请日】2015年1月28日本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种紫萁离体培养各阶段的培养基，其特征在于，具体各阶段的培养基如下：1）诱导孢子体萌发形成原叶体培养基配方：1/2MS +2‑3%蔗糖琼脂培养基；2）原叶体即配子体增殖培养基配方：MS+0.2‑0.6mg/L KT+1.0‑1.5mg/L IBA 琼脂培养基；3）诱导原叶体受精萌发孢子体配方：MS液体培养基；4 ）孢子体增殖培养基配方：MS+0.2‑0.6mg/L NAA+0.5‑1.0mg/L 6‑BA液体培养基。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：邓坦，
申请(专利权)人：遵义师范学院，
类型：发明
国别省市：贵州;52
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