一种疫苗组合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种疫苗组合物，该疫苗组合物包括免疫量的圆环病毒2型抗原以及左旋咪唑或其衍生物。该疫苗组合物可以大幅度提高疫苗的免疫效力，同时可以用作冻干的活病毒抗原的稀释剂，且该疫苗组合物具有稳定性，长时间保藏后其免疫效力测定均与0天刚配制时无差异。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种疫苗组合物，具体地说，涉及一种圆环病毒疫苗组合物。
技术介绍
猪圆环病毒（PCV）是迄今发现的一种最小的动物病毒。现已知PCV有两个血清型，即PCV1和PCV2。PCV1为非致病性的病毒。PCV2为致病性的病毒，它是断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原。PMWS的临床特征有消瘦、皮肤苍白、呼吸困难、腹泻、黄疽等。病理变化可见全身淋巴结肿大，特别是腹股沟淋巴结肿大可达5～10倍；肺主要呈弥散性、间质性肺炎变化，质地硬如橡皮，表面一般呈灰褐色的斑驳状外观；肾的变化较多，可见皮质和髓质散在大小不一的白色坏死灶，由于水肿而导致其呈现蜡样外观；脾轻度肿大；大多病猪的肝有不同程度的萎缩、纤维化。除PMWS外，猪皮炎与肾病综合征（PDNS）、增生性坏死性肺炎（PNP）、猪呼吸道疾病综合征（PRDC）、繁殖障碍、先天性颤抖、肠炎等疾病亦与PCV2感染有重要关联。PCV2相关的猪病，死亡率达10%～30%不等，较严重的猪场在暴发时死淘率高达40%，给养猪业造成严重的经济损失。现有技术通过全病毒灭活疫苗和PCV2的CAP蛋白制备的亚单位疫苗用于预防PMWS，然而全病毒灭活疫苗，由于PCV的细胞产量不高造成成本较高，而亚单位疫苗具有不在动物体内增殖，无外源性核酸，因此不具传染性等优点，但同时也存在纯化成本高的问题。现有技术需要一种成本低廉且高效的针对圆环病毒的疫苗。专利技术内容为解决现有技术的不足，本专利技术提供一种圆环病毒疫苗，包含：圆环病毒2型抗原、左旋咪唑或其衍生物、聚合物和药学上可以接受的载体。本专利技术的主要目的在于提供一种疫苗组合物，所述疫苗组合物包括免疫量的圆环病毒2型抗原以及左旋咪唑或其衍生物。术语“猪圆环病毒2型抗原”是指含有至少一种PCV2抗原形式的任何组合物，所述抗原接种猪可诱导、刺激或增强抵抗PCV2感染的免疫应答。所述PCV2抗原可以是PCV2全病毒、如灭活的PCV2全病毒、含有PCV2免疫原性氨基酸序列（如ORF2蛋白）的嵌合病毒，任何其它至少含PCV2免疫原性氨基酸序列的多肽或亚单位或其他成分。PCV2抗原还可以包含以下组合物的任一种抗原：如梅里亚公司（Merial）的辉瑞公司（Pfizer）的PCV2；哈尔滨维科生物技术开发公司的猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）；福州大北农生物技术有限公司的猪圆环病毒2型灭活疫苗（DBN-SX07株）和基因工程亚单位疫苗（如勃林格殷格翰公司（Boehringer-Ingelheim）的Ingelvac等等）因PCV2基因组大小为1767bp或1768bp，不同毒株之间核苷酸序列同源性较高，均在90%以上，因此PCV2SH株（GenBank登录号为AY686763）、PCV2LG株（GenBank登录号为HM038034）、PCV2DBN-SX07-2（GenBank登录号为HM641752）均在本专利技术之内。优选地，所述圆环病毒2型抗原为PCV2ORF2蛋白，所述PCV2ORF2蛋白为2～300微克/mL，更优选2～60微克/mL，最优选60微克/mL。优选地，所述圆环病毒2型抗原为灭活的猪圆环病毒2型全病毒抗原，所述猪圆环病毒2型全病毒抗原为灭活前≥106.0TCID50。本专利技术所述圆环病毒2型抗原，优选亚单位抗原或灭活后的全病毒抗原。作为本专利技术的一种实施方式，全病毒抗原为SH株全病毒抗原，可按照专利申请CN101240264A公开的方法、菌株制备，作为本专利技术的另外一种实施方式，抗原为PCV2ORF2蛋白，可按照专利申请CN103173470A公开的方法、基因来源制备。所述SH菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期2008年3月4日，保藏号为CGMCC No.2389。圆环病毒的抗原含量，至少包含2微克PCV2ORF2蛋白/剂量，优选2～300微克PCV2ORF2蛋白/剂量，更优选20-150微克PCV2ORF2蛋白/剂量，更优选50-100微克PCV2ORF2蛋白/剂量，更优选60微克PCV2ORF2蛋白/剂量。全病毒的灭活疫苗灭活前病毒含量述猪圆环病毒抗原为1×105.0TCID50/剂量以上，优选106.0TCID50/剂量以上。优选地，左旋咪唑衍生物为左旋咪唑盐酸盐或磷酸盐，所述左旋咪唑或其衍生物的含量为0.1～10毫克/mL，更优选1.5～3毫克/mL。术语左旋咪唑为分子式C11H12N2S化合物，左旋咪唑的衍生物是指左旋咪唑衍生物是其盐酸盐或磷酸盐，使用时按其分子量折算为左旋咪唑的量。左旋咪唑或衍生物优选0.1毫克～10毫克/剂量，更优选0.5毫克g～5毫克/剂量，更优选1.0毫克～3毫克/剂量，更优选1.5毫克～2毫克/剂量最优选1.5毫克/剂量。优选地，所述疫苗组合物进一步包括聚合物，所述聚合物包括DEAE葡聚糖、聚乙二醇、聚丙烯酸，以及聚甲基丙烯酸，优选聚丙烯酸，更优选卡波姆，所述聚合物含量为0.1～500毫克/mL，更优选2毫克//mL。疫苗组合物还可包括一或多种聚合物，诸如，例如：DEAE葡聚糖、聚乙二醇和聚丙烯酸，以及聚甲基丙烯酸。这类物质可自市场购得。适合用于佐剂组合物中的聚合物的量取决于所使用的聚合物的性质。优选地，本专利技术所述聚合物为聚丙烯酸；更优选地，所述聚合物为商品名为卡波姆（Carbomer）的聚丙烯酸；本专利技术所述聚合物的量为0.1毫克～500毫克/剂量，优选1毫克～20毫克剂量,更优选5毫克～10毫克/剂量，更优选1毫克～3毫克剂量，最优选2mg/剂量。优选地，所述疫苗组合物进一步包括DDA，DDA含量为1～5000微克/mL，更优选50～150微克/mL。作为本专利技术的另一种实施方式，组合物中还含有DDA，所述DDA为双十八烷基二甲基溴化铵的简称。通常为每剂量约1微克至约5000微克。其使用量亦可为每剂量约1微克至约4000微克、每剂量约1微克至约3000微克、每剂量约1微克至约2000微克及每剂量约1微克至约1000微克。其使用量亦可为每剂量约5微克至约750微克、每剂量约5微克至约500微克、每剂量约5微克至约200微克、每剂量约5微克至约100微克、每剂量约15微克至约100微克及每剂量约30微克至约75微克。优选地，所述疫苗组合物进一步包括药学上可以接受的载体，所述药学上可以接受的载体包括任何可用的溶剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种疫苗组合物，所述疫苗组合物包括免疫量的圆环病毒2型抗原以及左旋咪唑或其衍生物。

【技术特征摘要】
1.一种疫苗组合物，所述疫苗组合物包括免疫量的圆环病毒2型
抗原以及左旋咪唑或其衍生物。
2.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，所述圆环病毒2
型抗原为PCV2ORF2蛋白，所述PCV2ORF2蛋白为2～300微克/mL，
更优选2～60微克/mL，最优选60微克/mL。
3.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，所述圆环病毒2
型抗原为灭活的猪圆环病毒2型全病毒抗原，所述猪圆环病毒2型全病
毒抗原为灭活前≥106.0TCID50。
4.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，左旋咪唑衍生物为
左旋咪唑盐酸盐或磷酸盐，所述左旋咪唑或其衍生物的含量为0.1～10
毫克/mL，更优选1.5～3毫克/mL。
5.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物
进一步包括聚合物，所述聚合物包括DEAE葡聚糖、聚乙二醇、聚
丙烯酸，以及聚甲基丙烯酸，优选聚丙烯酸，更优选卡波姆，所述聚
合物含量为0.1～500毫克/mL，更优选2毫克//mL。
6.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物
进一步包括DDA，DDA含量为1～5000微克/mL，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张许科，孙进忠，田克恭，
申请(专利权)人：普莱柯生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41