重组人血管内皮抑制素在制备治疗眼表新生血管性疾病药物中的应用制造技术

重组人血管内皮抑制素在制备治疗眼表新生血管性疾病药物中的应用，研究表明，重组人血管内皮抑制素能显著的抑制眼表新生血管的形成，且安全无毒，无耐药性，在治疗眼表抗新生血管药物具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

： 本专利技术属于生物制药
，具体涉及重组人血管内皮抑制素在制备治疗眼表 新生血管性疾病药物中的应用。 技术背景： 恩度（Endostar)的通用名为重组人血管内皮抑制素注射液，是我国学者自主研 发的一种新型重组人血管内皮抑制药物，Endostar是以重组DNA技术生产，采用大肠杆菌 作为蛋白表达体系生产出的重组人血管内皮抑制素。恩度的作用机制在于抑制肿瘤新生血 管形成，阻断肿瘤细胞的营养供应，最终达到"饿死"肿瘤细胞的目的。恩度是国家一类新 药，不属于化疗药物，肿瘤在体内生长达到2mm 3以上时，必需形成自身的血管网络输送营养 物质，否则不能继续生长。抑制肿瘤血管形成，切断其营养供应，一段时间后肿瘤就会处于 休眠状态，长期作用的结果是导致肿瘤细胞死亡，这种治疗方法称为肿瘤饥饿疗法。所有的 抗肿瘤血管生成的药物都归属于该疗法。 眼部新生血管是眼部由于组织缺血、缺氧而导致新生血管形成为病理改变的疾 病。由于新生血管形态和功能的异常，其伴随出现的渗出、增殖、出血等病变，会导致正常眼 部结构和功能的破坏，造成严重的视功能损害。其中眼表新生血管性疾病可发生于角膜化 学伤、破裂伤、感染性炎症、免疫性眼病、暴露性角膜炎、翼状胬肉、倒睫、角膜变性、营养不 良及既往眼表手术包括角膜移植术等多种病理情况下，是常见的致盲眼病之一。其具体的 发病机制尚不明确，主要的原因为眼内促血管生成因子（血管内皮生长因子、成纤维细胞 生长因子、转化生长因子β 1、白细胞介素1等）与血管生长抑制因子（基质金属蛋白、氧化 氮合酶、内源性内皮抑制素、硫酸肝素等）之间调控机制失衡，与角膜水肿、炎症、缺氧等有 关。 眼表新生血管的治疗是一大难题，迄今还没有特效药物及特效的治疗方法。目前 临床上应用的主要方法有激光光凝、光动力疗法、手术；常用的药物主要为激素、血管内皮 生长因子拮抗剂、中成药等。这些治疗虽有一定疗效，但也存在着损伤正常组织、疗效有限 的弊端。激光、手术均只能在局部范围开展，激素的长期应用会带来一系列副反应，光动力 疗法、血管因子拮抗剂价格昂贵而常需多次治疗，无法逆转已产生的病变，不能产生远期的 视力改善。眼表新生血管对患者视力构成严重威胁，需要更有效的治疗方法和药物。
技术实现思路
： 本专利技术的目的在于提供重组人血管内皮抑制素在制备治疗眼表新生血管性疾病 药物中的应用。 本专利技术的目的通过以下技术方案实现： 。 所述的眼表新生血管性疾病为眼表各种原因造成新生血管侵入透明角膜，包括眼 表化学伤、角膜穿通伤、感染性角膜炎、热烧伤、沙眼、流行性角结膜炎、暴露性角膜炎、免疫 性眼病、Terrien边缘性变性、角膜破裂伤、角膜变性、角膜营养不良、长期佩戴隐形眼镜、角 膜移植手术及既往其它角膜手术产生的角膜新生血管、翼状胬肉、圆锥角膜、角膜葡萄种、 倒睫以及Stevens-Johnson综合征；或者为视网膜新生血管等。尤其是眼表化学伤、角膜穿 通伤、感染性角膜炎、角膜手术形成的新生血管、翼状胬肉以及Stevens-Johnson综合征。 所述的药物包括重组人血管内皮抑制素和药学上可接受的载体或者常规使用的 辅料。 所述药物的剂型为注射制剂。 本专利技术的有益效果： 研宄表明，重组人血管内皮抑制素能显著的抑制眼表新生血管的形成，且安全无 毒，无耐药性，在治疗眼表抗新生血管药物具有广阔的应用前景。【具体实施方式】： 为了更好的说明本专利技术，下面结合药物实验、动物实验以及临床实验说明其在制 备眼表抗新生血管药物中的用途，如无特别说明，下文中所涉及的实验用材料均可通过商 业途径获得。 1、重组人血管内皮抑制素注射液（恩度）对血管内皮细胞增殖的影响 I. 1实验材料 细胞：人脐静脉内皮细胞株ECV304由中科院上海细胞库提供。 主要生化试剂：重组人血管内皮抑制素注射液（恩度），山东先声麦得津生物制药 有限公司生产 1.2实验方法 将人脐静脉内皮细胞株ECV304进行复苏、培养、传代及鉴定，取对数生长期细胞， 用PBS缓冲液稀释成5X IOVmL密度接种于96孔培养板中，每孔100 μ L，分别向孔中加 入 PBS 稀释的不同稀释度（5000 μ g/mL、2500 μ g/mL、1250 μ g/mL、625 μ g/m、313 μ g/mL、 125 μ g/mL)的重组人血管内皮抑制素溶液100 μ L/孔，每组均设6个复孔，对照组不添加 重组人血管内皮抑制素，添加同等体积有血清培养液。于37°C、5% CO2培养箱内培养24h， 48h，72h天后使用MTT (四甲基偶氮唑盐）法染色，在酶标仪490nm处测定实验组与对照组 吸光度，并计算细胞增殖抑制率，结果见表1。 表1重组人血管内皮抑制素对ECV304的细胞增殖抑制率【主权项】1. 。2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的眼表新生血管性疾病为由眼表化 学伤、角膜穿通伤、感染性角膜炎、热烧伤、沙眼、流行性角结膜炎、暴露性角膜炎、免疫性眼 病、Terrien边缘性变性、角膜破裂伤、角膜变性、角膜营养不良、长期佩戴隐形眼镜及角膜 手术所形成的角膜新生血管、翼状胬肉、圆锥角膜、角膜葡萄种、倒睫及Stevens-Johnson 综合征；或者为视网膜新生血管。3. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的药物包括重组人血管内皮抑制素和 药学上可接受的载体或者常规使用的辅料。4. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述药物的剂型为注射制剂。【专利摘要】，研究表明，重组人血管内皮抑制素能显著的抑制眼表新生血管的形成，且安全无毒，无耐药性，在治疗眼表抗新生血管药物具有广阔的应用前景。【IPC分类】A61P9-10, A61K38-17, A61P27-02【公开号】CN104548067【申请号】CN201410814133【专利技术人】沈婷, 洪朝阳 【申请人】浙江省人民医院, 江苏先声药业有限公司【公开日】2015年4月29日【申请日】2014年12月23日本文档来自技高网...

【技术保护点】
重组人血管内皮抑制素在制备治疗眼表新生血管性疾病药物中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：沈婷，洪朝阳，
申请(专利权)人：浙江省人民医院，江苏先声药业有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33