一种酵母活性蛋白酶制造技术

本发明专利技术涉及一种酵母活性蛋白酶。酵母是人类利用最早、最多、最广泛的一种单细胞微生物，其中含有大量优质的活性蛋白酶，同时，酵母来源广泛，生物安全性高的特点，非常适合规模化生产活性蛋白酶。本发明专利技术提供的活性蛋白酶即以酵母为原料，克服了现有技术中提取酵母活性蛋白酶时产能有限、过程耗时长、效率低等一系列缺陷，依次采用葡聚糖凝胶柱层析和金属螯合亲和柱层析代替丙酮的二次沉淀，采用环保、高效的聚乙二醇浓缩法对经过柱层析的洗脱液进行浓缩，得到高纯度的活性蛋白酶。本发明专利技术提供活性蛋白酶具有较高的纯度和较好的生物活性，可以作为原料用于制备化妆品。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种酵母活性蛋白酶，其特征在于，所述酵母活性蛋白酶由包括以下步骤的方法制备而成：1)将酵母与pH4.8～5.2的0.015～0.025mol/L柠檬酸缓冲液混合，500～2000bar条件下高压均质，循环2～10次，离心后取上清，即得粗酶液；2)将硫酸铵加入步骤1)所得粗酶液中，静置，离心后收集沉淀；3)将步骤2)所得沉淀溶解于pH7.0～7.4的0.01～0.02mol/L磷酸盐缓冲液中，将所得溶液加入平衡好的葡聚糖凝胶柱Sephadex G‑25顶端，用本步骤所述磷酸盐缓冲液进行洗脱，收集含有蛋白质且不含硫酸铵的洗脱液，浓缩，得浓缩液；4)在步骤3)所得浓缩液中加入NaCl，得到NaCl浓度为0.4～0.6mol/L的溶液，将所得溶液加入平衡好的金属螯合亲和柱顶端，用pH 5.8～6.2的0.015～0.025mol/L磷酸盐缓冲液进行洗脱；收集含有蛋白质的洗脱液；5)取步骤4)所得洗脱液，浓缩，冷冻干燥，即得酵母活性蛋白酶。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈光，赵秋霞，盛美田，
申请(专利权)人：唯美度科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11