杀虫蛋白的用途制造技术

本发明专利技术涉及一种杀虫蛋白的用途，所述控制粟灰螟害虫的方法包括：将粟灰螟害虫至少与Cry1A.105蛋白接触。本发明专利技术通过植物体内产生能够杀死粟灰螟的Cry1A.105蛋白来控制粟灰螟害虫；与现有技术使用的农业防治方法、化学防治方法和物理防治方法相比，本发明专利技术对植物进行全生育期、全植株的保护以防治粟灰螟害虫的侵害，且无污染、无残留，效果稳定、彻底，简单、方便、经济。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术设及一种杀虫蛋白的用途，特别是设及一种&ylA. 105蛋白质通过在植物 中表达来控制粟灰惧为害植物的用途。
技术介绍
栗灰惧烟lilo in化scatellus)又名甘庶二点惧，属于鱗翅目惧蛾科，广泛分布于 东南亚、南亚及中国，在中国主要为害禾本科作物，如玉米、高梁、谷子和甘庶等。粟灰惧为 蛙茎害虫，植株受害后可造成枯屯、株。一般情况下，春谷区和春夏谷混播区发生重，夏谷区 为害轻。 玉米是中国重要的粮食作物，随着全球温室效应的加强，近两年温度不断上升，虫 害发生种类及数量都有所提高。粟灰惧曾经是华北地区和华南地区的主要害虫，主要为害 高梁、谷子和甘庶。但近年来，出现了大量关于粟灰惧为害玉米的报道，且该为害呈上升趋 势。目前针对粟灰惧的为害，主要依靠农业防治、化学防治和物理防治。 农业防治是对整个农田生态系统中的多因素的综合协调管理，调控作物、害虫、环 境因素、创造一个有利于作物生长而不利于粟灰惧发生的农田生态环境。因粟灰惧一般在 ±表下10cm的残茎中越冬，因此可W通过及时清理收获后的玉米、高梁、谷子和甘庶的枯 叶、残茎，W达到消灭越冬虫源的目的。同时可针对粟灰惧的食性较为单一，而采用轮作的 方式W降低虫源密度，例如可与大豆、棉花、蔬菜等阔叶类作物进行轮种。但不同作物的经 济效益的不同，轮作很可能造成农民收入的降低，而很难得到实行。 化学防治即农药防治，是利用化学杀虫剂来杀灭害虫，是粟灰惧综合治理的重要 组成部分，它具有快速、方便、简单和高经济效益的特点，特别是粟灰惧大发生的情况下，是 必不可少的应急措施。粟灰惧作为蛙茎害虫，对其的防治时期把握非常重要，用药最佳时期 是卵解盛期至幼虫蛙茎之前，否则高龄幼虫蛙入茎杆之后，将很难达到防治的目的。目前化 学防治方法主要是药液喷雾和施撒毒±。但化学防治也有其局限性，如使用不当往往会导 致农作物发生药害、害虫产生抗药性，W及杀伤天敌、污染环境，使农田生态系统遭到破坏 和农药残留对人、畜的安全构成威胁等不良后果。 物理防治主要根据害虫对环境条件中各种物理因素的反应，利用各种物理因素如 光、电、色、温湿度等W及机械设备进行诱杀、福射不育等方法来防治害虫。目前应用最广泛 的是频振式杀虫灯诱杀，它利用害虫成虫的趋光性，近距离用光，远距离用波，引诱害虫靠 近，对粟灰惧成虫的具有一定的防治效果；但是频振式杀虫灯需要每天及时清理高压电网 上的污垢，否则会影响杀虫效果；并且在雷雨天不能开灯，在操作上还有电击伤人的危险； 此外安装灯的一次性投入较大。 为了解决农业防治、化学防治和物理防治在实际应用中的局限性，科学家们经过 研究发现将来自于苏云金芽抱杆菌的编码杀虫蛋白的抗虫基因转入植物中，可获得一些抗 虫转基因植物W防治植物虫害。化ylA. 105杀虫蛋白是众多杀虫蛋白中的一种，化ylA. 105 蛋白是一个嵌合蛋白，它分别来自于化ylAb蛋白、化ylAc蛋白和化yl化蛋白。 化ylA. 105蛋白被昆虫摄入进入中肠，毒蛋白原毒素被溶解在昆虫中肠的碱性抑 环境下。蛋白N-和C-末端被碱性蛋白酶消化，将原毒素转变成活性片段；活性片段和昆虫 中肠上皮细胞膜上表面上受体结合，插入肠膜，导致细胞膜出现穿孔病灶，破坏细胞膜内外 的渗透压变化及抑平衡等，扰乱昆虫的消化过程，最终导致其死亡。 已证明转化ylA. 105基因的植株可W抵抗玉米惧等鱗翅目（Lepidoptera)害虫的 侵害，然而，至今尚无关于通过产生表达化ylA. 105蛋白的转基因植株来控制粟灰惧对植 物危害的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种杀虫蛋白的用途，首次提供了通过产生表达化ylA. 105 蛋白的转基因植株来控制粟灰惧对植物危害的方法，且有效克服现有技术农业防治、化学 防治和物理防治等技术缺陷。 为实现上述目的，本专利技术提供了一种控制粟灰惧害虫的方法，包括将粟灰惧害虫 至少与化ylA. 105蛋白接触。 进一步地，所述化ylA. 105蛋白存在于至少产生所述化ylA. 105蛋白的宿主细胞 中，所述粟灰惧害虫通过摄食所述宿主细胞至少与所述化ylA. 105蛋白接触。 更进一步地，所述化ylA. 105蛋白存在于至少产生所述化ylA. 105蛋白的细菌或 转基因植物中，所述粟灰惧害虫通过摄食所述细菌或所述转基因植物的组织至少与所述 &ylA. 105蛋白接触，接触后所述粟灰惧害虫生长受到抑制和/或导致死亡，W实现对粟灰 惧危害植物的控制。 所述转基因植物可W处于任意生育期。 所述转基因植物的组织为叶片、茎杆、果实、雄穗、雌穗、花药或花丝。 所述对粟灰惧危害植物的控制不因种植地点和/或种植时间的改变而改变。 所述植物为玉米、高梁、谷子、甘庶、水稻、小麦、大麦或燕麦。 所述接触步骤之前的步骤为种植含有编码所述&ylA. 105蛋白的多核巧酸的植 物。 优选地，所述化ylA. 105蛋白的氨基酸序列具有SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列。 所述化ylA. 105蛋白的核巧酸序列具有SEQ ID N0:2所示的核巧酸序列。 在上述技术方案的基础上，所述植物还可W包括至少一种不同于编码所述 化ylA. 105蛋白的核巧酸的第二种核巧酸。 进一步地，所述第二种核巧酸编码类杀虫蛋白质、Vip类杀虫蛋白质、蛋白酶 抑制剂、凝集素、a-淀粉酶或过氧化物酶。 优选地，所述第二种核巧酸编码化y2Ab蛋白。 进一步地，所述化y2Ab蛋白的氨基酸序列具有SEQ ID N0:3所示的氨基酸序列。 更进一步地，所述化y2Ab蛋白的核巧酸序列具有SEQ ID N0:4所示的核巧酸序 列。 可选择地，所述第二种核巧酸为抑制目标昆虫害虫中重要基因的dsRNA。 为实现上述目的，本专利技术还提供了一种化ylA. 105蛋白质控制粟灰惧害虫的用 途。 为实现上述目的，本专利技术还提供了一种产生控制粟灰惧害虫的植物的方法，包括 向所述植物的基因组中引入编码化ylA. 105蛋白的多核巧酸序列。[002引为实现上述目的，本专利技术还提供了一种产生控制粟灰惧害虫的植物繁殖体的方 法，包括将由所述方法获得的第一植株与第二植株杂交，和/或取下由所述方法获得的植 株上具有繁殖能力的组织进行培养，从而产生含有编码&ylA. 105蛋白的多核巧酸序列的 植物繁殖体。 为实现上述目的，本专利技术还提供了一种培养控制粟灰惧害虫的植物的方法，包 括： 种植至少一个植物繁殖体，所述植物繁殖体的基因组中包括编码&ylA. 105蛋白 的多核巧酸序列； 使所述植物繁殖体长成植株； 使所述植株在人工接种粟灰惧害虫和/或粟灰惧害虫自然发生危害的条件下生 长，收获与其他不具有编码化ylA. 105蛋白的多核巧酸序列的植株相比具有减弱的植物损 伤和/或具有增加的植物产量的植株。 本专利技术中所述的"植物繁殖体"包括但不限于植物有性繁殖体和植物无性繁殖体。 所述植物有性繁殖体包括但不限于植物种子；所述植物无性繁殖体是指植物体的营养器官 或某种特殊组织，其可W在离体条件下产生新植株；所述营养器官或某种特殊组织包括但 不限于根、茎和叶，例如根为无性繁殖体的植物包括草替和甘馨等；W茎为无性繁殖体 的植物包括甘庶和马铃馨（块茎）等；W本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种控制粟灰螟害虫的方法，其特征在于，包括将粟灰螟害虫至少与Cry1A.105蛋白接触。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨旭，丁德荣，张欣馨，康越景，
申请(专利权)人：北京大北农科技集团股份有限公司，北京大北农科技集团股份有限公司生物技术中心，
类型：发明
国别省市：北京;11