本发明专利技术涉及一种恶臭假单胞菌株SRPG-396及其解盐促生应用，属于农业生物技术领域。所述菌株保藏号为CGMCC No.9397。该菌株具有溶解无机磷、分泌植物生长素和嗜铁素功能，能够提高作物对氮、磷、钾、钙、铁等元素的吸收，降低对钠的吸收，本身具有良好的耐盐性，可以有效缓解盐渍化土壤对作物造成的盐胁迫危害并促进盐胁迫下作物的生长。与对照相比，能显著提高棉花、番茄和辣椒等作物在盐胁迫下的发芽率、干重及株高。本发明专利技术所述菌株具有功能稳定、环境适应性强、生态环境友好等优点，可制备成微生物菌剂及生物肥料等产品，有非常大的工业化商品的开发潜力，具有良好的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
： 本专利技术涉及一株具有解盐促生作用的恶臭假单胞菌及其在缓解盐渍化土壤对作 物造成的盐胁迫危害并促进作物苗期生长方面的应用，属于农业生物
技术介绍
： 我国西北地区地处干旱半干旱区域，缺水成为制约其农业发展的瓶颈，而目前当 地结合自身干旱地区特点将先进的滴灌技术与覆膜种植模式有机结合起来形成高效节水 技术一一膜下滴灌，从根本上改变了传统的农业结构，极大地促进了农业生产的发展。但是 同时也造成耕作层中的土壤盐分得不到充分的淋洗，随着蒸发不断上移，使盐分在耕作层 日益积累，造成土壤盐渍化现象严重。土壤盐渍化通过改变土壤环境来影响植物的生长，造 成植物缺苗和死亡现象，成为限制作物产量的主要因素和农业可持续发展的主要障碍。目 前相关农业方面的研宄已为我们提供了一些应对措施，例如可以通过培育抗逆性强的植物 品种、改良盐碱土壤或者改进栽培措施等来应对次生盐渍化危害。然而，这些措施往往存在 周期长，投入大，见效慢等问题，对解决盐渍化土壤问题还远远不够。 近年来研宄表明，根际有益微生物可以促进作物的生长发育，提高产量，更可帮助 作物耐受一些逆境条件。国内对植物根际促生菌（PGPR)在提高植物抗逆特性方面近几年 才开始研宄，姚拓、张德罡等对盐碱地小麦和高寒地燕麦根际联合固氮菌的分离、特性及其 对小麦和燕麦生长发育有较成熟的研宄（姚拓，龙瑞军，王刚，胡自治，兰州地区盐碱地小 麦根际联合固氮菌分离及部分特性研宄，土壤学报，2004(3) :444-448;李风霞，张德 罡，高寒地燕麦和盐碱地小麦PGPR菌的生长特性与促生性，甘肃农业大学硕士学位论文， 2004. 5)。国外对PGPR菌的研宄较多，主要在研宄与开发植物促生菌剂技术，减少化肥使 用，提高化肥利用率，促进土壤中无效营养有效化，提高作物对逆境的耐受性和适应性。目 前研宄较多的菌属有固氮螺菌、根瘤菌、枯草芽孢杆菌、假单胞菌等。Bacilio M等研宄生 脂固氮螺菌ngfpl5能够在NaCl胁迫下在非土培的小麦根际定殖，并促进小麦的生长和生 物量的积累，缓解盐胁迫对小麦造成的伤害（Bacilio M, Rodriguez H, Moreno M, Hemandez JP. Mitigation of salt stress in wheat seedling by a gfp-tagged Azospirillum lipoferum.Biol Fertil Soils. 2004, 40:188-193) DSaima等发现 IOOmM NaCl 胁迫环境 中，用从不同作物根系分离得到的多个菌株接种小麦能明显提高小麦植株体内蛋白和生长 素含量（Saima M，Shazia A，Shahida H. Plant growth-promoting bacteria that confer resistance to salt stress. Pakistan J Biol Sci.2002, 5(6):643-647) 〇 Dilfuza 等从乌兹别克斯坦的干旱贫瘠地区的棉花、小麦、番茄、瓜和紫花苜蓿的根系分离得到产 碱假单胞菌PsA15,多粘芽孢杆菌BcP26和分支杆菌属MbP18,这些菌株能够显著提高贫 瘠土壤中生长的棉花和豌豆的生物量，使植株体内的N、P、K元素含量有明显提高，且这些 菌株能够分泌植物激素并具有固氮酶活性（Dueikovsky AN，Morduldmva E A，Kochetkov V，et al. Growth promotion of black currant softwood outings by recombinant strain pseudomona fluorescens BSP53a synthesizing an increased amount of indole-3-acetic acid.Soil Biol.Biochem，1993,25:1277 - 1281)。然而，针对西北 地区的特殊的气候和地理环境，目前还没有报道适合干旱半干旱地区应用的具有高效的解 盐促生功能菌株及其潜在微生物菌剂的开发。 利用微生物资源来改善盐渍化土壤问题，具有投入小、效果好、周期短、环境兼容 性好等优点，因此筛选适宜于新疆特殊地理气候条件并对植物有良好的缓解盐胁迫促进作 物生长的植物根际促生菌，对于应对目前土壤盐渍化现象具有重要的实用价值，开发的解 盐促生菌剂将具有广阔的产业化前景。
技术实现思路
： 本专利技术的目的是提供一种适宜于新疆特殊地理气候条件，特别是可以很好地缓解 盐渍化土壤对作物造成的盐胁迫的恶臭假单胞菌Pseudomonas putida SRPG-396及其应 用。 本专利技术所述的恶臭假单胞菌Pseudomonas putida SRPG-396,于2014年6月30日 保藏于"中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心"，地址：中国北京市朝阳区北辰 西路1号院3号，菌种保藏号为CGMCC No. 9397。 本专利技术所涉及的SRPG-396菌株的菌体特征和菌落特征：菌体呈短杆状，于牛肉膏 蛋白胨平板生长时为圆形、凸起、表面较为光滑的淡黄色菌落，产黄绿荧光色素，氧化酶、接 触酶阳性，发酵葡萄糖、木糖产酸产气，能利用多种碳源。 本专利技术所述的菌株其特点在于能够明显缓解盐碱土壤对以棉花为主的经济作物 造成的盐胁迫，特别是能通过分泌有机酸溶磷、分泌生长素和嗜铁素来促进棉花在盐胁迫 下的生长，并能够提高盐胁迫环境下作物对氮、磷、钾、钙、铁等元素的吸收，降低对钠的吸 收。 本专利技术的另一个目的是提供一种具有解盐促生功效的生物菌剂，其活性成分是恶 臭假单胞菌 Pseudomonas putida SRPG-396。 为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术措施： 解盐促生菌的筛选过程如下： 本专利技术所述的恶臭假单胞菌SRPG-396分离自新疆盐碱地及长期滴灌造成的盐渍 化耕地的棉花根际土壤。首先以沙土为种植基质利用沙床发芽试验进行具有解盐促生功效 菌株的初筛，再以天然盐碱土壤为种植基质进行解盐促生菌的再次筛选，最后通过对不同 作物的促生实验筛选得到可以有效缓解作物在盐渍化土壤中的盐胁迫危害，并促进作物苗 期生长发育的解盐促生菌恶臭假单胞菌SRPG-396。 本专利技术所述菌剂经如下步骤得到： 将上述解盐促生菌SRPG-396接种在NA固体培养基上进行活化后，转接于IOOmLNA 培养液中30°C下180rpm培养24h，获得种子液。将种子液以1:100比例接种于发酵培养基 中，30°C，200rpm培养48h。用灭菌水稀释制成活菌总浓度为lXKf-lXKTcfu/mL的菌 剂。 NA(营养琼脂）培养基组分：牛肉膏3g/L，蛋白胨5g/L，NaCl 5g/L，琼脂15g/L， ρΗ7· 2〇 发酵培养基组分：豆柏粉10g/L、玉米粉10g/L、氯化钠10g/L，牛肉膏2g/L，蛋白胨 3g/L，葡萄糖 3g/L，pH 7· 0-7. 2。 本专利技术的有益效果：： 针对新疆目前盐渍化现象严重没有较为有效的应对措施，本专利技术创新性地提供了 一种可有效缓解盐渍化土壤对作物造成的盐胁迫危害，并促进其苗期生长的恶臭假单胞菌 株Pseudomo本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种具有解盐促生功效的恶臭假单胞菌SRPG‑396，其特征在于：该菌株属于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)，2014年6月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.9397，命名为恶臭假单胞菌Pseudomonas putida SRPG‑396。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李春，樊艳爽，武占省，何艳慧，凃亮，
申请(专利权)人：北京理工大学，石河子大学，
类型：发明
国别省市：北京;11
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