本发明专利技术涉及ARHGAP26作为诊断动脉导管闭合或开放的标志物。本发明专利技术用ITRAQ蛋白质组学的方法对开放和闭合的人动脉导管组织进行鉴定分析，筛选出132个有差异的蛋白，进行信号通路分析后，挑选ARHGAP26蛋白，用Western Blot、Qrt-PCR和免疫组化三种方法进行了鉴定，首次证明该蛋白在人动脉导管组织中表达，并且该蛋白在闭合和开放的两组动脉导管组织具有明显的差异，可能是调控动脉导管闭合或开放的关键因子，可用于动脉导管未闭的临床诊断，且诊断的准确度高。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及ARHGAP26作为诊断动脉导管闭合或开放的标志物。本专利技术用ITRAQ蛋白质组学的方法对开放和闭合的人动脉导管组织进行鉴定分析，筛选出132个有差异的蛋白，进行信号通路分析后，挑选ARHGAP26蛋白，用Western Blot、Qrt-PCR和免疫组化三种方法进行了鉴定，首次证明该蛋白在人动脉导管组织中表达，并且该蛋白在闭合和开放的两组动脉导管组织具有明显的差异，可能是调控动脉导管闭合或开放的关键因子，可用于动脉导管未闭的临床诊断，且诊断的准确度高。【专利说明】ARHGAP26作为诊断动脉导管闭合或开放的标志物 【
】 本专利技术设及分子生物学及医学的临床诊断
，具体地说，设及ARHGAP26作 为诊断动脉导管闭合或开放的标志物。 【
技术介绍
】 动脉导管（化ctus arteriosus, DA)为胎儿时期降主动脉和肺动脉之间的正常通 道，正常新生儿生后10-1化可达到功能性关闭，3个月达解剖学上的关闭。如果DA关闭机 制异常，即为动脉导管未闭（patent ductus arteriosus, PDA)。PDA是常见的先天性屯、脏 病，发病率在先天性屯、脏崎形中占第2位。早产儿因为生后氧诱导DA收缩机制不成熟，且 DA对血管活性物质的反应敏感性下降，PDA的发病率较高，体重低于1750g的早产儿中45% 有PDA。及时关闭动脉导管有助于改善缺氧，控制屯、脏衰竭，降低早产儿死亡率。 动脉导管未闭的临床表现取决于主动脉至肺动脉分流血量的多少W及是否产生 继发肺动脉高压和其程度。轻者可无明显症状，重者可发生屯、力衰竭。常见的症状有劳累 后屯、惇、气急、乏力，易患呼吸道感染和生长发育迟缓。晚期肺动脉高压严重，产生逆向分流 时可出现下半身发组。动脉导管未闭体检时，典型的体征是胸骨左缘第2肋间听到响亮的 连续性机器样杂音，伴有震颤，肺动脉第2音亢进，但常被响亮的杂音所掩盖。对于婴幼儿 动脉导管未闭合患者，仅可听到收缩期杂音，或收缩期杂音亦消失而代之W肺动脉瓣关闭 不全的舒张期杂音，诊断难度较大。因此提供诊断动脉导管闭合或开放的标志物是十分必 要的。 ARHGAP26 巧ho GTPase activating protein 26)，又名 GRAF (GTPase Regulator Associated with Focal A 化 esion Kinase),是一种 GTP 酶活化蛋白。ARHGAP26 能负向 调控化oA和Cdc42,影响化0蛋白促进细胞迁移和增殖功能的发挥；此外该蛋白与FAK 相互作用参与调控整合素信号通路，在化IC/GEEC (clat虹in-independent carrier/ GPI-anchored protein-enriched early endocytic compartment)胞吞途径中也发挥重要 功貪良（Lundmark R, Doherty GJ, et al. The GTPase-Activating Protein GRAFl Regulates the 化IC/GEEC 化docytic PathwaypLJ]. Curr Biol, 2008, 18(22) : 1802-1808)。普遍认为 ARHGAP26具有肿瘤抑制功能，ARHGAP26基因缺陷会导致粒细胞白血病，在髓系恶性肿瘤、 转移性脑瘤、X-连锁的a地中海贫血智力低下综合征等患者中，ARHGAP26表达量明显下 降。目前，关于ARHGAP26作为诊断动脉导管闭合或开放的标志物还未见报道。 【
技术实现思路
】 本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供了 ARHGAP26蛋白或其特异性抗体 的用途。 本专利技术的再一的目的是，提供一种用于诊断动脉导管未闭合的试剂盒。 本专利技术的另一的目的是，提供一种巧片或阵列。[000引为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是： ARHGAP26蛋白在作为诊断动脉导管开放或闭合的标志物中的应用。 ARHGAP26蛋白或其特异性抗体的用途，用于制备诊断动脉导管未闭合的试剂或试 剂盒。 为实现上述第二个目的，本专利技术采取的技术方案是； 一种用于诊断动脉导管未闭合的试剂盒，所述的试剂盒包含检测ARHGAP26蛋白 含量的试剂和检测0 -actin蛋白含量的试剂。 所述的检测ARHGAP26蛋白含量的试剂为ARHGAP26蛋白的特异性抗体，所述的检 测0 -actin蛋白含量的试剂为0 -actin蛋白的特异性抗体。 为实现上述第S个目的，本专利技术采取的技术方案是： 一种巧片或阵列，所述的巧片或阵列上具有检测ARHGAP26蛋白含量的试剂和检 测e-actin蛋白含量的试剂。 所述的检测ARHGAP26蛋白含量的试剂为ARHGAP26蛋白的特异性抗体，所述的检 测e-actin蛋白含量的试剂为e-actin蛋白的特异性抗体。 本专利技术优点在于： 本专利技术使用口RAQ蛋白质组学的方法对开放和闭合的人动脉导管组织进行鉴定 分析，筛选出132个有差异的蛋白，通过信号通路分析，挑选出ARHGAP26蛋白，用western blot,化t-PCR和免疫组化S种方法进行了鉴定，首次证明该蛋白在人动脉导管组织中表， 并且该些蛋白在闭合和开放的两组动脉导管组织具有明显的差异，可能是调控动脉导管闭 合或开放的关键因子。本专利技术提供了一个用于区分闭合动脉导管和未闭合动脉导管的蛋白 标志物ARHGAP26,利用该标志物制备诊断动脉导管未闭合的试剂、试剂盒、巧片和阵列。本 专利技术为有效判断动脉导管开放或闭合提供可靠的检测手段。 【【专利附图】【附图说明】】 附图1是闭合（Constricted)和开放（Patent)动脉导管组织形态学的比较。 附图 2 是 ARHGAP26 蛋白的 western-blot 结果。[002U 附图3是ARHGAP26蛋白的RT-PCR结果。 附图4是ARHGAP26蛋白的免疫组化结果。 【【具体实施方式】】 下面结合附图对本专利技术提供的【具体实施方式】作详细说明。下列实施例中未注 明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆；实验手册（New York:Cold Spring Harbor L油oratory Press, 1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建 议的条件。 实施例1 [002引一、材料和方法 1. 1分离人动脉导管组织 根据国家卫生部有关医学伦理审查方法，本实验所有步骤和过程均获得上海交通 大学医学院伦理委员会审查批准并与患者签订知情同意书。[002引 开放（n = 10,年龄=30. 2 + 6. 3days)或闭合（n = 10,年龄=25. 3 + 7. 9days) 的动脉导管组织取自于上海交通大学医学院附属上海儿童医学中屯、手术过程中的动脉导 管依赖的先天性屯、脏病患儿（患儿详细信息见表1)。所有病人在手术前均使用前列腺素 E1，但闭合组的动脉导管在手术前依然闭合了。所有样本离体后，用生理盐水冲洗数遍，分 成四部分，然后迅速冻存于液氮中。所有样品的状态（开放或闭合）均经过屯、脏超声和CT 确认，并在手术过程加W确认。 表 1【权利要求】1. ARHGAP26蛋白在本文档来自技高网...
【技术保护点】
ARHGAP26蛋白在作为诊断动脉导管开放或闭合的标志物中的应用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：叶霖财，刘锦纷，洪海筏，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心，
类型：发明
国别省市：上海;31
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