变形性关节病预防或治疗用组合物制造技术

本发明专利技术以提供变形性关节病的预防或治疗手段作为课题。根据本发明专利技术，可以提供一种变形性关节病预防或治疗用组合物，其包含鱼类软骨水提取物，所述鱼类软骨水提取物含有分子量为180万以上的蛋白聚糖。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】变形性关节病预防或治疗用组合物
本专利技术涉及一种变形性关节病预防或治疗用组合物。
技术介绍
变形性关节病(Osteoarthritis：OA)是伴随慢性关节炎的关节疾病，是由于关节的构成要素的退变而引起软骨的破坏、骨或软骨的增殖性变化的疾病。特别是变形性膝关节病，X射线诊断的患者数有约2500万人，推测其中感到疼痛的人达到800万人以上。尽管是这样的现状，但现在对变形性关节病只能止痛、向关节内直接注射透明质酸等对症疗法，实际上不可能停止病症发展，如果症状加剧，则不得不进行手术。在这种状況下，非常需要有效的治疗药或治疗法。现有技术文献专利文献专利文献1：日本特开2007-262103号公报专利文献2：日本特开2009-274955号公报
技术实现思路
专利技术要解决的问题本专利技术以提供变形性关节病的预防或治疗手段作为课题。解决问题的手段本专利技术人等惊奇地发现，高分子量的蛋白聚糖在变形性关节病的预防或治疗中有用，进一步进行不断的改良，从而完成了本专利技术。即本专利技术例如包含以下各项所述的主题。项1.一种变形性关节病预防或治疗用组合物，其包含鱼类软骨水提取物，其中，所述鱼类软骨水提取物含有分子量为180万以上的蛋白聚糖。项2.如项1所述的变形性关节病预防或治疗用组合物，其包含鱼类软骨水提取物，其中，所述鱼类软骨水提取物含有分子量为500万以上的蛋白聚糖。项3.如项1或2所述的组合物，其中，在所述鱼类软骨水提取物所含有的糖醛酸中，10质量％以上为来源于分子量为180万以上的蛋白聚糖的糖醛酸。项4.如项1～3中任一项所述的组合物，其中，在所述鱼类软骨水提取物所含有的糖醛酸中，7质量％以上为来源于分子量为500万以上的蛋白聚糖的糖醛酸。项5.如项1～4中任一项所述的组合物，其中，鱼类软骨水提取物是鱼类软骨热水提取物。项6.如项1～5中任一项所述的变形性关节病预防或治疗用组合物，其中，鱼类软骨是鲑鱼软骨或鳟鱼软骨。专利技术效果根据本专利技术的变形性关节病预防或治疗用组合物，通过经口摄取可以预防或治疗变形性关节病。附图说明图1是冷冻鲑鱼鼻软骨块的照片。配置在塑料容器中央的块是冷冻鲑鱼鼻软骨块。图2表示含有高分子量蛋白聚糖的鱼类软骨水提取物(冷冻干燥物：样品1)的糖醛酸量色谱图和280nm蛋白质量色谱图。图3表示市售蛋白聚糖的糖醛酸量色谱图和280nm蛋白质量色谱图。图4表示对变形性关节病模型鼠给予被测样品的计划表概要。图5表示将给予了各被测样品的变形性关节病模型鼠的膝关节部分进行番红O染色后的图像。图6a是表示对于经口摄取各被测样品后的变形性关节病模型鼠进行改良Mankin评分的“番红O”评价的分析结果的图表。图6b是表示对于经口摄取各被测样品后的变形性关节病模型鼠进行改良Mankin评分的“软骨细胞数(Chondrocyte)”评价的分析结果的图表。图6c是表示对于经口摄取各被测样品后的变形性关节病模型鼠进行改良Mankin评分的“软骨表面结构(Structure)”评价的分析结果的图表。图6d是表示对于经口摄取各被测样品后的变形性关节病模型鼠进行改良Mankin评分的“番红O”、“软骨细胞数(Chondrocyte)”和“软骨表面结构(Structure)”合计评分的分析结果的图表。具体实施方式以下，对本专利技术进一步详细地进行说明。蛋白聚糖是具有糖胺聚糖(粘多糖)与蛋白质键合的结构的化合物。糖胺聚糖是具有二糖的重复单元结构的酸性糖，具体而言，可以例示出硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸乙酰肝素等。这些酸性糖成分所具有的二糖重复单元结构中，通常该二糖中一个是氨基糖，另一个是糖醛酸。因此，在蛋白聚糖的检测中，可以使用作为糖醛酸检测法常规方法之一的硫酸咔唑法。此外，糖胺聚糖以梳齿状与蛋白质键合而成的化合物也称为蛋白聚糖单体(蛋白聚糖单体中的该蛋白质称为核蛋白质)。特别是认为在生物体内，此蛋白聚糖单体经由连接蛋白质形成与透明质酸键合的缔合体，该缔合体也称为蛋白聚糖聚合体(proteoglycanaggregate)。本说明书中的术语“蛋白聚糖”以包括蛋白聚糖单体和蛋白聚糖聚合体的含义使用。再者，透明质酸也是糖胺聚糖的一种。本专利技术的变形性关节病预防或治疗用组合物包含鱼类软骨水提取物，其中，所述鱼类软骨水提取物含有高分子量的蛋白聚糖。本专利技术的变形性关节病预防或治疗用组合物中包含的鱼类软骨水提取物含有高分子量蛋白聚糖。本说明书所称的高分子量蛋白聚糖具体而言是指分子量为180万以上的蛋白聚糖，优选分子量为250万以上、300万以上、400万以上、500万以上、600万以上、700万以上、800万以上、900万以上、1000万以上、1100万以上、1200万以上、1300万以上、1400万以上、1500万以上、1600万以上、1700万以上、1800万以上、1900万以上或2000万以上的蛋白聚糖。分子量越大越优选，特别优选分子量为500万以上。利用下述条件的凝胶过滤色谱法处理鱼类软骨水提取物，将得到的各馏分中含有的糖醛酸量(反映蛋白聚糖量)用硫酸咔唑法进行定量，根据该糖醛酸量制成色谱图，由此可以确认上述分子量以上的蛋白聚糖的存在。以下，有时将这样的基于糖醛酸量的色谱图称为“糖醛酸量色谱图”。此外，通过测定各馏分在280nm下的吸光度，使所含有的蛋白质量相对值化(即反映含有的蛋白质量的值)，从而也可以绘制出基于该吸光度的色谱图。以下，有时将这样的色谱图称为“280nm蛋白质量色谱图”。〔凝胶过滤色谱法条件〕色谱柱：琼脂糖凝胶(Sepharose)CL-2B填充色谱柱(以琼脂糖凝胶CL-2B作为载体填充到的色谱柱中而成。琼脂糖凝胶CL-2B的葡聚糖分离范围为100～20,000kDa，可以从GEHealthcare公司等获得。琼脂糖凝胶CL-2B是2％交联琼脂糖，粒径为60～200μm(利用激光衍射散射法)，CAS登录号为65099-79-8。)缓冲液：0.1M磷酸缓冲液(pH7.1，含有0.2MNaCl)进样量：鱼类软骨水提取物4mg(以干燥质量换算)(溶解于1mL缓冲液中使用)流速：0.15mL/min馏分分离量：1mL/试管分子量标准曲线：对于下述各种葡聚糖分子量标记物，在与上述同样的条件下进行凝胶过滤色谱法处理，利用作为用于糖检测的公知方法的酚-硫酸法来测定各馏分的吸光度(反映葡聚糖量)，求出洗脱了各标记物的馏分，制成反映该条件下凝胶过滤色谱各馏分中所含有的成分的分子量的标准曲线。“洗脱了各标记物的馏分”是指各标记物最多被洗脱的馏分。换言之，是指相当于使各葡聚糖分子量标记物在凝胶过滤时反映葡聚糖量的色谱图中峰顶的馏分。<葡聚糖分子量标记物>来自肠膜状明串珠菌的葡聚糖(DextranfromLeuconostocmesenteroides)(分子量5,000,000-40,000,000)(SIGMA)...色谱柱的孔隙体积(voidvolume)测定用，20,000kDa葡聚糖标准品1,400,000(SIGMA)...1400kDa葡聚糖标准品670,000(SIGMA)...670kDa葡聚糖标准品410,000(SIGMA)...410kDa葡聚糖标准品270,000(SIGMA)...270kDa但是，对于来自肠膜状明串珠菌的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种变形性关节病预防或治疗用组合物，其包含鱼类软骨水提取物，其中，所述鱼类软骨水提取物含有分子量为180万以上的蛋白聚糖。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.07.25 JP 2012-1647231.一种鱼类软骨水提取物用于制造变形性关节病预防或治疗用经口组合物的用途，其中，所述鱼类软骨水提取物含有分子量为180万以上的蛋白聚糖，还含有分子量为500万以上的蛋白聚糖，在所述鱼类软骨水...

【专利技术属性】
技术研发人员：加藤阳治，胁谷滋之，花田友香子，山本和司，
申请(专利权)人：国立大学法人弘前大学，株式会社胁谷医疗科学，太阳星光齿磨公司，
类型：发明
国别省市：日本;JP