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一种对成骨细胞的增殖和功能具有促进作用的药物的生物活性的检测方法技术

技术编号:11237443 阅读:124 留言:0更新日期:2015-04-01 11:03
本发明专利技术提供了一种对成骨细胞的增殖和功能具有促进作用的药物或活性物质的生物活性的检测方法,通过检测给予药物或活性物质后成骨细胞或成骨样细胞碱性磷酸酶(ALP)的含量,检测成骨细胞的增殖和功能具有促进作用的药物(或活性物质)的生物活性。该方法简单、易行、专属性强,是对现有的生物活性的检测方法的创新。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种对成骨细胞的增殖和功能具有促进作用的药物的生物活性的检测方法,其特征在于,该方法具体包括以下步骤:(1)复苏冻存细胞株或者进行细胞的原代培养,接种于培养瓶培养增殖;当细胞长满单层后常规消化,以含1‑25%小牛血清的培养液调整细胞浓度为(1‑9)×10(3‑10)个,加入96孔细胞培养板中,置培养箱培养;(2)培养24小时后,弃培养液,按如下分组加入供试品:①细胞对照组:每孔加含1‑25%小牛血清培养液的细胞悬液;②阴性对照组:加含1‑25%小牛血清的培养液;③供试药物组:将供试药物以含1‑25%小牛血清的培养液配置到合适的检测浓度;(3)将细胞培养板置37℃、5%C02培养箱培养24‑336小时后,测定上清液、细胞内或细胞内及上清液的碱性磷酸酶含量;(4)根据以下公式计算刺激指数,用于判断在测药物的活性程度,刺激指数的计算公式如下所示:当刺激指数在1.5‑20时认定药物有活性。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:俞嘉林李丽静权晓丹丛艳张策刘少丽徐博吴晶晶
申请(专利权)人:俞嘉林
类型:发明
国别省市:黑龙江;23

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