一种心型脂肪酸结合蛋白定量检测试纸条,所述试纸条包括底板和在底板上依次搭接粘贴的样品垫、结合垫、包被垫及吸水垫,所述结合垫上同时包被有两种不同粒径荧光微球标记的抗心型脂肪酸结合蛋白的第一抗体,所述包被垫上包被有相间隔的检测带和质控带,所述检测带固定有抗心型脂肪酸结合蛋白的第二抗体,所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体。本实用新型专利技术的试纸条兼顾了低值灵敏度和检测的线性范围,且可以实现快速、单人份定量检测。
【技术实现步骤摘要】
心型脂肪酸结合蛋白定量检测试纸条
本技术涉及临床免疫检测装置领域,具体涉及一种心型脂肪酸结合蛋白定量检测试纸条。
技术介绍
心型脂肪酸结合蛋白(heartfatty acid binding protein,h-FABP)是一种对心肌损伤的早期诊断极其有用的生物标志物。心肌细胞损伤后I小时之内就能够快速释放至血液中。h-FABP比肌红蛋白(Myo)更加具有心脏特异性,心脏中h_FABP浓度比骨骼肌中高2-10倍,但Myo在心脏中的浓度却比骨骼细胞中低2倍。相对于其他的急性冠脉综合症诊断标志物(如CK-MB、cTn1、cTnT及Myo等),h_FABP更具有时间优势,也有着更好的ROC曲线下分析,体现出更具优势的诊断灵敏度和特异性。 目前临床常用的检测h-FABP的方法包括:胶乳增强免疫比浊法、胶体金免疫层析法、荧光免疫层析法等。胶乳增强免疫比浊法在全自动生化仪中检测,可以实现自动化、并且快速的进行单人份检测,但无法实现床旁诊断(POCT)。胶体金免疫层析法操作简单,但只能实现半定量。
技术实现思路
抟术问题 荧光免疫层析法既可以实现快速检测,又能够进行精确定量,为临床应用带来了极大的便利。因此,需要一种基于荧光免疫层析法的心型脂肪酸结合蛋白定量检测试纸条。 技术方案 一方面,本技术提供了一种心型脂肪酸结合蛋白定量检测试纸条,其特征在于,所述试纸条包括: i)底板,和 ii)在所述底板上依次搭接粘贴以下组件: i1-Ι)用于接收样品的样品垫, i1-2)同时包被有两种不同粒径荧光微球标记的抗h-FABP的第一抗体的结合垫, i1-3)包被有相间隔的检测带和质控带的包被垫,其中所述检测带固定有抗h-FABP的第二抗体,所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体,和 i1-4)吸水垫。 在一个实施方式中,所述抗心型脂肪酸结合蛋白的第一抗体和第二抗体识别心型脂肪酸结合蛋白的不同表位。 在一个实施方式中,所述焚光微球上具有Cy3焚光素或Cy5焚光素。 在一个实施方式中,所述两种不同粒径大小的荧光微球的粒径大小分别为10nm和 300nm。 在一个实施方式中,所述检测带和所述质控带之间的间隔在0.3cm-0.5cm之间。 在一个实施方式中,所述试纸条的长度在8cm至1cm之间。 在一个实施方式中,所述试纸条的宽度在0.2cm至0.5cm之间。 有益效果 在本技术的试纸条中,独立的样品垫和结合垫的设计可以有效避免样品中杂质对检测灵敏度的影响,有利于提高检测灵敏度。而且,两种不同粒径荧光微球的设计能够同时满足检测中对高灵敏度和宽检测线性范围的要求。此外,试剂条检测更为方便和廉价,有利于临床应用。 【附图说明】 图1本技术的试纸条的侧视示意图。 图2本技术的试纸条的俯视示意图。 附图标记:1_样品垫、2-结合垫、3-包被垫、4-吸水垫、5-底板、6-检测带、7-质控带。 【具体实施方式】 下文中将参照附图来更详细地描述示例性实施方式。所述附图用于图示说明本技术,而非对其进行限制。 图1是本技术的试纸条的侧视示意图。 如图1所示,本技术的试纸条包括底板5和在底板5上依次搭接粘贴的样品垫1、结合垫2、包被垫3和吸水垫4。 样品垫I与结合垫2搭接且用于接收样品。本技术的试纸条所适合检测的样品包括但不限于血清、血浆、尿液。心型脂肪酸结合蛋白是一种对心肌损伤的早期诊断极其有用的生物标志物。心肌缺血性损伤出现后,心型脂肪酸结合蛋白可以早在胸痛发作后诸如最早1-3小时在血液中被发现。样品垫I可以起到样品过滤的作用,由此可以提高检测的灵敏度。例如,当待检测样品为血浆、血清时,接收层可以过滤样品中颗粒性不溶物,使得样品中所含的心型脂肪酸结合蛋白能够更准确地被检测。样品垫I的材质为玻璃纤维素膜或者聚酯膜。 结合垫2位于样品垫I和包被垫3之间,且分别与样品垫I和包被垫3搭接。结合垫2用于布置与待测样品中特定蛋白反应的抗体。本技术的试纸条的结合垫2上布置有特异性结合样品中h-FABP的抗h-FABP的抗体,且此抗体由两种不同粒径大小的荧光微球分别标记。传统的荧光免疫层析法所采用的单个荧光微球抗体存在一定的缺陷。在本技术的试纸条中,小粒径的荧光微球标记的抗体使得检测的线性范围可覆盖高值区域。大粒径的荧光微球标记的抗体有利于低值的检测以达到灵敏度的要求。两种粒径大小的荧光微球的使用使得本技术的试纸条可同时实现高灵敏度和宽检测线性范围的要求。在一个实施方式中,所述两种不同粒径大小的焚光微球的粒径大小分别为10nm和300nm。在一个实施方式中,所述荧光微球上具有Cy3荧光素或Cy5荧光素。 样品垫2的材质可与样品垫I相同或不同,其优选玻璃纤维素膜。 包被垫3位于结合垫2和吸水垫4之间,且分别与结合垫2和吸水垫4搭接。包被垫3的材质优选为硝酸纤维素膜。包被垫3用于布置检测带和质控带(参见图2)。 检测带布置有另一种抗h-FABP的抗体。与结合垫2上布置的抗体相比,检测带上布置的抗体特异性结合不同的h-FABP的抗原表位。由此,通过在结合垫2和包被垫3上分别布置特异性结合h-FABP不同抗原表位的两种抗体,从而实现用“免疫夹心法”对h-FABP进行定量测定,由此进一步提高了检测的灵敏度。 质控带布置有抗鼠IgG的抗体,其用于确定反应体系是否成立。 吸水垫4通过毛细作用提供样品从样品垫I至结合垫2至包被垫3迀移的动力。吸水垫4可由选自由诸如棉绒、玻纤等材料制成,优选由棉绒材料制成。 样品垫1、结合垫2、包被垫3和吸水垫4整体依次搭接粘贴被布置于底板5上。 图2是本技术的试纸条的俯视示意图。图2中与图1相同的部分不再赘述。 如图2所示,包被垫3布置有检测带6和质控带7。检测带6和质控带7之间的间隔可以在0.05cm至0.8cm之间。在一个实施方式中,检测带6和质控带7之间的间隔在0.2cm至0.5cm之间,更优选在0.3cm至0.5cm之间。 本技术试纸条的整体长度在5cm至15cm之间,优选8cm至1cm之间。本技术的试纸条的整体宽度在0.2cm至0.8cm之间,优选在0.2cm至0.5cm之间,优选在 0.2cm至0.3cm之间,最优选为0.3cm。本技术的试纸条在提供灵敏度和检测线性范围的同时,通过降低试纸条的长度和/或宽度可降低抗体的用量,大大节约了生产成本。 本技术所提供的应用两种不同粒径荧光微球定量检测h-FABP的荧光免疫层析试纸条兼顾了低值灵敏度和检测的线性范围,且可以实现快速、单人份定量检测,加之体积小、易于携带和保存,为临床使用提供了极大便利。加之其制备方法更加简单,可以实现批量生产,有利于大规模推广应用,具备广阔的市场前景。 实施例 下述实施例中,所述h-FABP第一抗体、h-FABP第二抗体、抗鼠IgG抗体、Cy3荧光素标记的荧光微球、Cy5荧光素标记的荧光微球、2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES)、碳二亚胺(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、牛血清白蛋白(BSA)、Tween-20、海藻糖、玻璃纤维素膜、聚酯膜、硝酸纤维素膜、高强度吸水纸均为市本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种心型脂肪酸结合蛋白定量检测试纸条,其特征在于,所述试纸条包括:i)底板,和ii)在所述底板上依次搭接粘贴以下组件:ii‑1)用于接收样品的样品垫,ii‑2)同时包被有两种不同粒径荧光微球标记的抗心型脂肪酸结合蛋白的第一抗体的结合垫,ii‑3)包被有相间隔的检测带和质控带的包被垫,其中所述检测带固定有抗心型脂肪酸结合蛋白的第二抗体,所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体,和ii‑4)吸水垫。
【技术特征摘要】
1.一种心型脂肪酸结合蛋白定量检测试纸条,其特征在于,所述试纸条包括: i)底板,和 ?)在所述底板上依次搭接粘贴以下组件: ?-1)用于接收样品的样品垫, i1-2)同时包被有两种不同粒径荧光微球标记的抗心型脂肪酸结合蛋白的第一抗体的结合垫, ?-3)包被有相间隔的检测带和质控带的包被垫,其中所述检测带固定有抗心型脂肪酸结合蛋白的第二抗体,所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体,和i1-4)吸水垫。2.根据权利要求1的所述试纸条,其特征在于,所述抗心型脂肪酸结合蛋白的第一抗体和第二抗体识别心型脂...
【专利技术属性】
技术研发人员:程海,王义娜,李鼎锋,聂聪,祁双,戈军,刘勇,
申请(专利权)人:江苏达骏生物科技有限公司,
类型:新型
国别省市:江苏;32
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