降钙素原定量检测荧光免疫层析试剂卡制造技术

本实用新型专利技术提供了一种降钙素原定量检测荧光免疫层析试剂卡，其包括底座、卡盖以及被所述底座和卡盖彼此相互紧扣于内部的试剂条，所述试剂条包括底板以及在底板上依次搭接粘贴的样品垫、第一结合垫、第二结合垫、包被膜和吸水纸，所述第一结合垫包被有由两种不同粒径荧光微球标记的抗降钙素原第一抗体，所述第二结合垫包被有由生物素标记的抗降钙素原第二抗体，且所述包被膜上包被有相间隔的检测带和质控带，其中所述检测带固定有亲和素，所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体。本实用新型专利技术所提供的定量检测降钙素原的荧光免疫层析试剂卡可实现快速个性化的定量检测，同时具有高灵敏度、低误差范围的优点。

【技术实现步骤摘要】
降辛丐素原定量检测焚光免疫层析试剂卡
本技术涉及一种用于降钙素原定量检测荧光免疫层析试剂卡。
技术介绍
降钙素原(Procalcitonin)是激素降钙素的前体糖蛋白，通常由甲状腺的C细胞产生。降钙素原含有116个氨基酸，分子量大小约为13kD，包含57个氨基酸的N端部分，中间32个氨基酸的降钙素和21个氨基酸的抗钙素。自1993年首次报道在脓毒症患者血中降钙素原水平明显升高以来，关于降钙素原与炎性疾病相关性的研宄大量开展，目前，国际上已将降钙素原作为评价临床感染程度和严重疾病的一项监测指标，其敏感性和特异性均优于CRP等其他炎性指标。 一般认为，降钙素原的生物学效应主要在于:次级炎症因子的作用、趋化因子的作用、抗炎及保护作用等。炎症反应约3小时后，降钙素原在血浆中的水平升高，6-8小时达到最高值，但自身免疫、过敏和病毒感染时降钙素原不会升高，因此可以区分病毒性和病菌性感染，指导用药。细菌感染者血清降钙素原水平与感染严重程度正相关，降钙素原水平下降则提示病情复发。降钙素原体内半衰期为20-24小时，可用于临床监测细菌感染和败血症的病程和预后。 对于降钙素原的检测，目前临床常用的方法包括:胶乳增强免疫比浊法、酶联免疫法、化学发光法、胶体金免疫层析法、荧光免疫层析法等。胶乳增强免疫比浊法虽实现高通量筛选，但由于降钙素原所需的检测灵敏度要求高，导致检测时低值样品CV值过大。酶联免疫法及化学发光法虽可以准确定量，但检测耗时过长，且不适合于单个样品的检测。胶体金免疫层析法操作简单，但只能实现半定量。
技术实现思路
抟术问题 对于灵敏度要求极高的降钙素原的检测，现有技术中缺少一种能够实现快速、精确、方便且成本低廉的检测装置。因此，需要提供一种新型降钙素原定量检测荧光免疫层析试剂卡。 _7] 技术方案 一方面，本技术提供了一种降钙素原定量检测荧光免疫层析试剂卡，其特征在于，包括以下组成部分: a)试剂条，其中所述试剂条包括: a-1)样品垫， a-2)包被有由两种不同粒径荧光微球标记的抗降钙素原第一抗体的第一结合垫， a-3)包被有由生物素标记的抗降钙素原第二抗体的第二结合垫， a-4)包被有相间隔的检测带和质控带的包被膜，其中所述检测带固定有亲和素，所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体， a-5)吸水纸， a-6)底板，其中所述样品垫、第一结合垫、第二结合垫、包被膜和吸水纸在底板上依次搭接粘贴， b)卡盖，其中所述卡盖包括: b-Ι)位于所述样品垫的上侧以暴露出所述样品垫的部分区域的加样孔，和 b-2)位于所述包被膜的上侧以暴露出所述检测带和所述质控带的全部区域的检测孔，和 c)底座，其中所述底座和卡盖彼此相互紧扣，并将所述试剂条扣合在内部。 在一个实施方式中，所述两种不同粒径大小的荧光微球的粒径大小分别为10nm和 300nm。 在一个实施方式中，所述检测带和所述质控带之间的间隔在0.3cm至0.5cm之间。 在一个实施方式中，所述焚光微球上具有选自以下的焚光物质:Cy3焚光素、Cy5荧光素、异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明和四甲基异硫氰酸罗丹明。 在一个实施方式中，所述卡盖和所述底座由塑料制成。 在一个实施方式中，所述试剂条的宽度在0.2cm至0.5cm之间。 有益效果 本技术所提供的定量检测降钙素原的荧光免疫层析试剂卡可实现快速个性化的定量检测，同时具有高灵敏度、低误差范围的优点。 【附图说明】 图1本技术的荧光免疫层析试剂卡的结构示意图。 图2本技术的荧光免疫层析试剂卡中试剂条的俯视结构示意图。 图3本技术的荧光免疫层析试剂卡中试剂条的侧视结构示意图。 附图标记表不为:1_底座、2_卡盖、3_加样孔、4_检测孔、5_检测带、6_质控带、 7-样品垫、8-第一结合垫、9-第二结合垫、10-包被膜、11-吸水纸、12-底板。 【具体实施方式】 下文中将参照附图来更详细地描述示例性实施方式。所述附图用于图示说明本技术，而非对其进行限制。 图1是本技术的荧光免疫层析试剂卡的结构示意图。 如图1所示，本技术的荧光免疫层析试剂卡包括底座I和卡盖2，卡盖2上设置有加样孔3和检测孔4。试剂条(未示出)被底座I和卡盖2彼此相互紧扣于试剂卡内部。加样孔3的大小可暴露出试剂条上样品垫的部分区域。检测孔4的大小可暴露出试剂条上包被膜中检测带和质控带的全部区域。 底座I和卡盖2均可由诸如塑料等材料制成。加样孔3和检测孔4可以为正方形、长方形、椭圆形、圆形等形状。加样孔的长度可为0.1cm至0.5cm，宽度可为0.2cm至0.4cm。检测孔4的长度可为1.0cm至2.3cm，宽度可为0.2cm至0.4cm。 本技术的降钙素原荧光免疫层析试剂卡可实现快速大批量的检测，有很重要的临床意义。 图2为本技术的荧光免疫层析试剂卡中试剂条的俯视结构示意图。 如图2所示，布置在底座I上的试剂条包括样品垫7、第一结合垫8、第二结合垫9、包被膜10和吸水纸11。 样品垫7用于接收样品，其可由选自玻璃纤维素膜或者聚酯膜、棉纤的材料制成，优选由玻璃纤维素膜制成。样品垫7可以起到样品过滤的作用。例如，当待检测样品为血浆、血清时，样品垫7可以过滤样品中的颗粒性不溶物。 第一结合垫8上包被有两种不同粒径荧光微球标记的抗降钙素原的抗体。本技术专利技术人发现，对于灵敏度要求极高的降钙素原的检测而言(低值需要检测到0.05ng/ml)，目前的荧光免疫层析法所采用的单个荧光微球存在一定的缺陷。例如，对于大粒径的荧光微球，其有利于低值的检测以达到灵敏度的要求，但是其检测的线性范围不够，因此高值检测不准确。相反，对于小粒径的荧光微球，其检测的线性范围可覆盖高值区域，但是低端的测值不准确，CV值过大。 在本技术中，第一结合垫8上所使用的大粒径荧光微球的粒径大小范围在300nm至500nm之间，优选300nm，小粒径焚光微球的粒径大小范围在50nm至150nm之间，优选lOOnm。大粒径荧光微球标记的抗体有利于低值的检测以达到灵敏度的要求，而小粒径荧光微球标记的抗体使得检测的线性范围可覆盖高值区域。因此，本技术的试剂条可满足高灵敏度和宽检测线性范围的要求。 荧光微球上具有选自以下的荧光物质:Cy3荧光素、Cy5荧光素、异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明和四甲基异硫氰酸罗丹明。 第二结合垫9包被有由生物素标记的另一种抗降钙素原的抗体。与第一结合垫8上的抗体相比，第二结合垫9上的抗体特异性结合不同的抗降钙素原的抗原表位。通过将两种不同抗体分别包被于不同的结合垫上，可以避免抗体之间的相互影响。 包被膜10上包被有检测带5和质控带6。检测带5上固定有亲和素，质控带6上固定有抗鼠IgG的抗体。检测带8和质控带9彼此相间隔，其之间的距离可以在0.05cm至0.8cm之间。在一个实施方式中，检测带和质控带之间的间隔在0.1cm至0.6cm之间，优选在0.3cm至0.5cm之间。在应用本技术的试剂卡检测降钙素原的过程中，同时采用了双抗体夹心法和生物素-亲和素级联放大系统，这进一步提高了检测灵敏度，保证了降钙素原检测对灵敏本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种降钙素原定量检测荧光免疫层析试剂卡，其特征在于，包括以下组成部分：a)试剂条，其中所述试剂条包括：a‑1)样品垫，a‑2)包被有由两种不同粒径荧光微球标记的抗降钙素原第一抗体的第一结合垫，a‑3)包被有由生物素标记的抗降钙素原第二抗体的第二结合垫，a‑4)包被有相间隔的检测带和质控带的包被膜，其中所述检测带固定有亲和素，所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体，a‑5)吸水纸，a‑6)底板，其中所述样品垫、第一结合垫、第二结合垫、包被膜和吸水纸在底板上依次搭接粘贴，b)卡盖，其中所述卡盖包括：b‑1)位于所述样品垫的上侧以暴露出所述样品垫的部分区域的加样孔，和b‑2)位于所述包被膜的上侧以暴露出所述检测带和所述质控带的全部区域的检测孔，和c)底座，其中所述底座和卡盖彼此相互紧扣，并将所述试剂条扣合在内部。

【技术特征摘要】
1.一种降钙素原定量检测荧光免疫层析试剂卡，其特征在于，包括以下组成部分: a)试剂条，其中所述试剂条包括: a~l)样品塾， a-2)包被有由两种不同粒径荧光微球标记的抗降钙素原第一抗体的第一结合垫，a-3)包被有由生物素标记的抗降钙素原第二抗体的第二结合垫，a-4)包被有相间隔的检测带和质控带的包被膜，其中所述检测带固定有亲和素，所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体，a-5)吸水纸， a-6)底板，其中所述样品垫、第一结合垫、第二结合垫、包被膜和吸水纸在底板上依次搭接粘贴， b)卡盖，其中所述卡盖包括: b-D位于所述样品垫的上侧以...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱世伟，宋小力，聂聪，王里奇，程海，戈军，刘勇，
申请(专利权)人：江苏达骏生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：江苏;32