一种乌苯美司的新型合成工艺制造技术

本发明专利技术公开一种乌苯美司的新型合成工艺，以（2S，3R）-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酸为原料，与二碳酸二叔丁酯反应，且二碳酸二叔丁酯采用分批逐次的加入方式，制备获得中间体I，中间体I与L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐反应制备获得中间体II，其中L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐作为优选，有利于提高中间体II的收率和纯度，中间体II在酸碱体系下分别脱去保护基团叔丁氧羰酰基和叔丁酯，此操作只需通过酸碱体系调节酸碱值就能有效将保护基团高效脱去，提高乌苯美司成品的收率和纯度。

【技术实现步骤摘要】
一种乌苯美司的新型合成工艺
本专利技术属于药物合成领域，具体是指一种乌苯美司的新型合成工艺。
技术介绍
乌苯美司（外文名Ubenimex，Bestalin）是从链霉素菌属（Streptomycesofivorecticui）的培养液中分离得到的二钛化合物，可竞争性地抑制制氨肽酶B（aminopeptidaseB）及亮氨酸肽酶(LeucineaminoPeptidase)和半胱天冬酶(Caspase)，增强T细胞的功能，使NK细胞的杀伤活力增强，且可使集落刺激因子合成增加而刺激骨髓细胞的再生及分化，能干扰肿瘤细胞的代谢，抑制肿瘤细胞增生，使肿瘤细胞凋亡，并激活人体细胞免疫功能，刺激细胞因子的生成和分泌，促进抗肿瘤细胞的产生和增殖。可配合化疗、放疗及联合应用于白血病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合症及造血干细胞移植后的治疗，以及其他实体瘤患者。随着全球用量的增加，通过发酵生产乌苯美司显然已经不能满足药品的需求，因此，制药工业研究团队以及科研和学术机构花费了大量精力，来寻找生产这种药物切实可行的路线。现有乌苯美司合成方法是以(2S，3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酸为原料，使用活性较高的硫代苄氧羰基保护剂保护氨基从而制备中间体I，使用的保护剂活性高，但稳定性差，操作复杂；制备中间体I过程中，中间体I与亮氨酸苄酯缩合，获得中间体II，中间体II在钯碳催化下加氢脱保护制备获得乌苯美司，其中脱保护过程中采用钯碳加氢催化，成本高，安全性差，且残留杂质中有高紫外吸收的小极性杂质，以现有国际检测方法无法彻底检出。针对现有合成工艺制备获得的乌苯美司，纯度和收率较低的情况下，开展乌苯美司新型合成工艺的进一步研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于：提供一种乌苯美司的新型合成工艺，该合成工艺操作简便，节约能源，制备获得的乌苯美司成品纯度高，收率高，且适合于工业化生产。本专利技术通过下述技术方案实现：一种乌苯美司的新型合成工艺，所述工艺路线如下：（1）制备中间体I(2S，3R)-3叔丁氧羰基氨基-2-羟基-4-苯基丁酸将原料（2S，3R）-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酸用水溶解，加入10%两相溶剂，且用碱水调PH至大于8，分批逐次加入二碳酸二叔丁酯，且溶液PH维持在大于8，加入乙酸乙酯，调PH至1—3，萃取分层收集有机相，干燥，浓缩结晶，即得；为了提高中间体I的收率纯度，在中间体I的制备过程中，经多次反复试验发现，原料（2S，3R）-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酸经水溶解、加入10%两相溶剂，碱水调节PH处理步骤后，加入二碳酸二叔丁酯，其中二碳酸二叔丁酯的加入方式直接影响中间体I的收率，如果采用直接投入二碳酸二叔丁酯与原料（2S，3R）-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酸反应，收率较低，当采用分批逐次加入二碳酸二叔丁酯时，中间体I的反应收率显著增加。在中间体I的制备过程中，制备工艺所采用的两相溶剂为丙酮、甲醇、四氢呋喃中的任意一种；所采用的碱水调PH，碱水为碳酸钠水溶液、氢氧化钠水溶液、三乙胺中的任意一种。中间体I的整个制备反应过程均在室温下进行，收率为92%。（2）制备中间体IIN-[（2S，3R）-3-叔丁氧羰基氨基-2-羟基-4-苯基丁酰基]-L-亮氨酸叔丁酯将中间体I及L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐加入四氢呋喃中，冰浴下搅拌后依次加入1-羟基苯并三唑，三乙胺，二环己基碳二亚胺，搅拌过夜，滤除析出的二环己基脲，滤液减压浓缩，用乙酸乙酯溶解后，依次用稀酸、饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸钠干燥，浓缩，石油醚打浆，抽滤即得。本实验中操作步骤中石油醚打浆是指采用石油醚精制的实验过程，具体是指在浓缩操作后，加入有机溶剂石油醚，升温将固体溶解，搅拌，使溶液在冰水浴中降温，有固体析出时，抽滤即得。中间体I制备中间体II的过程中，为了提高中间体II的收率和纯度，原料优选L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐与中间体I反应，以下表一为采用不同亮氨酸脂类与中间体I反应获得的中间体II收率、纯度的对比实验结果，其余实验过程相同。实验号使用亮氨酸酯的名称中间体II收率中间体II纯度（HPLC）1亮氨酸甲酯85%98%2亮氨酸乙酯80%97.5%3亮氨酸叔丁酯99.3%99%4亮氨酸异丙酯82%98.2%从表一可知，选择L-亮氨酸叔丁酯与中间体I反应获得的中间体II纯度、收率最佳。步骤（2）中中间体I制备中间体II的过程中所采用的L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐的制备步骤为：在1000ml三口瓶中加入100gL-亮氨酸，280ml醋酸叔丁酯，114g高氯酸，在10℃左右搅拌反应36小时，然后加入280ml水，缓慢加入固体碳酸氢钠中和体系，有大量气泡产生；然后调节PH至7左右，过滤分层，水相用100ml醋酸叔丁酯萃取一次，合并有机相，加入100ml饱和碳酸氢钠水溶液搅拌10分钟，分层后有机相依次用100ml饱和碳酸氢钠水溶液、100ml饱和食盐水冲洗，然后用无水硫酸钠干燥；在55℃下减压浓缩，加入200ml石油醚，冰浴下缓慢滴加乙酸乙酯/氯化氢调PH至5，搅拌30分钟后过滤，滤饼用50ml石油醚冲洗后烘干，即得产品，产品外观为白色结晶，收率为29.4%。（3）由中间体II制备乌苯美司将所述步骤（2）制备的中间体II用乙醇溶解后，用盐酸调节PH至1—2，40℃-50℃下搅拌反应4—5小时，体系降至10℃以下，缓慢滴加氢氧化钠溶液，调PH至8以上，过夜，调PH至6—7，减压浓缩，残渣中加入水，4℃—6℃下搅拌结晶，过滤，用1mol/L盐酸溶解，加入少量活性炭，滤除不溶物，用稀氨水调PH5—6，过滤，滤饼用丙酮洗涤，干燥即得。在本实验步骤中，主要采用脱保护剂将叔丁氧羰酰基、叔丁酯脱去，反应过程很难控制，脱保护剂有多种，优选酸碱脱去，酸碱分别为稀盐酸、氢氧化碱，在本实验中，中间体II用乙醇溶解后，用盐酸调节PH至1—2，反应后，待温度降低至10℃以下后，采用氢氧化钠溶液调PH至8以上，且采用缓慢滴加氢氧化钠的方式，与其他脱保护剂相比，该酸碱脱保护剂制备获得的乌苯美司成品的收率和纯度最佳。表二为中间体II采用不同脱保护剂获得的乌苯美司的收率、纯度的对比，实验号脱保护剂收率纯度1盐酸/氢氧化钠88%99.5%2乙酸乙酯氯化氢/氢氧化钠55%99.2%3三氟乙酸35%99%从表二可以看出，使用不同的脱保护剂制备乌苯美司时，其中采用盐酸/氢氧化钠，反应条件温和，收率最高，采用其他脱保护剂时，纯化等操作较为复杂，且收率、纯度较低。本专利技术与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：（1）本专利技术采用叔丁氧羰酰基保护氨基，制备获得中间体I(2S，3R)-3-叔丁氧羰基氨基-2-羟基-4-苯基丁酸，同时亮氨酸制备获得L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐，然后将中间I与L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐进行缩合反应，制备获中间体IIN-[(2S，3R）-3-叔丁氧羰基氨基-2-羟基-4-苯基丁酰基]-L-亮氨酸叔丁酯，彻底改变了保护基团，使反应更加温和，高效。（2）本专利技术中步骤（3）中脱去保护基团时，反应不用高压氢化方法，选择采用酸性和碱性体系直接脱掉叔丁氧羰酰基和叔丁酯，制备乌苯美司，该反应温和，易于放量工业化生产，而且降低了生产中的安全风险。（3）本专利技术中步骤（2）中由中间体I制备中间体II，中间体I与亮氨酸叔丁酯盐酸盐反应，亮本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种乌苯美司的新型合成工艺，其特征在于，包括下述步骤：（1）制备中间体I (2S，3R)‑叔丁氧羰基‑3‑氨基‑2‑羟基‑4‑苯基丁酸将原料（2S，3R）‑3‑氨基‑2‑羟基‑4‑苯基丁酸用水溶解，加入10%两相溶剂，且用碱水调PH至大于8，分批逐次加入二碳酸二叔丁酯，且溶液PH维持在大于8，加入乙酸乙酯，调PH至1—3，萃取分层收集有机相，干燥，浓缩结晶，即得；（2）制备中间体II N‑[(2S，3R）‑3‑叔丁氧羰基氨基‑2‑羟基‑4‑苯基丁酰基]‑L‑亮氨酸叔丁酯将中间体I及L‑亮氨酸叔丁酯盐酸盐加入四氢呋喃中，冰浴下搅拌后依次加入1‑羟基苯并三唑，三乙胺，二环己基碳二亚胺，搅拌过夜，滤除析出的二环己基脲，滤液减压浓缩，用乙酸乙酯溶解后，洗涤，干燥，浓缩，抽滤即得；（3）由中间体II制备乌苯美司将所述步骤（2）制备的中间体II用乙醇溶解后，用盐酸调PH至1—2，40℃—50℃下搅拌反应4—5小时，体系降至10℃以下，缓慢滴加氢氧化钠溶液，调PH至8以上，过夜，调PH至6—7，减压浓缩，残渣中加入水，搅拌结晶，过滤，溶解，再过滤，干燥即得。

【技术特征摘要】
1.一种乌苯美司的合成工艺，其特征在于，包括下述步骤：（1）制备中间体I(2S，3R)-3-叔丁氧羰基氨基-2-羟基-4-苯基丁酸将原料（2S，3R）-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酸用水溶解，加入10%两相溶剂，且用碱水调PH至大于8，分批逐次加入二碳酸二叔丁酯，且溶液PH维持在大于8，加入乙酸乙酯，调PH至1—3，萃取分层收集有机相，干燥，浓缩结晶，即得；（2）制备中间体IIN-[(2S，3R）-3-叔丁氧羰基氨基-2-羟基-4-苯基丁酰基]-L-亮氨酸叔丁酯将中间体I及L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐加入四氢呋喃中，冰浴下搅拌后依次加入1-羟基苯并三唑，三乙胺，二环己基碳二亚胺，搅拌过夜，滤除析出的二环己基脲，滤液减压浓缩，用乙酸乙酯溶解后，洗涤，干燥，浓缩，抽滤即得；（3）由中间体II制备乌苯美司将所述步骤（2）制备的中间体II用乙醇溶解后，用盐酸调PH至1—2，40℃—50℃下搅拌反应4—5小时，体系降至10℃以下，缓慢滴加氢氧化钠溶液，调PH至8以上，过夜，调PH至6—7，减压浓缩，残渣中加入水，搅拌结晶，过滤，溶解，再过...

【专利技术属性】
技术研发人员：张卓，赵林吉，蒋诗敏，
申请(专利权)人：成都傲飞生物化学品有限责任公司，
类型：发明
国别省市：四川;51