用于治疗涉及运动神经元的疾患的LINGO-2拮抗剂制造技术

本发明专利技术提供了通过给予LINGO-2拮抗剂治疗涉及包括肌萎缩侧索硬化症在内的运动神经元存活和轴突生长的疾病、病症或损伤的方法。一种用于促进运动神经元存活的示例性方法，包括使所述运动神经元与有效量的包含LINGO-2拮抗剂的组合物接触，其中所述LINGO-2拮抗剂选自由以下所组成的组：(i)可溶的LINGO-2多肽；(ii)LINGO-2抗体或其抗原结合片段；(iii)LINGO-2拮抗剂多核苷酸；(iv)LINGO-2适体；和(v)两种或更多种所述LINGO-2拮抗剂的组合。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗涉及运动神经元的疾患的LING0-2拮抗剂 专利技术背景 运动神经元是控制肌肉功能的神经元。它们位于中枢神经并具有延伸到中枢神经 系统外的轴突以控制肌肉。通常，位于脑中的上位运动神经元将信号传递到位于脊髓的下 位运动神经元，以及下位运动神经元指挥肌肉活动。当然，肌肉对于包括呼吸，吞咽，讲话和 走路在内许多活动是重要的。因此运动神经元的损伤或运动神经元功能的降低具有可怕的 临床后果，且已经识别了若干与运动神经元相关的疾患。 所述疾患包括但不限定于下述疾病、障碍和损伤：肌萎缩侧索硬化症 (amyotrophic lateral sclerosis) (ALS)、原发性侧索硬化（primary lateral sclerosis) (PLS)、进行性肌萎缩（progressive muscular atrophy) (PM)、遗传性痉挛性截瘫 (hereditary spastic paraparesis) (HSP)、X-连锁脊髓延髓性肌萎缩（X-linked spinobulbar muscular atrophy) (SBMA ;甘乃迪病（Kennedy disease))、进行性延髓麻痹 (progressive bulbar palsy)、假性延髓麻痹（pseudo-bulbar palsy)、脊髓性肌肉萎缩症 (spinal muscular atrophy) (SMA)、小儿麻痹症后期综合症（postpolio syndrome) (PPS)、 亨廷顿氏症（Huntington's disease)、原发性震颤（Essential tremor) (ET)、运动神经元 疾病、瘫痪和帕金森氏病。ALS是这些中突出的疾病之一，每年100, 000人中有1到2人发 展成ALS。ALS是快速进行性疾病，其与上位和下位运动神经元的破坏相关，并导致自主肌 肉运动的丧失。 一些疾病缓解治疗可用于ALS和其他运动神经元相关疾病，所述治疗包括使用利 鲁唑（Riluzole)，其能够阻断与受损神经元相关的特定的钠通道。该治疗方法虽然可以减 慢病程，但目前没有治疗运动神经元的方法。因此对于患有与运动神经元功能不足相关疾 病的患者而言，极度需要促进运动神经元轴突再生和/或促进运动神经元存活的治疗。 专利技术概述 LING0-2(FLJ31810,亮氨酸富集重复和免疫球蛋白样结构域包含nogo受体相互 作用蛋白2，LERN3,亮氨酸富集重复神经元蛋白3,亮氨酸富集重复神经元蛋白6C，LRRN6C， PR031993或UNQ9234)在皮层神经元和背根神经节（DRG)神经元中表达，且负向调节运动 神经元存活和运动神经元轴突长度。可使用LING0-2拮抗剂在内和体外促进运动神经元的 存活和生长。例如，抗体、其抗原结合片段和其衍生物可被用作LING0-2的拮抗剂。可溶 的LING0-2多肽以及包含编码对应于LING0-2区域多肽的核苷酸序列的核酸还可被用作 LING0-2拮抗剂。因而，本文提供了通过将运动神经元与LING0-2拮抗剂相接触从而促进运 动神经元存活和运动神经元轴突生长的方法。 本专利技术的某些实施方式包括以下（其中每个实施方式通过大写字母E后接数字 表示）： El) -种分离的结合分子，其能够特异性结合与C09抗体相同的LING0-2表位。 E2)E1的分离的结合分子，其中所述结合分子竞争性抑制C09抗体与LING0-2的结 合。 E3) -种包含C09抗体的至少一个互补决定区（⑶R)的分离的结合分子。 E4)根据E1-E3中任一项的结合分子，其包含抗体或其抗原结合片段。 E5)E1_E4中任一项的结合分子，包含C09的可变重链（variable heavy domain) (VH)⑶Rs 1-3,其中一个或多个VH⑶Rs具有3个或更少的单氨基酸取代。 E6)E5 的结合分子，包含 C09 的 VH CDRs 1-3。 E7)E1_E6中任一项的结合分子，包括C09的可变轻链（variable light domain) (VL)⑶Rs 1-3,其中一个或多个VL⑶Rs具有3个或更少的单氨基酸取代。 E8)E7所述的结合分子，包含C09的VL CDRs 1-3。 E9)E1-E4 中任一项的结合分子，包含 C09 的 VH CDRs 1-3 和 VL CDRs 1-3。 E10) E1-E9中任一项的结合分子，包含VH，其中所述VH包含与C09的VH至少85 %， 90 %或95 %相同的氨基酸序列。 ElDElO的结合分子，其中所述VH包含与C09的VH相同的氨基酸序列。 E12)E1-E11中任一项的结合分子，包含VL，其中所述VL包含与C09的VL至少 85%，90%或95%相同的氨基酸序列。 E13)E12的结合分子，其中所述VL包含与C09的VL相同的氨基酸序列。 E14)E1-E13中任一项的结合分子，包含VH和VL，其中所述VH和VL包含与C09的 VH和VL至少85%，90%或95%相同的氨基酸序列。 E15)E14的结合分子，其中所述VH和VL包含与C09的VH和VL相同的氨基酸序 列。 E16)E1-E15中任一项的结合分子，其中所述结合分子与LING0-2LRR结构域结合。 E17)E16的结合分子，其中所述结合分子与LING0-2的LRR7-LRR12中的表位结合。 E18)E16的结合分子，其中所述结分子与SEQ ID NO :2的氨基酸202-343中的表 位结合。 E19)E1-E18中任一项的结合分子，其中所述结合分子与SEQ ID NO :2的氨基酸 28-408或SEQ ID NO :2的氨基酸410-500的LING0-2的区结合。 E20) E1-E19中任一项的结合分子，其中所述结合分子结合人、大鼠和小鼠 LING0-2。 E21)E1-E19中任一项的结合分子，其中所述结合分子结合人和大鼠 LING0-2。 E22)E1-E19中任一项的结合分子，其中所述结合分子结合人和小鼠 LING0-2。 E23)E1-E19中任一项的结合分子，其中所述结合分子结合人LING0-2。 E24)E1-E23中任一项的结合分子，其中所述结合分子促进运动神经元存活。 E25)E1-E24中任一项的结合分子，其中所述结合分子促进运动神经元轴突生长。 E26)E1_E25中任一项的结合分子，其中所述结合分子促进少突胶质细胞分化。 E27)E1-E26中任一项的结合分子，其中所述结合分子促进髓鞘形成。 E28)E1-E27中任一项的结合分子，其中所述结合分子促进AKT磷酸化。 E29)E1-E28中任一项的结合分子，其包括人抗体、嵌合抗体或人源化抗体。 E30)E1_E28中任一项所述的结合分子，其包含自然产生的抗体、scFv片段、Fab片 段、F(ab'）2片段、微型抗体（minibody)、双抗体（diabody)、三抗体（triabody)、四抗体 (tetrabody)或单链抗体。 E31)E1-E28中任一项的结合分子，其包括单克隆抗体。 E32) -种分离的多核苷酸，包含编码VH的核酸，其中所述VH包含C09的VH CDRs 1_3 〇 E33) -种分离的多核苷酸，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种能够特异性结合LINGO‑2的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段能够促进运动神经元的存活。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.05.14 US 61/646,611;2013.03.15 US 61/798,3981. 一种能够特异性结合LINGO-2的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其 抗原结合片段能够促进运动神经元的存活。2. 分离的核酸，其包含编码SEQ ID NO ;2多肤的可溶片段或其变体的多核巧酸，其中 所述多肤能够促进运动神经元的存活。3. 分离的核酸，其包含编码SEQ ID NO ;2多肤的可溶性片段或其变体的多核巧酸，其 中所述多肤能够促进运动神经元的存活减少轴突生长的抑制。4. 权利要求2或3的核酸，包含编码多肤的多核巧酸，所述多肤包含与选自由SEQ ID NO ;2的氨基酸1到500组成的组的参考氨基酸序列至少90%相同的氨基酸序列。5. 权利要求3的核酸，其中所述多肤包含与所述参考氨基酸序列至少95%相同的氨基 酸序列。6. 权利要求4的核酸，其中所述多肤包含与所述参考氨基酸序列相同的氨基酸序列。7. 权利要求2-6中任一项的核酸，进一步包含编码融合至所述多肤的异源多肤的多核 巧酸。8. 权利要求7的核酸，其中所述异源多肤选自由免疫球蛋白、血清白蛋白、祀向性多 肤、报告多肤、纯化易化多肤、任何所述多肤的片段，和两种或更多种所述多肤或片段的组 合所组成的组。9. 权利要求8的核酸，其中所述异源多肤选自由免疫球蛋白Fc、人血清白蛋白或其片 段、组氨酸标签，和运动神经元糖蛋白或其片段所组成的组。10. 包含药学上可接受的载体和权利要求2-9中任一项的核酸的组合物。11. 包含权利要求2-9中任一项的核酸的载体。12. 权利要求11的载体，其中所述核酸可操作地连接于表达控制序列。13. 权利要求12的载体，其中所述载体是病毒载体。14. 权利要求13的载体，其中所述病毒载体选自由腺病毒载体、慢病毒载体、杆状病毒 载体、爱泼斯坦-己尔病毒载体、乳多空病毒载体、牛痘病毒载体和单纯瘤疹病毒载体所组 成的组。15. 包含权利要求2-9中任一项的核酸或权利要求11-14中任一项的载体的宿主细胞。16. 权利要求15的宿主细胞，其表达所述多肤。17. 由权利要求2-9中任一项的核酸编码的分离的多肤。18. 权利要求17的多肤，其中所述多肤通过合成生产。19. 权利要求17或18的多肤，其中所述多肤缀合于聚合物。20. 权利要求19的多肤，其中所述聚合物选自由聚亚烧基二醇、糖类聚合物、多肤所组 成的组。21. 权利要求20的多肤，其中所述聚亚烧基二醇是聚己二醇（PEG)。22. 权利要求19-21中任一项的多肤，其中所述多肤缀合于1、2、3或4种聚合物。23. 权利要求22的多肤，其中所述聚合物的总分子量为20, 000化到40, 000化。24. -种抗体或其抗原结合片段，其能够特异地结合权利要求17或18的多肤，其中所 述抗体或其抗原结合片段能够促进运动神经元的存活。25. -种抗体或其抗原结合片段，其能够特异结合权利要求17或18的多肤，其中所述 抗体或其抗原结合片段能够促进运动神经元的存活减少轴突生长的抑制。26. 包含药学上可接受的载体权利要求17-23中任一项多肤的组合物。27. 包含药学上可接受的载体权利要求15或16的宿主细胞的组合物。28. -种用于促进运动神经元存活的方法，包括使所述运动神经元与有效量的包含 LING0-2括抗剂的组合物接触，其中所述LING0-2括抗剂选自由W下所组成的组； a)可溶的LING0-2多肤； (ii) LING0-2抗体或其抗原结合片段； (iii) LING0-2括抗剂多核巧酸； (iv) LING0-2 适体；和 (V)两种或更多种所述LING0-2括抗剂的组合。29. -种促进运动神经元轴突生长的方法，包括使所述运动神经元与包含LING0-2括 抗剂的组合物接触，其中所述LING0-2括抗剂选自由W下所组成的组： a)可溶的LING0-2多肤； (ii) LING0-2抗体或其抗原结合片段； (iii) LING0-2括抗剂多核巧酸； (iv) LING0-2 适体；和 (V)两种或更多种所述LING0-2括抗剂的组合。30. -种促进哺乳动物中运动神经元存活的方法，包括对其有需要的哺乳动物给予有 效量的包含LINGO-2括抗剂的组合物，其中所述LINGO-2括抗剂选自由W下所组成的组； a)可溶的LINGO-2多肤； (ii) LING0-2抗体或其抗原结合片段； (iii) LING0-2括抗剂多核巧酸； (iv) LING0-2 适体；和 (V)两种或更多种所述LINGO-2括抗剂的组合。31. -种促进哺乳动物中运动神经元轴突生长的方法，包括对其有需要的哺乳动物给 予有效量的包含LINGO-2括抗剂的组合物，其中所述LINGO-2括抗剂选自由W下所组成的 组： a)可溶的LINGO-2多肤； (ii) LINGO-2抗体或其抗原结合片段； (iii) LINGO-2括抗剂多核巧酸； (iv) LINGO-2 适体；和 (V)两种或更多种所述LINGO-2括抗剂的组合...

【专利技术属性】
技术研发人员：S米，RB佩平斯基，
申请(专利权)人：比奥根艾迪克MA公司，
类型：发明
国别省市：美国;US