通过破坏PD-1/PD-L1信号传输的免疫治疗制造技术

本公开提供了用于癌症患者的免疫治疗的方法，包括对患者施用抑制PD-1/PD-L1信号传输途径的抗体，或施用这种抗体与抗CTLA-4抗体的组合。此公开也提供了用于癌症患者的免疫治疗的方法，所述方法包括基于评估而选择患者以及对选择的受试者施用抗PD-1抗体，所述患者是免疫治疗的适合候选者，所述评估为来自患者的测试组织样品中在细胞表面上表达PD-1的细胞的比例超过了预定阈值水平。本公开另外还提供了在FFPE组织样品中特异地结合细胞表面表达的PD-L1抗原的单克隆抗体，以及用于在FFPE组织中用提供的抗PD-L1抗体来评估细胞表面表达的自动化IHC方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本申请要求美国临时专利申请No.61/647,442(2012年5月15日提交)和美国临时专利申请No.61/790,747(2013年5月15日提交)的权益，所述两项申请的内容在此通过提述以其整体并入。在本申请中，通过作者名和日期、或通过专利号或专利公布号在括号里参考了各种其他出版物。对这些出版物的全部引用可在说明书末尾处权利要求之前找到。这些出版物的公开在此通过提述以其整体并入本申请，以更完整地描述本文描述并要求保护的专利技术的日期为止，本领域技术人员已知的现有技术水平。然而，本文参考的引用不应被解读为认同这些参考对本专利技术是现有技术。专利
本专利技术涉及用于癌症患者的免疫治疗的方法，包括对所述患者施用破坏PD-1/PD-L1信号传输途径的抗体。能用生物标记物作为此治疗的一部分，以鉴定适于免疫治疗的患者，以及预测抗PD-1治疗的效力。专利技术背景人的癌症包纳了很多的遗传学和表观遗传学的改变，产生潜在可被免疫系统识别的新抗原(Sjoblom等,2006)。适应性免疫系统包含T和B淋巴细胞，具有很强的抗癌潜力，有广阔的容量和敏锐的特异性来响应不同的肿瘤抗原。进一步地，免疫系统呈现出了相当的可塑性和记忆组分。对所有这些适应性免疫系统属性的成功利用使免疫疗法在所有癌症治疗形式中独一无二。然而，虽然在临床前的模型和患者中观察到了对癌症的外源性免疫响应，但这种响应是无效的，并且既成的(established)癌症被看作是“自身”且是被免疫系统所容忍的。有助于这种容忍状态的是，肿瘤可以利用一些独特的机制来主动地破坏抗肿瘤免疫性。这些机制包括功能障碍的T细胞信号传输(Mizoguchi等,1992)、抑制的调节细胞(Facciabene等,2012)、以及指派(op-opt)内源性“免疫检验点(immune checkpoints)”，其用来下调适应性免疫响应的强度并保护正常组织免受肿瘤的间接损伤，以逃避免疫毁灭(Topalian等,2011；Mellman等,2011)。直到最近，癌症免疫治疗将实质努力聚焦在了通过采用性转移(adoptive-transfer)激活的效应细胞、针对相关抗原的免疫、或提供非特异性的免疫刺激剂如细胞因子来增强抗肿瘤免疫响应的手段上。然而在过去十年里，为了发展特异性的免疫检验点途径抑制剂的密集努力已经开始提供新的用于治疗癌症的免疫治疗手段，包括新的抗体(Ab)ipilimumab()的开发，ipilimumab结合并抑制细胞毒素T-淋巴细胞抗原-1(CTLA-4)，用于患有晚期的(advanced)黑色素瘤的患者的治疗(Hodi等,2010)，以及，如本申请所述，对阻碍PD-1抑制途径的抗体的开发。程序性死亡-1(PD-1)是由激活的T和B细胞表达的一种关键的免疫检验点受体，并介导免疫抑制。PD-1是受体的CD28家族的成员，其包括CD28、CTLA-4、ICOS、PD-1和BTLA。已鉴定出PD-1的2种细胞表面糖蛋白配体，程序性死亡配体-1(PD-L1)和程序性死亡配体-2(PD-L2)，所述两种配体在抗原呈递细胞上以及很多人癌症上表达，并已显示出在结合PD-1后下调T细胞的激活和细胞因子的分泌(Freeman等,2000；Latchman等,2001)。与CTLA-4不同，PD-1在主要外周组织中发挥功能，激活的T细胞在所述外周组织中可遭遇免疫抑制性的PD-L1(B7-H1)和PD-L2(B7-DC)配体，所述配体由肿瘤和/或间质细胞(stromal cells)表达(Flies等,2011；Topalian等,2012a)。对PD-1/PD-L1相互作用的抑制在临床前模型中介导强力的抗肿瘤活性(美国专利Nos.8,008,449和7,943,743)，而对PD-1/PD-L1相互作用的抗体抑制剂用于治疗癌症的用途已进入临床试验(Brahmer等,2010；Topalian等,2012b；Brahmer等,2012；Flies等,2011；Pardoll,2012；Hamid和Carvajal,2013)。新兴的个体化医疗领域的希望是药物基因组学的进步会越来越多地用于量身定制(tailor)针对限定的亚群体、以及最终为个体患者的治疗剂，以便增强效力并使不良作用最小化。最近的成功包括：例如，对甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate,)的开发以治疗费城染色体阳性的(Philadelphia chromosome-positive)慢性髓细胞性白血病(CML)，所述甲磺酸伊马替尼是一种抑制bcr-abl酪氨酸激酶的蛋白酪氨酸激酶抑制剂；对克唑替尼(crizotinib，)的开发以治疗5％的患有晚期非小细胞肺癌的、表达突变的间变性淋巴瘤激酶(ALK)基因的患者；以及对威罗菲尼(vemurafenib,)的开发，所述威罗菲尼是突变的B-RAF蛋白(V600E-BRAF)的抑制剂，其在约一半的黑色素瘤肿瘤中表达。然而，与靶向离散的(discrete)激活突变的小分子剂的临床开发不同(所述激活突变是在选择的癌症人群中找到的)，癌症免疫治疗中一个特别的挑战是对于基于机制的预测性生物标记物的鉴定，以能够进行患者的选择并指导治疗过程中(on-treatment)的管理。本文描述了在验证PD-L1的表达作为用于筛选抗PD-1免疫治疗的患者的生物标记物的进展。专利技术概述本公开提供用于罹患癌症的受试者的免疫治疗的方法，该方法包含对受试者施用组合物，所述组合物包含治疗上有效量的破坏、降低或抑制来自抑制性免疫调节物的信号传输的作用剂。在优选的实施方案中，所述作用剂是抗体。在其他优选的实施方案中，所述抑制性免疫调节物是PD-1/PD-L1信号传输途径的组分。在进一步优选的实施方案中，所述抗体破坏PD-1和PD-L1之间的相互作用。在一些实施方案中，所述抗体是本专利技术的抗PD-1抗体或本专利技术的抗PD-L1抗体。在优选的实施方案中，本专利技术的抗PD-1抗体是nivolumab(BMS-936558)，而本专利技术的抗PD-L1抗体是BMS-936559。在一些实施方案中，受试者已提前进行过癌症治疗。在其他实施方案中，所述癌症是晚期的、转移性的和/或难治愈的癌症。在优选的实施方案中，将抗体或其抗原结合部分施用于其受试者在受试者中诱导持久的临床响应。本公开还提供了用于罹患癌症的受试者的免疫治疗的方法，其方法包括：(a)选择受试者，所述受试者对于免疫治疗是合适的候选者，所述选择包括(i本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗罹患癌症的受试者的方法，所述方法包括对受试者施用治疗上有效量的抗体或其抗原结合部分，所述抗体或其抗原结合部分破坏程序性死亡‑1(PD‑1)和程序性死亡受体‑1(PD‑L1)之间的相互作用，其中所述抗体或其抗原结合部分特异地结合PD‑1或PD‑L1。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.05.15 US 61/647,442;2013.03.15 US 61/790,7471.一种治疗罹患癌症的受试者的方法，所述方法包括对受试者施用治疗
上有效量的抗体或其抗原结合部分，所述抗体或其抗原结合部分破坏程序性
死亡-1(PD-1)和程序性死亡受体-1(PD-L1)之间的相互作用，其中所述抗体
或其抗原结合部分特异地结合PD-1或PD-L1。
2.权利要求1的方法，其中所述癌症选自下组：黑色素瘤、肾细胞癌、
鳞状非小细胞肺癌(NSCLC)、非鳞状NSCLC、结肠直肠癌、去势抵抗性前列
腺癌(castration-resistant prostate cancer)、卵巢癌、胃癌、肝细胞癌、胰腺癌、
头部与颈部的鳞状细胞癌、食管、胃肠道及乳癌(carcinomas of the esophagus,
gastrointestinal tract and breast)、以及血液的恶性肿瘤(hematological 
malignancy)。
3.权利要求1的方法，其中所述治疗上有效量的抗体或其抗原结合部分
包含范围为0.1-10.0mg/kg体重的剂量，其是以每周一次、每两周一次、或每
月一次的给药方案施用的。
4.一种用于罹患癌症的受试者的免疫治疗的方法，其方法包括：
(a)选择受试者，所述受试者对于免疫治疗是合适的候选者，所述选择
包括：
(i)提供测试组织样品，所述测试组织样品是从患有该组织的癌症的患
者获得，并包含肿瘤细胞和肿瘤浸润性的炎症细胞(tumor-infiltrating 
inflammatory cells)；
(ii)评估测试组织样品中在细胞表面上表达PD-L1的细胞的比例；以及
(iii)基于评估而选择受试者作为合适的候选者，所述评估为测试组织样
品中在细胞表面上表达PD-L1的细胞的比例超过预定的阈值水平；以及
(b)对选择的受试者施用包含治疗上有效量的抗PD-1抗体的组合物。
5.权利要求4的方法，其中所述表达PD-L1的细胞的比例是通过进行测
定法来评估的，所述测定法是为了确定测试组织样品中细胞表面上PD-L1多
肽的存在。
6.权利要求5的方法，其中所述测试组织样品是福尔马林固定的、石蜡
包埋(FFPE)的组织样品。
7.权利要求6的方法，其中PD-L1多肽的存在是用自动化的IHC测定法来

\t确定的。
8.权利要求12的方法，其中所述IHC测定法是用抗PD-L1单克隆抗体来
结合到PD-L1多肽而进行的，其中所述抗PD-L1单克隆抗体选自28-8、28-1、
28-12、29-8和5H1。
9.权利要求4的方法，其中所述预定的阈值水平是如用mAb 28-8通过自
动化的IHC确定的表达细胞表面PD-L1的肿瘤细胞或单个肿瘤浸润性的炎症
细胞的1％。
10.一种用于治疗罹患癌症的受试者的方法，其方法包括：
(a)选择受试者，所述受试者不适于抗PD-1抗体免疫治疗，所述选择包
括：
(i)提供测试组织样品，所述组织样品是从患有该组织的癌症的患者获
得，并包含肿瘤细胞和肿瘤浸润性的炎症细胞；
(ii)评估测试组织样品中在细胞表面上表达PD-L1的细胞的比例；以及
(iii)基于评估而选择受试者作为不合于抗PD-1抗体免疫治疗，所述评估
为测试组织样品中在细胞表面上表达PD-L1的细胞的比例低于预定的阈值水
平；以及
(b)对选择的受试者施用除了抗PD-1抗体之外的疗护标准
(standard-of-care)治疗剂。
11.一种单克隆抗体或其抗原结合部分，其在福尔马林固定的、石蜡包
埋的(FFPE)组织样品中特异性地结合到细胞表面表达的PD-L1多肽。
12.权利要求16的单克隆抗体或其抗原结合部分，其抗体或其部分在重
链可变区中包含CDR1、CDR2和CDR3区，所述重链可变区包含具有SEQ ID 
NO:35中所述序列的连续连接的氨基酸；并在轻链可变区中包含CDR1、
CDR2和CDR3区，所述轻链可变区包含具有SEQ ID NO:36中所述序列的连
续连接的氨基酸。
13.权利要求16的单克隆抗体或其抗原结合部分，其抗体或其部分包含
重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含具有SEQ ID NO:35中所述
序列的连续连接的氨基酸，而所述轻链可变区包含具有SEQ ID NO:36中所
述序列的连续连接的...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·P·科格斯韦尔，S·M·戈德伯格，A·K·古普塔，M·朱里孔克尔，王希涛，J·M·威金顿，
申请(专利权)人：百时美施贵宝公司，
类型：发明
国别省市：美国;US