【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及显微镜,所述显微镜包括用于将样本在检测器上成像的成像物镜以及 用于在成像光学器件的焦平面内或在此焦平面附近限定的平面内以光片照亮样本的机构。 用于照明的机构包括辐射出相干光的照明光源。
技术介绍
其中照明光路和检测光路基本上相互垂直布置并且其中以光片在成像光物镜的 焦平面内、即垂直于其光轴照亮样本的显微镜,被构造为用于根据选择性平面照明显微术 (SPM)的方法来检查样本。与其中三维样本在各个不同的深度的平面内被逐点扫描并且其 中然后将所获得的图像信息组合为样本的三维图像的激光扫描共聚焦显微术(LSM)的差 异在于,SPIM技术基于宽场显微技术并且实现了基于通过样本的各个平面的光学截面对于 样本进行图像图示。 SPM技术的优点包括:以更高的速度进行图像信息记录,生物样本的褪色的风险 更低,以及焦点在样本内的更扩大的侵入深度。 原理上,在SPM技术中,以激光激励包含在样本中的或引入到样本中的荧光团, 这形成了所谓的光片。以此光片分别将样本的深度内的选择的平面照亮并且以成像光学器 件获得具有光截面形式的此样本平面的图像。基本上与此使用静态光片的激励等价的是薄 的旋转对称的激光束在成像物镜的焦平面内的快速往复运动。因此,有效地,即在观测的时 间段内以时间平均的方式实现了光片的形状。 SPIM技术例如在如下文献中描述:Stelzer等人的Optics Letter 31,1477(2006),Stelzer 等人的 Science 305, 1007 (2004),DE 10257423A1 和 TO 2004 ...
【技术保护点】
一种显微镜,包括:○成像光学器件,所述成像光学器件通过成像物镜(7)在第一方向上接收从样本(1)以第一孔径角度辐射出的光,○检测装置,用于检测从样本(1)以第一孔径角度辐射出的、以成像光学器件接收的光,○照明装置,包括带有波长λ的照明光源(3)和用于以在第二方向上的照明光分布照亮样本(1)的照明光路,其中,第二方向基本上垂直于第一方向,其特征在于,所述照明装置具有机构,使得:○在第二方向中的截面(LZ)内,照明光分布基本上恒定,○在由第一孔径角度张成的锥形内,在第一方向上的伸展(LY)的区域外,照明光的功率小于20%,其中:LY<2λ,LZ>8λ。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.07.02 DE 102012013163.11. 一种显微镜,包括: 〇成像光学器件,所述成像光学器件通过成像物镜(7)在第一方向上接收从样本(1) 以第一孔径角度辐射出的光, 〇检测装置,用于检测从样本(1)以第一孔径角度辐射出的、以成像光学器件接收的 光, 〇照明装置,包括带有波长A的照明光源(3)和用于以在第二方向上的照明光分布照 亮样本(1)的照明光路,其中,第二方向基本上垂直于第一方向, 其特征在于,所述照明装置具有机构,使得: 〇在第二方向中的截面(LZ)内,照明光分布基本上恒定, 〇在由第一孔径角度张成的锥形内,在第一方向上的伸展(LY)的区域外,照明光的功 率小于20%,其中: LY〈2 入, LZ>8 入。2. 根据权利要求1所述的显微镜,其中,所述机构包括复数滤波器,所述复数滤波器将 到照明装置的光瞳内的光分布限制在基本上圆形的区域内。3. 根据权利要求2所述的显微镜,其中,滤波器产生在照明装置的光瞳内由至少两个 Sine函数的叠置形成的照明光分布。4. 根据权利要求3所述的显微镜,其中,两个Sine函数对应于根据Ewald方程投影到 一个平面内、优选地到X-Y平面内的Sine (z)函数。5. 根据前述权利要求中任一项所述的显微镜,其中,滤波器产生在照明装置的光瞳内 对应于马修光束的频谱的照明光分布。6. 特别地根据前述权利要求中任一项所述的显微镜,包括: -照明装置,包括照明光源(3)和用于以光片照亮样本(1)的照明光路, -检测装置,用于检测从样本(1)辐射出的光, _成像光学器件,所述成像光学器件将样本(1)通过成像光路中的成像物镜(7)至少部 分地成像到所述检测装置上, -其中,光片在成像物镜(7)的焦点中或在成像物镜的几何焦点附近的限定平面内基 本上是平的,并且其中,成像物镜(7)具有以非零角度与光片的平面相交的、优选地垂直相 交的光轴, -其中,在照明光路中提供了通过如下方式作为Sine空间过滤器起作用的幅度和/或 相位滤波器,即,其在至少一个空间方向上通过对于出现的空间频率以sine函数滤波来限 制照明光, 和/或在至少一个空间方向上通过sine滤波器函数对于照明光的相位和幅度进行限 制, 和/或在照明光路中提供了组合的幅度和相位滤波器,所述组合滤波器通过以sine滤 波器函数影响照明光分布的传输率进程来进行光片的成形。7. 根据前述权利要求中至少一项所述的显微镜,其特征在于, 幅度和/或相位滤波器至少部分地布置在照明光学器件的光瞳平面内或其附近, 和/或滤波器通过全息图(CGH)和/或衍射光学器件实现, 和/或滤波器至少部分地通过用于光的空间调制器(空间光调制器(SLM))形成, 和/或以SLM实现光片垂直于光方向的移动, 和/或成像物镜的焦平面在光片移动时移动, 和/或在光瞳平面...
【专利技术属性】
技术研发人员:J西本摩根,W辛格,T安哈特,R沃利申斯基,
申请(专利权)人:卡尔蔡司显微镜有限责任公司,
类型:发明
国别省市:德国;DE
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