一种半胱氨酸的检测试剂及检测方法技术

本发明专利技术提供了一种半胱氨酸的检测试剂及检测方法。具体地，所述的试剂组合包含银纳米片溶液；其中，所述的银纳米片溶液中含有保护剂。以及用所述的试剂组合检测样品中半胱氨酸的检测方法。本发明专利技术的试剂盒具有检测快速，实验条件简易，结果准确等特征。

【技术实现步骤摘要】
一种半胱氨酸的检测试剂及检测方法
本专利技术属于生物小分子的检测领域，具体涉及一种能够快速、简便、灵敏的识别出水溶液中半胱氨酸的检测方法。
技术介绍
在天然氨基酸中，半胱氨酸是唯一一种含有巯基的氨基酸，在生物体及某些植物体中起着重要的作用。例如，在生物体中半胱氨酸缺乏时，将会导致生长缓慢，头发无光泽，发生水肿，肝脏，皮肤损伤及身体虚弱等症状。因此对于半胱氨酸的检测具有重要的意义。而目前传统的半胱氨酸检测方法主要有高效液相层析、电化学、化学发光法、分光光度法等，这些方法都依赖于氧化还原法，或者得到发光基团，或者荧光基团，并且借助相关的大型精密仪器设备进行检测，而这些方法操作繁琐，成本花费高且耗时长。文献“Selectivelycolorimetricdetectionofcysteinewithtriangularsilvernanoprisms”中，采用的是半胱氨酸的巯基直接和银片作用，形成银硫键，长时间的反应使银原子从银片上剥落下来，其形貌发生改变，达到检测半胱氨酸的目的。但是该反应常温下反应时间长，需要水浴加热，促使反应的进行，并且其比色灵敏度为160nM高于本专利技术的方法(如图1所示，比色灵敏度为25nM)。因此，本领域尚缺乏一种能够快速、及时、简便、准确地检测出水溶液中低浓度的半胱氨酸方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能够快速、及时、简便、准确地检测出水溶液中低浓度的半胱氨酸的试剂盒及检测方法。本专利技术的第一方面，提供了一种用于检测半胱氨酸的试剂，所述的试剂包含银纳米片溶液；其中，所述的银纳米片溶液中含有保护剂。在另一优选例中，所述溶液中，银纳米片的浓度为3nM-100nM。在另一优选例中，所述溶液中，银纳米片的浓度为15nM-25nM。在另一优选例中，所述的保护剂选自下组：柠檬酸、柠檬酸盐聚乙烯吡咯烷酮、可溶性的(对-磺酰苯基)苯基膦化盐，或其组合。在另一优选例中，所述的保护剂包括选自下组(a)和选自下组(b)的保护剂：(a)柠檬酸、柠檬酸盐，或其组合；(b)聚乙烯吡咯烷酮、可溶性(对-磺酰苯基)苯基膦化盐，或其组合。在另一优选例中，所述的柠檬酸盐是柠檬酸碱金属盐，较佳地，所述的柠檬酸盐选自下组：柠檬酸钾、柠檬酸钠，或其组合。在另一优选例中，所述的可溶性(对-磺酰苯基)苯基膦化盐选自下组：碱金属盐、碱土金属盐，或其组合。在另一优选例中，所述的试剂的pH值为3-10。在另一优选例中，所述试剂的pH值为4-9，较佳地为5-8。本专利技术的第二方面，提供了一种用于检测半胱氨酸的试剂盒，所述的试剂盒包括如本专利技术第一方面所述的试剂；或所述的试剂盒包括组分：(i)银纳米粒子前驱体；(ii)还原性试剂；和(iii)保护剂。在另一优选例中，所述的银纳米粒子前驱体是可溶性银盐。在另一优选例中，所述的还原性试剂为可溶性硼酸盐，或其水溶液，其中，所述的可溶性硼酸盐优选硼氢化钠、硼氢化钾，或其组合。在另一优选例中，所述的保护剂选自下组：柠檬酸、柠檬酸盐、聚乙烯吡咯烷酮、可溶性的(对-磺酰苯基)苯基膦化盐，或其组合。在另一优选例中，所述的保护剂包括选自下组(a)和选自下组(b)的保护剂：(a)柠檬酸、柠檬酸盐，或其组合；(b)聚乙烯吡咯烷酮、可溶性(对-磺酰苯基)苯基膦化盐，或其组合。在另一优选例中，所述的柠檬酸盐是柠檬酸碱金属盐，较佳地，所述的柠檬酸盐选自下组：柠檬酸钾、柠檬酸钠，或其组合。在另一优选例中，所述的可溶性(对-磺酰苯基)苯基膦化盐选自下组：(对-磺酰苯基)苯基膦化碱金属盐、(对-磺酰苯基)苯基膦化碱土金属盐，或其组合。在另一优选例中，所述的试剂盒还包括：含有碘离子的溶液。在另一优选例中，所述的含有碘离子的溶液为碘化钾溶液。在另一优选例中，所述的试剂盒还包括pH调节试剂。在另一优选例中，所述的pH调节试剂是强酸和/或强碱，较佳地，所述的pH调节试剂选自下组：氢氧化钠、氢氧化钾、硫酸、硝酸。本专利技术的第三方面，提供了一种检测待测样品中的半胱氨酸的方法，所述方法包括：用如本专利技术第一方面所述的试剂，或如本专利技术第二方面所述的试剂盒对样品进行检测。在另一优选例中，所述方法包括步骤：提供一如本专利技术第一方面所述的试剂；提供一样品水溶液；将所述的试剂加入样品中使其反应，再加入含碘离子的溶液，形成检测混合液；通过所述检测混合液光谱学特征，判断所述样品中是否存在半胱氨酸，和/或判断样品中半胱氨酸的含量。在另一优选例中，所述的光谱学特征选自下组：颜色、光吸收强度、吸收光谱峰，或其组合。在另一优选例中，所述方法还包括：用肉眼观察所述检测混合液的颜色。在另一优选例中，所述方法还包括：用仪器分析方法检测所述检测混合液的颜色。在另一优选例中，所述的仪器分析方法选自下组：分光光度检测法、紫外-可见吸收光谱法。在另一优选例中，所述方法还包括：提供一对照混合液，通过比较所述检测混合液和所述对照混合液的光谱学特征，判断所述样品中是否存在半胱氨酸，和/或判断样品中半胱氨酸的含量。在另一优选例中，所述的对照混合液通过以下步骤制备：提供一不含有半胱氨酸的空白溶液；将所述的试剂加入空白溶液中，并加入含碘离子的溶液，形成对照混合液；通过所述对照混合液和所述检测混合液的光谱学特征差异，判断所述样品中是否存在半胱氨酸。在另一优选例中，所述的光谱学特征选自下组：颜色、光吸收强度、吸收光谱峰，或其组合。在另一优选例中，所述方法还包括：用肉眼分别观察所述检测混合液和所述对照混合液的颜色。在另一优选例中，所述方法还包括：用仪器分析方法分别检测所述检测混合液和所述对照混合液的颜色。在另一优选例中，所述的仪器分析方法选自下组：分光光度检测法、紫外-可见吸收光谱法。在另一优选例中，所述的如本专利技术第一方面所述的试剂通过包括以下步骤的方法制备：提供一溶解有银纳米粒子前驱体的水溶液；往上述水溶液中加入还原性试剂，得到银纳米片。在另一优选例中，所述的银纳米粒子前驱体是可溶性银盐。在另一优选例中，所述的还原性试剂为可溶性硼酸盐，或其水溶液，其中，所述的可溶性硼酸盐优选硼氢化钠、硼氢化钾，或其组合。在另一优选例中，所述溶解有银纳米粒子前驱体的水溶液中还含有保护剂。在另一优选例中，所述的溶解有银纳米粒子前驱体的水溶液通过以下步骤制备：将银纳米粒子前驱体和保护剂加入去离子水中，形成溶解有银纳米粒子前驱体的水溶液。在另一优选例中，所述的保护剂选自下组：柠檬酸、柠檬酸盐、聚乙烯吡咯烷酮、可溶性的(对-磺酰苯基)苯基膦化盐，或其组合。在另一优选例中，所述的保护剂包括选自下组(a)和选自下组(b)的保护剂：(a)柠檬酸、柠檬酸盐，或其组合；(b)聚乙烯吡咯烷酮、可溶性(对-磺酰苯基)苯基膦化盐溶液，或其组合。在另一优选例中，所述的柠檬酸盐是柠檬酸碱金属盐，较佳地，所述的柠檬酸盐选自下组：柠檬酸钾、柠檬酸钠，或其组合。在另一优选例中，所述的可溶性(对-磺酰苯基)苯基膦化盐选自下组：碱金属盐、碱土金属盐，或其组合。在另一优选例中，所述的方法还包括：用pH调节试剂调节样品溶液pH至3-10。在另一优选例中，用pH调节试剂调节样品溶液至pH值为4-9，较佳地为5-8。在另一优选例中，包括步骤：用所述检测混合液与已知浓度的标准样品进行比较，判断待测样品中是否存在半胱氨酸和/或判断待测样品中半胱本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测半胱氨酸的试剂，其特征在于，所述的试剂包含银纳米片溶液；其中，所述的银纳米片溶液中含有保护剂。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测半胱氨酸的试剂，其特征在于，所述的试剂包含银纳米片溶液；其中，所述的银纳米片溶液中含有保护剂；和含有碘离子的溶液。2.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述的保护剂选自下组：柠檬酸、柠檬酸盐、聚乙烯吡咯烷酮、可溶性的(对-磺酰苯基)苯基膦化盐，或其组合。3.一种用于检测半胱氨酸的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括如权利要求1所述的试剂；或所述的试剂盒包括组分：(i)银纳米粒子前驱体；(ii)还原性试剂；(iii)保护剂，所述的保护剂选自下组：柠檬酸、柠檬酸盐、聚乙烯吡咯烷酮、可溶性的(对-磺酰苯基)苯基膦化盐，或其组合；和(iv)含有碘离子的溶液。4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的还原性试剂为可溶性硼酸盐，或其水溶液。5.一种检测待测样品中的半胱氨酸的方法，其特征在于，包括：用如权利要求1所述的试剂，或如权利要求3所述的试剂盒对样品进行检测。6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，包括步骤：提供一如权利要求1所述的试剂；提供一样品水溶液；将所述的试剂加入样品中使其反应，再加入含碘...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴爱国，李永龙，沈折玉，高月霞，汪竹青，
申请(专利权)人：中国科学院宁波材料技术与工程研究所，
类型：发明
国别省市：浙江;33