修饰的抗体区及其用途制造技术

本发明专利技术涉及抗体的修饰Fc区及其在例如含有本发明专利技术的Fc区的抗体中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利技术背景与内容已公开并知晓关于单克隆抗体及其在研宄、诊断以及多种疾病包括癌症的治疗中的用途的大量信息。许多种单克隆抗体对患者的治疗用途已得到政府监管批准。实验室中使用分子生物学技术如克隆、噬菌体展示、转基因小鼠和诱变已构建具有不同性质(例如改善的亲和性(affinity)、亲和力(avidity)和药代动力学)和结构(包括全人源抗体、具有人源和非人源元素的抗体、Fab抗体和其它抗体结构)的抗体。改进治疗性抗体的目的包括克服宿主抗抗体应答和延长治疗性抗体的半衰期，并且持续需要改进的抗体。本专利技术涉及抗体的修饰Fe区及其例如在含有本专利技术的Fe区的抗体(例如在包括全长IgGl、IgG2、IgG3或IgG4的全长IgG抗体、嵌合抗体或人源化抗体中)中或在含有本专利技术的Fe区或部分Fe区的融合蛋白(称为“免疫球蛋白(Ig)融合蛋白”、“Fe融合蛋白”或“Fe融合多肽”)中的用途。现有技术包括美国专利申请号US2006/104989中已描述了抗体的修饰Fe区。本专利技术的修饰Fe区相对于对应未修饰的(野生型或亲本)Fe区在本文公开的位置具有单氨基酸取代(本文中也称为Fe变体)，且具有与对应的未修饰Fe区以及本领域中已描述的其它修饰Fe区不同的一种或多种性质，如对一种或多种Fe受体的结合增强和/或改善不同PH条件下的结合。使用标准分子生物学技术可将本专利技术的修饰Fe区并入任何抗体或Fe融合多肽，并且意图将所有这类修饰的抗体和Fe融合多肽包括在本专利技术中。Fe指的是IgA、IgD和IgG的最后两个恒定区Ig域和IgE和IgM的最后三个恒定区Ig ±或，以及这些域N端的柔性铰链。对于IgA和IgM，Fe可包括J链。Fe受某些细胞上存在的受体FcR的约束。由于Fe和特定细胞上存在的某些FcR之间相互作用的亲和力与靶向细胞毒性相关，以及人类的临床疗效与同种异型的高或低亲和力多态形式的某些FcR相关，因此具有为结合一种或多种FcR而优化的Fe区的抗体或融合多肽可更有效地破坏癌细胞。在某些实施方案中，本专利技术的修饰Fe区将改善的性质赋予多肽或包括其中并入Fe区的多肽的复合物，例如复合物如包括具有修饰Fe区的Ig重链的全长抗体、嵌合抗体或人源化抗体，所述改善的性质如相对于相应多肽或复合物如并入相应未修饰的(野生型或亲本)Fc区或不同修饰Fe区的抗体，与一种或多种FcR的结合增强或改善，和/或抗体依赖性细胞毒性(ADCC)增强或改善。因此，相比并入本专利技术的Fe区的多肽或抗体，缺少本文公开的一种或多种Fe区修饰且FcR结合不同的相应多肽或抗体，可具有天然(野生型)FcA区序列，或可具有除本文中公开的导致与至少一种FcR的结合增强或改善的修饰之外的氨基酸序列修饰(如增添、缺失和/或取代)的Fe区序列。在本专利技术的一些实施方案中，本专利技术的修饰Fe区赋予分子延长或缩短的半衰期。在本专利技术的一个实施方案中，本专利技术的修饰Fe区含有本文中描述的取代中的一种。在其它实施方案中，本专利技术的修饰Fe区含有本文中描述的两种、三种、四种、五种或更多种取代的组合，其可附加地或协同地增强本专利技术的修饰Fe区的性质。在另一实施方案中，本专利技术包括具有本专利技术的修饰Fe区的多肽，即其是含有本文中描述的取代中的一种的融合多肽。在一个实施方案中，融合多肽的非Fe区包括靶结合分子。在其它实施方案中，本专利技术包括具有本专利技术的修饰Fe区的多肽，所述修饰Fe区含有本文中描述的两种、三种、四种、五种、六种、十种、十二种或更多种取代的组合。在一个实施方案中，本专利技术包括具有本专利技术的含本文所述取代中的一种的修饰Fe区的抗体或抗原结合抗体片段。在其它实施方案中，本专利技术包括具有含本文所述的两种、三种、四种、五种、六种、十种、十二种或更多种取代的组合的本专利技术的修饰Fe区的抗体或抗原结合抗体片段。在另一实施方案中，本专利技术包括具有含有本文所述的取代之一的本专利技术的修饰Fe区的多肽(例如，在多肽复合物如抗体或Fe融合多肽中的多肽)或缀合物，所述缀合物包括与另一分子缀合的Fe区(Fe融合缀合物)。在其它实施方案中，本专利技术包括具有含有本文所述的两种、三种、四种、五种或更多种取代的组合以及一种或多种其它取代的本专利技术的修饰Fe区的多肽(例如，在多肽复合物如抗体或Fe融合多肽中的多肽)或缀合物，所述缀合物包括与另一分子缀合的Fe区，所述其它取代可赋予除与本专利技术的修饰Fe区中的取代位置和/或取代有关的性质之外的性质，或可附加地或协同地增强本专利技术的修饰Fe区的性质。在本专利技术的一些实施方案中，具有本专利技术的修饰Fe区的多肽具有一种或多种本文描述的功能性质。对于还包括非FcR靶结合分子结构域的、具有本专利技术的修饰Fe区的多肽，其可选地可与其它多肽一起形成抗体，该抗体的靶结合分子结构域或可变区可特异性地结合几乎任何靶分子或抗原。因此，在一方面，本专利技术涉及具有下述Fe区(例如IgG Fe区，如IgGl Fe区)的多肽，所述Fe区在Fe区的以下氨基酸残基(位置)处具有以下氨基酸取代:M2521、P257C、P2571、P257T、E258D、E258F、E258G、E2581、E258K、E258L、E258Q, E258S、E258V、E258W、V259E、V259G、V2591、V259R、T260A、T260C、T260F、T260L、T260N、T260S、T260W、S426C、S426N、V427S、V427T、M428F、M428Y、E4301、E430L、E430Q、A431F、A431H、A431P、H433A、H433E、H433R、N434A、N434D、N434F、N434G、N434H、N4341、N434M、N434R、N434V、N434W、N434Y、H435K或在这些位置的任何组合处的那些取代。对于本文中讨论的所有位置，根据Kabat的EU索引进行编号(Kabat et al.，1991)。抗体领域的技术人员将知道这种惯例由Ig序列的特定区中的非顺序编号组成，使得对Ig家族中的保守位置进行标准化参考。因此，由EU索引定义的任何给定的Ig位置并不是必须与其顺序次序相对应。除了多肽、蛋白质或其它复合物例如本文中描述的并入本专利技术的修饰Fe区的缀合物之外，本专利技术还包括:编码修饰Fe区或有修饰Fe区的多肽的多核苷酸和表达载体，包括此类多核苷酸和表达载体的文库，已引入此类多核苷酸或表达载体的宿主细胞(例如从而使宿主细胞产生具有修饰Fe区的多肽)，宿主细胞库，以及制造、培养或操控宿主细胞或宿主细胞库的方法。例如，本专利技术包括培养这些宿主细胞，从而由宿主细胞生产例如分泌或释放具有修饰Fe区的多肽。还包括药物组合物和试剂盒，其包括具有本专利技术的修饰Fe区的多肽、蛋白质或其它复合物，和/或编码具有这种修饰Fe区的多肽的多核苷酸、表达载体或宿主细胞。此外，本专利技术还包括具有本专利技术的修饰Fe区的多肽、蛋白质或缀合物例如在Fe受体结合试验中或在体外或体内诱导ADCC活性的用途。本专利技术还提供了本专利技术用于药物治疗的多肽、蛋白质、缀合物、多核苷酸、表达载体和/或宿主细胞，以及本专利技术的多肽、蛋白质或其它复合物、多核苷酸、表达载体和/或宿主细胞用于制造例如对在体外或体内诱导ADCC活性有用的药物的用途。本文中使用的抗体是具有由所有或部分哺乳本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含修饰Fc区的抗体，其中所述修饰Fc区相对于亲本IgG Fc区在位置252、257、258、259、260、426、427、428、430、431、433、434或435包含氨基酸取代，其中所述Fc区中所述位置的编号是按KabatEU索引的编号，所述氨基酸取代选自：M252I、P257C、P257I、P257T、E258D、E258F、E258G、E258I、E258L、E258Q、E258V、E258W、V259E、V259G、V259I、V259R、T260A、T260C、T260F、T260L、T260N、T260S、T260W、S426C、S426N、V427S、V427T、M428Y、E430I、E430L、E430Q、A431F、A431H、A431P、H433A、H433E、N434G、N434I、N434M、N434R、N434V、N434W、H435K。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.04.27 US 61/639,7291.包含修饰Fe区的抗体，其中所述修饰Fe区相对于亲本IgGFe区在位置252、257、258、259、260、426、427、428、430、431、433、434 或 435 包含氨基酸取代，其中所述 Fe 区中所述位置的编号是按KabatEU索引的编号，所述氨基酸取代选自:M2521、P257C、P2571、P257T、E258D、E258F、E258G、E2581、E258L、E258Q, E258V、E258W、V259E、V259G、V2591、V259R、T260A、T260C、T260F、T260L、T260N、T260S、T260W、S426C、S426N、V427S、V427T、M428Y、E4301、E430L、E430Q、A431F、A431H、A431P、H433A、H433E、N434G、N4341、N434M、N434R、N434V、N434W、H435K。2.包含修饰Fe区的抗体，其中所述修饰Fe区相对于亲本IgGFe区在位置257、258、434或435包含氨基酸取代，其中所述Fe中所述位置的编号是按Kabat EU索引的编号，所述氨基酸取代选自:P257C、E258V、N434G、N4341、N434M、H435K。3.包含修饰Fe区的抗体，其中所述修饰Fe区相对于亲本IgGFe区在位置252包含氨基酸取代，其中所述Fe中位置的所述编号是按KabatEU索引的编号，其中所述取代是M252L.4.包含修饰Fe区的抗体，其中所述修饰Fe区相对于亲本IgGFe区在位置257包含氨基酸取代，其中所述Fe区中所述位置的编号是按Kabat EU索引的编号，所述氨基酸取代选自 P257C、P2571、P257T。5.包含修饰Fe区的抗体，其中所述修饰Fe区相对于亲本IgGFe区在位置258包含氨基酸取代，其中所述Fe区中所述位置的编号是按Kabat EU索引的编号，所述氨基酸取代选自 E258D、E258F、E258G、E2581、E258L、E258Q, E258V、E258W。6.包含修饰Fe区的抗体，其中所述修饰Fe区相对于亲本IgGFe区在位置259包含氨基酸取代，其中所述Fe区中所述位置的编号是按Kabat EU索引的编号，所述氨基酸取代选自 V259E、V259G、V2591、V259R。7.包含修饰Fe区的抗体，其中所述修饰Fe区相对于亲本IgGFe区在位置260包含氨基酸取代，其中所述Fe区中所述位置的编号是按Kabat EU索引的编号，所述氨基酸取代选自 T260A、T260C、T260F、T260L、T260N、T260S。8.包含修饰Fe区的抗体，其中所述修饰Fe区相对于亲本IgGFe区在位置426包含氨基酸取代，其中所述Fe区中所述位置的编号是按Kabat EU索引的编号，所述氨基酸取代选自 S426C、S426N。9.包含修饰Fe区的抗体，其中所述修饰Fe区相对于亲本IgGFe区在位置427包含氨基酸取代，其中Fe区中所述位置的编号是按KabatEU索引的编号，所述氨基酸取代...

【专利技术属性】
技术研发人员：杰·M·肖特，华文昌，格哈德·弗雷，
申请(专利权)人：生物蛋白有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US