京科528三系配套杂交种制种方法技术

本发明专利技术公开了一种京科528三系配套杂交种制种方法，本发明专利技术提供了一种杂交制种的方法，包括如下步骤：以玉米不育系S 90110-2为不育系，玉米自交系90110-2为保持系，玉米自交系京2437为恢复系，进行三系配套制种，得到杂交种京科528。本发明专利技术的实验证明，本发明专利技术利用育成的不育系S 90110-2、保持系90110-2和恢复系京2437进行京科528三系配套杂交种制种，配制的不育化杂交种京科528种子在产量、抗性及其他农艺性状上与常规制种方法生产的京科528种子基本相同。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种京科528三系配套杂交种制种方法。
技术介绍
强优势杂交种的选育和推广是提高玉米产量的重要途径。利用常规的制种方法配制杂交种需要对母本进行人工去雄，不仅耗费大量的劳动力，增加种子生产成本，且存在由于去雄不及时、不彻底影响种子质量的潜在风险。利用雄性不育系制种是保证种子纯度提高玉米产量的一种有效方法。早在上世纪五六十年代，国内外就开始了对玉米不育化制种的研究。细胞质雄性不育由于容易实现不育系、保持系和恢复系的配套，是玉米育种中利用的主要类型。细胞质雄性不育系可划分为T、S和C型。60年代初，T型不育系引入我国。由于对玉米小斑病“T小种”专化性侵染，T型不育系的应用受到严重限制。70年代，我国育种工作者从国外引进C型、S型不育系。C型不育系虽然不育性较稳定、彻底，但其恢复系通常需要重新转育，周期长且步骤繁琐，导致该型不育系在实践中难以普及应用。S型不育系是3种类型中最大的一个组，已有研究证明昌7-2等黄改系材料是其天然强恢复系。但S型不育系的育性因基因型背景的不同而有较大差异，在特定的遗传背景下育性高度稳定。国内优良玉米杂交种的父本多属黄改种质，因此充分利用S型不育系可以节省恢复系的转育工作，是实现快速不育化制种研究和应用的有效途径。实现玉米细胞质雄性不育化制种的关键是不育系、保持系和恢复系的选育。选育不育系最常用的方法是回交转育法，即用稳定的不育系作非轮回亲本，选择优良自交系作轮回亲本，进行多代回交，育成不育性稳定的优良不育自交系，而原轮回亲本便是该不育系的保持系。但仅仅利用传统的回交转育方法，一般需回交5-6代，转育周期较长，延缓了不育化制种技术在玉米杂交种上的应用。利用回交转育方法进行恢复系的选育比不育系更为复杂，在回交的同时要进行测交，以测交结果作为恢复系的选择标准；或在回交转育中利用不育细胞质提供育性的指标性状。由于选育过程相对繁琐，在恢复系尚未育成或只有部分恢复性的情况下，须将不育化的杂交种子与正常杂交种种子按适当比例掺合使用，这就给种子生产在技术和管理上提出了更高的要求。因此，如何加快不育系的选育速度、简化恢复系的选育过程，是目前雄性不育化制种技术亟需解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种杂交制种的方法。本专利技术提供的方法，包括如下步骤：以玉米不育系S 90110-2为不育系，玉米自交系90110-2为保持系，玉米自交系京2437为恢复系，进行三系配套制种，得到杂交种京科528。上述方法中，所述不育系S 90110-2为按照包括如下步骤的方法转育：a)玉米不育系S京724做母本，90110-2做父本杂交，得到雄性不育杂交子代F1；b)以所述雄性不育杂交子代F1为母本、与90110-2回交，得到雄性不育BC1代群体；c)以所述雄性不育BC1代单株为母本、与90110-2继续回交，得到雄性不育BC2代群体；d)以所述雄性不育BC2代单株为母本、与90110-2继续回交，得到90110-2的雄性不育系。上述方法中，在步骤b)和c)之间，还包括BC1代分子鉴定的步骤，所述BC1代分子鉴定为利用40对SSR核心引物中在S京724和90110-2间存在差异的15对引物umc2105k3、phi053k2、bnlg2291k4、bnlg2305k4、bnlg161k8、umc1545y2、umc1125y3、bnlg240k1、phi065k9、phi96100y1、umc2115k3、umc1429y7、umc2160k3、umc1936k4和phi041y6分别对所述雄性不育BC1代群体单株进行PCR扩增，选择与90110-2遗传相似度在96-97.5％的BC1代单株；所述选择与90110-2遗传相似度在96-97.5％的BC1代单株的方法包括如下步骤：比对BC1代单株的SSR图谱和采用同样的引物扩增90110-2的SSR图谱，计算遗传相似度；所述遗传相似度计算公式：[1-差异等位基因数/(2×比较总位点数)]×100％所述差异等位基因数为用SSR核心引物扩增得到的所述雄性不育BC1代单株SSR谱带带型与所述90110-2的SSR谱带带型不一致的等位基因数目；所述比较总位点数为40。在步骤c)和d)之间，还包括BC2代分子鉴定的步骤，所述BC2代分子鉴定为用引物A对所述雄性不育BC2代群体单株进行PCR扩增，选择扩增图谱与用同样引物A对所述90110-2进行PCR扩增得到的图谱相同的雄性不育BC2代单株；所述引物A为BC2代单株对应的母本BC1代与90110-2相比扩增带型不同的SSR引物；所述核心引物umc2105k3是由序列表中序列9所示的单链DNA分子和序列表中序列10所示的单链DNA分子组成；所述核心引物phi053k2是由序列表中序列11所示的单链DNA分子和序列表中序列12所示的单链DNA分子组成所述核心引物bnlg2291k4是由序列表中序列15所示的单链DNA分子和序列表中序列16所示的单链DNA分子组成；所述核心引物bnlg2305k4是由序列表中序列19所示的单链DNA分子和序列表中序列20所示的单链DNA分子组成；所述核心引物bnlg161k8是由序列表中序列21所示的单链DNA分子和序列表中序列22所示的单链DNA分子组成；所述核心引物umc1545y2是由序列表中序列25所示的单链DNA分子和序列表中序列26所示的单链DNA分子组成；所述核心引物umc1125y3是由序列表中序列27所示的单链DNA分子和序列表中序列28所示的单链DNA分子组成；所述核心引物bnlg240k1是由序列表中序列29所示的单链DNA分子和序列表中序列30所示的单链DNA分子组成；所述核心引物phi065k9是由序列表中序列33所示的单链DNA分子和序列表中序列34所示的单链DNA分子组成；所述核心引物phi96100y1是由序列表中序列45所示的单链DNA分子和序列表中序列46所示的单链DNA分子组成；所述核心引物umc2115k3是由序列表中序列57所示的单链DNA分子和序列表中序列58所示的单链DNA分子组成；所述核心引物umc1429y7是由序列表中序列59所示的单链DNA分子和序列表中序列60所示的单链DNA分子组成；所述核心引物umc2160k3是由序列表中序列65所示的单链DNA分子和序列表中序列66所示的单链DNA分子组成；所述核心引物umc1936k4是由序列表中序列67所示的单链DNA分子和序列表中序列68...

【技术保护点】
一种杂交制种的方法，包括如下步骤：以玉米不育系S 90110‑2为不育系，玉米自交系90110‑2为保持系，玉米自交系京2437为恢复系，进行三系配套制种，得到杂交种京科528。

【技术特征摘要】
1.一种杂交制种的方法，包括如下步骤：以玉米不育系S 90110-2为不育系，玉米自交
系90110-2为保持系，玉米自交系京2437为恢复系，进行三系配套制种，得到杂交种京科
528。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述不育系S 90110-2为按照包括如下步骤的方法转育：
a)玉米不育系S京724做母本，90110-2做父本杂交，得到雄性不育杂交子代F1；
b)以所述雄性不育杂交子代F1为母本、与90110-2回交，得到雄性不育BC1代群体；
c)以所述雄性不育BC1代单株为母本、与90110-2继续回交，得到雄性不育BC2代群体；
d)以所述雄性不育BC2代单株为母本、与90110-2继续回交，得到90110-2的雄性不育
系。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：
在步骤b)和c)之间，还包括BC1代分子鉴定的步骤，所述BC1代分子鉴定为利用40对
SSR核心引物中在S京724和90110-2间存在差异的15对引物umc2105k3、phi053k2、
bnlg2291k4、bnlg2305k4、bnlg161k8、umc1545y2、umc1125y3、bnlg240k1、phi065k9、
phi96100y1、umc2115k3、umc1429y7、umc2160k3、umc1936k4和phi041y6分别对所述雄性
不育BC1代群体单株进行PCR扩增，选择与90110-2遗传相似度在96-97.5％的BC1代单株；
在步骤c)和d)之间，还包括BC2代分子鉴定的步骤，所述BC2代分子鉴定为用引物A
对所述雄性不育BC2代群体单株进行PCR扩增，选择扩增图谱与用所述引物A对所述90110-2
进行PCR扩增得到的图谱相同的雄性不育BC2代单株；
所述引物A为BC2代单株对应的母本BC1代与90110-2相比扩增带型不同的SSR引物；
所述核心引物umc2105k3是由序列表中序列9所示的单链DNA分子和序列表中序列10所
示的单链DNA分子组成；
所述核心引物phi053k2是由序列表中序列11所示的单链DNA分子和序列表中序列12所
示的单链DNA分子组成；
所述核心引物bnlg2291k4是由序列表中序列15所示的单链DNA分子和序列表中序列16
所示的单链DNA分子组成；
所述核心引物bnlg2305k4是由序列表中序列19所示的单链DNA分子和序列表中序列20
所示的单链DNA分子组成；
所述核心引物bnlg161k8是由序列表中序列21所示的单链DNA分子和序列表中序列22
所示的单链DNA分子组成；
所述核心引物umc1545y2是由序列表中序列25所示的单链DNA分子和序列表中序列26
所示的单链DNA分子组成；
所述核心引物umc1125y3是由序列表中序列27所示的单链DNA分子和序列表中序列28
所示的单链DNA分子组成；
所述核心引物bnlg240k1是由序列表中序列29所示的单链DNA分子和序列表中序列30
所示的单链DNA分子组成；
所述核心引物phi065k9是由序列表中序列33所示的单链DNA分子和序列表中序列34所
示的单链DNA分子组成；
所述核心引物phi96100y1是由序列表中序列45所示的单链DNA分子和序列表中序列46
所示的单链DNA分子组成；
所述核心引物umc2115k3是由序列表中序列57所示的单链DNA分子和序列表中序列58
所示的单链DNA分子组成；
所述核心引物umc1429y7是由序列表中序列59所示的单链DNA分子和序列表中序列60
所示的单链DNA分子组成；
所述核心引物umc2160k3是由序列表中序列65所示的单链DNA分子和序列表中序列66
所示的单链DNA分子组成；
所述核心引物umc1936k4是由序列表中序列67所示的单链DNA分子和序列表中序列68
所示的单链DNA分子组成；
所述核心引物phi041y6是由序列表中序列77所示的单链DNA分子和序列表中序列78所
示的单链DNA分子组成。
4.根据权利要求3...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵久然，宋伟，邢锦丰，王元东，段民孝，刘春阁，冯培煜，张如养，王凤格，毛振武，李瑞媛，王乃顺，王文广，张莎莎，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：北京;11