神经调节蛋白用于预防、治疗或延迟心脏缺血再灌注损伤的方法和组合物技术

本发明专利技术涉及神经调节蛋白用于预防、治疗或延迟哺乳动物特别是人缺血再灌注损伤的方法和组合物。本发明专利技术通过大鼠再灌注损伤模型，证明神经调节蛋白可以在缺血再灌注过程中减小梗死面积，提示神经调节蛋白可以用于预防、治疗或延迟心脏缺血再灌注损伤。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及神经调节蛋白在制备用于预防、治疗或延迟哺乳动物特别是人缺血再灌注损伤的药物中的用途。更为特别地，涉及神经调节蛋白用于预防、治疗或延迟心脏缺血再灌注损伤的方法和组合物。
技术介绍
缺血后疏通血管或再造血管使组织得到血液的再灌注，本来是医师们的目的所在，而且事实上在大多数情况下也确能收到良好的治疗效果。但在一定条件下再灌注反而引起更加严重的后果。这不仅见于临床，而且也为不同种属(兔、大鼠、豚鼠、狗、猪等)的大量动物实验所证明。这是一种反常现象，称之为再灌注损伤(ischemia reperfusion injury，IRI)。自从1960年Jennings第一次提出心肌缺血再灌注损伤的概念以来，其已经成为心血管研究的热点问题。心肌持续性缺血导致组织损伤和细胞死亡，早期再灌注能够减轻心肌缺血的损伤程度，但是大量的动物实验和临床观察，再灌注后在改善心肌供血的同时又加重了单纯心肌缺血所造成的损伤，出现心律失常、梗死面积扩大、持久性心室收缩功能低下等状况。IRI的生化特征是在缺血过程中氧气损耗，造成细胞内钙离子浓度上升，之后再灌注过程中会发生再充氧并伴随着活性氧的产生(Piper HM，et al.，Annals of Thoracic Surgery 2003，75：644；Yellon DM，et al.，New England Journal of Medicine 2007，357：1121)。心梗所带来的50％左右的心脏损伤可能是由于再灌注损伤造成的(Yellon DM，et al.，New England Journal of Medicine 2007，357：1121)。病理变化可出现心肌细胞水肿、细胞膜和细胞器膜完整性破坏、肌纤维出现破坏性断裂超微结构的改变、微血管损伤和无再灌注现象等。因此，心肌缺血再灌注损伤成为影响患者缺血/再灌注后心脏结构和功能恢复的主要因素。由于近年医学的发展进步；使缺血再灌注损伤愈益受到重视。例如断肢再植和器官移植就存在缺血肢体和器官的再灌注问题。又如动脉搭桥术后、溶栓疗法之后，休克治疗之后均可能发生缺血与再灌注损伤。缺血再灌注损伤的机制目前仍不是非常明确。可能的机制包括氧自由基的堆积(RuizGinesJA等，J Cardiovasc Pharmacol，2000，35(1)：109-113)，钙离子超载(Shen AC等，Am J Pathol，1972，67(3)：441-452；Sjaastad I等，Acta Physiol Scand，2002，175(4)：261-269)，能量代谢障碍(谷天祥等，中华心血管病杂志，2001，29(7)：420-423；Nordlie MA等，J Cardiovasc Pharmacol Ther，2006，11(1)：17-30)，中性粒细胞的聚集(Hoffman JW等，J Extra Corpor Technol，2004，36(4)：391-411)等等。针对这些机制，可采取的用于防治缺血再灌注损伤的手段包括尽早恢复血流，减少缺血时间；灌注时低压、低流、低温；清除自由基，比如外源性SOD、黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇(allopurinol)、维生素E、维生素C、过氧化氢酶、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)等自由基清除剂；改善缺血组织代谢，比如补充糖酵解底物如磷酸已糖保护缺血组织，外源性ATP恢复细胞膜功能，氢醌、细胞色素C延长缺血组织的可逆性改变期限，添加免疫抑制剂也可降低损伤，如环孢素A，他克莫司，吗替麦考酚酯，另外单克隆抗体如巴利普单抗，赛尼哌、莫罗莫那和皮质类固醇等。尽管有可选择的治疗手段，但是临床结果并不令人满意。因此迫切需要一种新的更加有效的治疗方法和治疗试剂用来预防、治疗或延迟各种缺血带来的缺血再灌注损伤。神经调节蛋白(Neuregulin，NRG；Heregulin，HRG)，属于表皮生长因子样(EGF-like)家族，是一类结构上相似的生长分化因子，包括NRG1、NRG2、NRG3和NRG4以及它们的异构体，行使了一系列的生物学作用：刺激乳腺癌细胞分化和乳蛋白的分泌(Lessor T等.J Cell Biochem.1998；70(4)：587-595)；诱导神经脊细胞分化为Schwann细胞(Topilko P等，Mol Cell Neurosci.1996；8(2-3)：71-75)；刺激骨骼肌细胞内乙酰胆碱受体的合成(Altiok N等，EMBO J.1995；14(17)：4258-4266)；以及促进心肌细胞成活和DNA合成(Zhao YY等，J Biol Chem.1998；273(17)：10261-10269)。用NRG基因严重缺陷的小鼠胚胎做的活体研究证明NRG对于心脏和神经发育是必需的。NRG的受体属于EGF受体家族，包括EGFR，ErbB2，ErbB3和ErbB4，它们在多种细胞功能比如细胞生长、分化和存活中发挥了重要的作用。它们属于络氨酸激酶受体，有胞外的配体结合功能区、跨膜区和胞内的络氨酸激酶功能区组成。当NRG结合到ErbB3或ErbB4的胞外区后，引起其构象改变从而导致ErbB3/ErbB4或ErbB2/ErbB3异二聚体的形成或ErbB4/ErbB4同二聚体的形成，并且引起其C末端的磷酸化。磷酸化的C末端可以进一步结合胞内的下游信号蛋白，激活AKT和(或)ERK信号通路，并最终引起一系列的细胞反应比如刺激或抑制细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡、细胞迁移或细胞黏附。在这些受体中，在心脏组织表达的主要是ErbB2和ErbB4(Zhao YY等，Circ Res.1999；84(12)：1380-1387)。已有的证据表明，NRG-1的EGF样结构域，包含50到64个氨基酸，足以结合并激活受体(Culouscou JM等，J Biol Chem.1995；270(21)：12857-12863)。NRG-1β可以以较高的亲和力结合到ErbB3和ErbB4。而ErbB2可与ErbB3或ErbB4形成异源二聚体，其与配体的亲和力高于ErbB3或ErbB4同源二聚体与配体的亲和力。神经发育学的研究证实交感神经系统的形成需要NRG-1β、ErbB2和ErbB3的信号传导(Britsch S等，Genes Dev.1998；12(12)：1825-1836)。而干扰NRG-1β或ErbB2或ErbB4的表达将由于心脏发育的缺陷引起胚胎死亡(Gassmann M等，Nature.1995；378(6555)：390-394)。最近的研究强调，NRG-1β本文档来自技高网...

【技术保护点】
NRG蛋白或其功能片断在制备药物中的应用，该药物用来预防、治疗或延迟哺乳动物因外科手术或治疗干预措施引起的缺血再灌注损伤，其中所述外科手术或治疗干预措施包括冠状动脉搭桥术、冠状血管成形术、断肢再植术、溶栓治疗、休克疗法和心脏体外循环手术。

【技术特征摘要】
1.NRG蛋白或其功能片断在制备药物中的应用，该药物用来预防、治疗或延
迟哺乳动物因外科手术或治疗干预措施引起的缺血再灌注损伤，其中所述外
科手术或治疗干预措施包括冠状动脉搭桥术、冠状血管成形术、断肢再植术、
溶栓治疗、休克疗法和心脏体外循环手术。
2.权利要求1所述的应用，其中所述的NRG选自NRG-1，NRG-2，NRG-3或
NRG-4。
3.权利要求1所述的应用，其中所述的NRG是NRG-1。
4.权利要求1所述的应用，包括进一步给哺乳动物施用预防或治疗缺血再灌注
损伤的试剂。
5.权利要求4所述的应用，其中所述的预防或治疗试剂选自自由基清除剂，免
疫抑制剂和改善缺血组...

【专利技术属性】
技术研发人员：周明东，
申请(专利权)人：上海泽生科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31