一种肝素钠除色方法技术

本发明专利技术公开了一种肝素钠除色方法，属于肝素钠纯化方法技术领域，其包括以下步骤：（1）用水将肝素钠溶解；（2）用盐酸调节肝素钠溶液的pH；（3）加入亚硫酸钠搅拌反应0.5h；（4）加入质量浓度为1%硅藻土后，过滤并收集滤液；（5）使用氢氧化钠溶液将滤液pH调节至4.0~4.5；（6）加入质量浓度为0.5~0.7%EDTA反应1h；（7）加入2.5%氯化钠固体；（8）保持溶液温度为55~65℃，加入0.8倍乙醇，搅拌0.5h后通入冷却水使温度降温至20~25℃；（9）将步骤（8）得到的混合物静置沉淀，抽去上层废乙醇，对下层沉淀物脱水、干燥得到肝素钠产品。本发明专利技术能有效破坏肝素钠与蛋白杂质以及铁元素之间的金属桥，又不破坏肝素钠结构，对肝素钠的活性破坏小，质量稳定，收率高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，能有效去除肝素钠的颜色，属于肝素钠纯化方法
。
技术介绍
肝素钠是临床上使用最多、最广泛的抗凝剂，在生物体内与蛋白的复合物形式出现。这种复合物没有抗凝血活性，只有将其单独分离出来才能表现出抗凝血活性。肝素钠在生物界分布广泛，存在于高等哺乳动物中，如猪、牛、羊等的肺部组织、肠组织中。常见的肝素钠分离方式有酶解或盐解、醇沉、氧化等，由于肝素的来源以及提取方式，粗品肝素中必然含有大量的核酸及蛋白杂质，较深的颜色。 目前国内肝素钠的生产原料主要为猪小肠，肝素钠的颜色产生与蛋白杂质以及血液中的铁元素有直接关系，这些杂质会与肝素钠形成金属桥，使用普通的除蛋白方式或者直接加入金属络合剂除去效果效果均不明显，导致在精制过程中直接除色的步骤，如普遍采用的高锰酸钾氧化、双氧水氧化或是两者联用的方式，氧化剂的使用量较大，对肝素钠的结构形成了破坏，降低了产品的品质与收率。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种不会影响肝素钠活性、质量稳定，收率高的肝素钠除色方法。 本专利技术采用如下技术方案:，包括以下步骤:(1)用水将肝素钠溶解，最终得到的肝素钠溶液浓度为600(T8000IU/ml；(2)使用盐酸将步骤(I)所得到的肝素钠溶液的pH调至1.(Γ2.5 ；(3)将步骤(2)所得溶液边搅拌边加入亚硫酸钠，搅拌反应0.5h ；(4)向步骤(3)得到的溶液中加入质量浓度为1%硅藻土，过滤并收集滤液； (5)使用氢氧化钠溶液调节步骤(4)所得的滤液，边搅拌边调节，使ρΗ=4.(Γ4.5 ； (6)向步骤(5)得到的溶液中加入质量浓度为0.5^0.796EDTA，反应Ih ； (7)向步骤(6)得到的溶液中加入2.5%氯化钠固体，搅拌使氯化钠固体溶解；(8)将步骤(7)得到的溶液的温度保持55飞5°C，加入0.8倍乙醇，搅拌0.5h后通入冷却水，使所得溶液温度降温至2(T25°C ；(9)将步骤(8)得到的混合物静置沉淀，沉淀后的上层清液为废乙醇、下层沉淀物为含肝素钠的混合物，抽去上层废乙醇，对下层沉淀物脱水、干燥得到肝素钠产品。 步骤(3)中，加入的亚硫酸钠的质量浓度为0.2^1.0%。 步骤(4)中，过滤收集滤液后，用水冲洗硅藻土中的残留效价，将残留效价收集并混合到步骤(4)所收集的滤液中。这样可以达到节约资源的目的。 步骤(6)中，在加入0.5?0.7%EDTA的同时，将溶液加热至55?65 °C，使溶液保持55?65°C反应lh。 本专利技术的有益效果是:本专利技术使用盐酸将肝素钠溶液的pH调节至酸性，既能够使部分杂质变性，起到去除蛋白的效果，又能够为后续去除铁元素创造环境条件。经过前处理的肝素溶液，在亚硫酸钠和金属络合剂EDTA的联用效果下能够很好的去除铁元素，起到了单一加入络合剂无法达到的效果。同时，后续热沉淀的方式很好的分离部分蛋白杂质以及被络合的铁元素，使这些杂质能够与肝素钠分离干净，跟随沉淀上清废液被分离出去，去除颜色效果好。通过本专利技术的方法处理过的肝素钠，除了能够直接降低颜色，同时减少了其中铁离子的影响，减少了后续精制过程中高锰酸钾或者过氧化氢的用量，降低氧化剂对肝素钠结构的破坏，提高了产品品质，提高了产品收率。本专利技术通过调节反应环境，促进金属络合剂发挥作用，有效破坏肝素钠与蛋白杂质以及铁元素之间的金属桥，又不破坏肝素钠结构，然后在去除蛋白杂质与去除铁元素的同时，有效降低后续精制过程中氧化剂的用量，减少肝素钠活性的破坏，稳定质量，提高收率。 【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。 实施例1:本实施例的肝素钠除色方法，包括以下步骤:(1)用水将肝素钠溶解，最终得到的肝素钠溶液浓度为6000IU/ml；(2)使用盐酸将步骤(I)所得到的肝素钠溶液的pH调至2.5 ； (3)将步骤(2)所得溶液边搅拌边加入质量浓度为1.0%亚硫酸钠，搅拌反应0.5h ；(4)向步骤(3)得到的溶液中加入质量浓度为1%硅藻土，过滤并收集滤液，用水冲洗硅藻土中的残留效价，将残留效价收集并混合到所收集的滤液中；(5)使用氢氧化钠溶液调节步骤(4)所得的滤液，边搅拌边调节，使pH=4.0 ；(6)将步骤(5)得到的溶液中加入质量浓度为0.596EDTA，反应lh，在加入EDTA的同时，将溶液加热至55°C，使溶液保持55°C反应Ih ； (7)向步骤(6)得到的溶液中加入2.5%氯化钠固体，搅拌使氯化钠固体溶解；(8)向步骤(7)得到的溶液的温度保持55°C，加入0.8倍乙醇，搅拌0.5h后通入冷却水，使所得溶液温度降温至20°C ；(9)将步骤(8)得到的混合物静置沉淀，沉淀后的上层清液为废乙醇、下层沉淀物为含肝素钠的混合物，抽去上层废乙醇，对下层沉淀物脱水、干燥得到肝素钠产品。 对本实施例得到肝素钠产品的结果进行分析:对肝素钠颜色降低的百分比以及静置过程中高锰酸钾使用量的减少比例进行测试。 经过紫外分光光度计检测0D400nm的数值，通过此项指标显示颜色去除率，检测得本次实施例的方法颜色去除率为30%。 将使用本专利技术处理过的产品，使用高锰酸钾氧化除色，使用紫外分光光度计检测0D400nm的数值,通过此项指标显示颜色指标，结果显示在使颜色达标的基础上，高猛酸钾用量降低了 55%。 实施例2:本实施例的肝素钠除色方法，包括以下步骤:(I)用水将肝素钠溶解，最终得到的肝素钠溶液浓度为8000IU/ml ； (2)使用盐酸将步骤(I)所得到的肝素钠溶液的pH调至1.0 ； (3)将步骤(2)所得溶液边搅拌边加入质量浓度为0.2%亚硫酸钠，搅拌反应0.5h ；(4)向步骤(3)得到的溶液中加入质量浓度为1%硅藻土，过滤并收集滤液，用水冲洗硅藻土中的残留效价，将残留效价收集并混合到所收集的滤液中；(5)使用氢氧化钠溶液调节步骤(4)所得的滤液，边搅拌边调节，使pH=4.5 ；(6)将步骤(5)得到的溶液中加入质量浓度为0.796EDTA，反应lh，在加入EDTA的同时，将溶液加热至65°C，使溶液保持65°C反应Ih ； (7)将步骤(6)得到的溶液中加入2.5%氯化钠固体，搅拌使氯化钠固体溶解；(8)将步骤(7)得到的溶液的温度保持65°C，加入0.8倍乙醇，搅拌0.5h后通入冷却水，使所得溶液温度降温至25°C ；(9)将步骤(8)得到的混合物静置沉淀，沉淀后的上层清液为废乙醇、下层沉淀物为含肝素钠的混合物，抽去上层废乙醇，对下层沉淀物脱水、干燥得到肝素钠产品。 对本实施例得到肝素钠产品的结果进行分析:对肝素钠颜色降低的百分比以及静置过程中高锰酸钾使用量的减少比例进行测试。经过紫外分光光度计检测0D400nm的数值，通过此项指标显示颜色去除率，检测得本次试验颜色去除率为38%。 将使用本专利技术处理过的产品，使用高锰酸钾氧化除色，使用紫外分光光度计检测0D400nm的数值,通过此项指标显示颜色指标，结果显示在使颜色达标的基础上，高猛酸钾用量降低了 61%。 本专利技术使用盐酸将肝素钠溶液的pH调节至酸性，既能够使部分杂质变性，起到去除蛋白的效果，又能够为后续去除铁元素创造环境条件。经过前处理的肝素溶液，在亚硫酸钠和金属络合剂EDTA本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肝素钠除色方法，其特征在于，其包括以下步骤：（1）用水将肝素钠溶解，最终得到的肝素钠溶液浓度为6000~8000IU/ml；（2）使用盐酸将步骤（1）所得到的肝素钠溶液的pH调至1.0~2.5；（3）将步骤（2）所得溶液边搅拌边加入亚硫酸钠，搅拌反应0.5h；（4）向步骤（3）得到的溶液中加入质量浓度为1%硅藻土，过滤并收集滤液；（5）使用氢氧化钠溶液调节步骤（4）所得的滤液，边搅拌边调节，使pH=4.0~4.5；（6）向步骤（5）得到的溶液中加入质量浓度为0.5~0.7%EDTA，反应1h；（7）向步骤（6）得到的溶液中加入2.5%氯化钠固体，搅拌使氯化钠固体溶解；（8）将步骤（7）得到的溶液的温度保持55~65℃，加入0.8倍乙醇，搅拌0.5h后通入冷却水，使所得溶液温度降温至20~25℃；（9）将步骤（8）得到的混合物静置沉淀，沉淀后的上层清液为废乙醇、下层沉淀物为含肝素钠的混合物，抽去上层废乙醇，对下层沉淀物脱水、干燥得到肝素钠产品。

【技术特征摘要】
1.一种肝素钠除色方法，其特征在于，其包括以下步骤: (1)用水将肝素钠溶解，最终得到的肝素钠溶液浓度为600(T8000IU/ml； (2)使用盐酸将步骤(I)所得到的肝素钠溶液的pH调至1.(Γ2.5 ； (3)将步骤(2)所得溶液边搅拌边加入亚硫酸钠，搅拌反应0.5h ； (4)向步骤(3)得到的溶液中加入质量浓度为1%硅藻土，过滤并收集滤液；(5)使用氢氧化钠溶液调节步骤(4)所得的滤液，边搅拌边调节，使ρΗ=4.(Γ4.5 ； (6)向步骤(5)得到的溶液中加入质量浓度为0.5^0.796EDTA，反应Ih ； (7)向步骤(6)得到的溶液中加入2.5%氯化钠固体，搅拌使氯化钠固体溶解； (8)将步骤(7)得到的溶液的温度保持55飞5°C，加...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐咏群，黄锡伟，王春华，高原，刘友来，
申请(专利权)人：南京健友生化制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32