成纤维细胞生长因子21蛋白制造技术

本发明专利技术涉及药理学有效的和稳定的人成纤维细胞生长因子21(FGF21)的蛋白质，含有FGF21蛋白的药物组合物，以及使用这类蛋白质治疗2型糖尿病、肥胖、异常脂血症和/或代谢综合征的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】成纤维细胞生长因子21蛋白 本专利技术涉及成纤维细胞生长因子21(FGF21)蛋白质，含有FGF21蛋白的药物组合 物，以及用于治疗2型糖尿病、肥胖、异常脂血症和/或代谢综合征的方法。 FGF21是一种激素，其作为葡萄糖和脂质内稳态的重要代谢调节物发挥作用。通过 上调GLUT1表达，FGF21促进脂肪细胞中的葡萄糖摄取，其机制不同于胰岛素。在糖尿病啮 齿动物和猴子中，人FGF21降低葡萄糖空腹血清浓度，并降低甘油三酯、胰岛素和胰高血糖 素的空腹血清浓度。此外，在饮食诱导的肥胖啮齿类动物模型中，施用FGF21导致累计体重 呈剂量依赖性丧失。因此，FGF21具有用于治疗糖尿病、肥胖、异常脂血症、代谢综合征的潜 在效用。 在 TO2010/042747、W02010/285131 和 W02009/149171 中已经描述了 FGF21 蛋白。 与人野生型FGF21和已知的FGF21蛋白相关的问题是分子的短的体内半寿期、低 的效力和/或药物不稳定性。因此，仍然需要一种长期作用的、有效和/或稳定的替代性 FGF21蛋白。 本专利技术提供了替代性的FGF21蛋白。本专利技术的某些FGF21蛋白具有人野生型FGF21 和本领域公开的已知的FGF21蛋白没有的优点。这些优点包括具有延长的半寿期、改善的 效力和/或改善的药物稳定性。除改善的效力外，本专利技术的某些FGF21蛋白具有一种或多 种有利的稳定性特征，这些特征对作为治疗性蛋白质的有效制备和/或配制是有用的，包 括在体内降低的蛋白质水解降解、降低的对氧化的易感性、减少的在高浓度聚集的倾向、降 低的在哺乳动物细胞系统中生产期间的翻译后修饰和蛋白水解水平、和/或改善的化学稳 定性。另外，本专利技术的FGF21蛋白对2型糖尿病、肥胖、异常脂血症和/或代谢综合征的治 疗具有潜在的作用。 本专利技术提供了 FGF21蛋白，其中氨基酸序列由与第二多肽融合的第一多肽组成， 其中第一多肽包含IgG4 Fc部分，其中Fc部分由抗体的铰链区、CH2和CH3恒定区结构域组 成，第二多肽包含具有SEQ ID N0:1的氨基酸序列的FGF21蛋白，且其中第一多肽的C-末 端通过接头与第二多肽的N-末端融合。 此外，本专利技术提供了这样的FGF21蛋白，其中氨基酸序列由与第二多肽融合的第 一多肽组成，其中第一多肽包含具有SEQ ID N0 :14的氨基酸序列的IgG4 Fc部分，第二多 肽包含具有SEQ ID N0:1的氨基酸序列的FGF21蛋白，且其中第一多肽的C-末端通过接头 与第二多肽的N-末端融合。 本专利技术还提供了这样的FGF21蛋白，其中氨基酸序列由与第二多肽融合的第一多 肽组成，其中第一多肽包含具有SEQ ID N0:14的氨基酸序列的IgG4 Fc部分，第二多肽包 含具有SEQ ID N0 :1的氨基酸序列的FGF21蛋白，且其中第一多肽的C-末端通过具有SEQ ID N0 :11的氨基酸序列的接头与第二多肽的N-末端融合。 本专利技术提供了这样的FGF21蛋白，其中氨基酸序列是 ESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLS lslgGGGCSGGOGSGGGGSAhpipdsspllqfggqvrqrylytddaqqtechleiredgtvgcmd QSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFREDLKEDGYNVYQSEAHGLPLHLP⑶KSPHRKPAPRGPARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLRLVEPSQLRSPSFE(SEQIDNO：5). 上述3￡〇10勵：5的？6?21蛋白包括3￡〇10勵：14的1864?(：部分，表示为粗体 的SEQIDNO:11的接头序列，下划线的SEQIDNO:1的FGF21蛋白。 此外，本专利技术提供了这样的FGF21蛋白，其中氨基酸序列是 ESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNA KTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVS LTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSL SLSLGGGGGSGGGGSGGGGSAHPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTECHLEIREDGTVGCAADQSPESLLQLK ALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFREXiU^EDGYNVYQSEAHGLPLHLP⑶KSPHRKPAPRG PARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLRLVEPSQLX3SPSFX4X5(SEQIDNO：15) 其中乂:是匕或0，\是1或1(，&是1?或1，乂4是1或E，且\是6或空缺。本专利技术 还提供了SEQIDN0:15的FGF21蛋白，其中父1是0，&是1或1(，&是1，父4是L，且&是6。 此外，本专利技术还提供了SEQIDN0:15的FGF21蛋白，其中乂1是1或0，&是1或1(，&是1?， 父 4是￡，且X5空缺。 本专利技术提供了SEQIDN0 :15的FGF21蛋白，其中FGF21蛋白选自SEQIDN0 :5、 SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8 和SEQIDNO:9。本专利技术还提供了SEQIDNO: 15的FGF21蛋白，其中FGF21蛋白选自SEQIDN0:8和SEQIDN0:9。此外，本专利技术提供了 SEQIDNO:15 的FGF21 蛋白，其中FGF21 蛋白选自SEQIDNO:5、SEQIDNO:6 和SEQID N0:7。最优选的FGF21蛋白是SEQIDN0:5。 本专利技术还提供了药物组合物，其包含本专利技术的FGF21蛋白、和至少一种可药用的 载体、稀释剂或赋形剂。 本专利技术还提供了治疗患者2型糖尿病、肥胖、异常脂血症和/或代谢综合征的方 法，包括向所述患者施用本专利技术的FGF21蛋白。 本专利技术还提供了治疗患者2型糖尿病、肥胖、异常脂血症和/或代谢综合征的方 法，包括向所述患者施用本专利技术的药物组合物。 进一步地，本专利技术提供了本专利技术的FGF21蛋白用于治疗。优选地，本专利技术提供了本 专利技术的FGF21蛋白用于治疗2型糖尿病、肥胖、异常脂血症和/或代谢综合征。 进一步地，本专利技术提供了本专利技术的FGF21蛋白在制备用于治疗2型糖尿病、肥胖、 异常脂血症和/或代谢综合征的药物中的用途。 本专利技术还本文档来自技高网...

【技术保护点】
成纤维细胞生长因子21(FGF21)蛋白的同源二聚体，其中氨基酸序列由与第二多肽融合的第一多肽组成，其中第一多肽包含IgG4Fc部分，第二多肽包含具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的FGF21蛋白质，且其中第一多肽的C‑末端通过接头与第二多肽的N‑末端融合。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.06.11 US 61/658,104;2013.03.12 US 61/777,3861. 成纤维细胞生长因子21 (FGF21)蛋白的同源二聚体，其中氨基酸序列由与第二多肽 融合的第一多肽组成，其中第一多肽包含IgG4Fc部分，第二多肽包含具有SEQ ID N0:1的 氨基酸序列的FGF21蛋白质，且其中第一多肽的C-末端通过接头与第二多肽的N-末端融 合。2. 权利要求1的同源二聚体，其中IgG4Fc部分的氨基酸序列是SEQ ID NO :14。3. 权利要求1或2的同源二聚体，其中接头的氨基酸序列是SEQ ID NO : 11。4. 权利要求1至3中任一项的同源二聚体，其中氨基酸序列是 ESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTK PREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTC LVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGGGGGSGGGGSGGGGSAHPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTECHLEIREDGTVGCAADQSPESLLQLKALK PGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYG...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·J·达林，C·D·迪金森，D·A·德赖弗，M·D·贡西亚茨，
申请(专利权)人：伊莱利利公司，
类型：发明
国别省市：美国;US