包含至少一种透明质酸及至少一种蔗糖八硫酸酯水溶性盐的在水性介质中的组合物制造技术

本发明专利技术涉及包含至少一种任选交联的透明质酸或其一种盐，以及至少一种蔗糖八硫酸酯水溶性盐的组合物；还涉及生产所述组合物的方法，以及所述组合物在配制粘弹性补充组合物、在配制填充皱纹的组合物或在配制化妆品组合物中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
透明质酸在美容领域中已被使用超过15年，其中其已被证明是无害且有效的。目前，基于源自生物发酵的交联透明质酸的凝胶是美容填充凝胶市场中或作为填充剂最广泛使用的产品。的确，在美容领域中，非再吸收性植入物使用得越来越少并且基于其他多糖的凝胶已被摒弃，因为副作用或因为其动物源性，导致病毒污染的风险。源自生物发酵的透明质酸在例如填充皱纹(comblement de rides)、粘弹性补充(viscosupplémentation)、眼科治疗或尿失禁治疗等领域中的使用全部得到更加地认可与青睐，这是因为其天然存在于人体中，特别是天然存在于真皮、滑液和角膜中，使得由于副作用导致的风险降至最低。尽管如此，归因于透明质酸天然存在于人体中的事实，存在能分解透明质酸的内源性酶，例如透明质酸酶。这种分解作用阐述于Locono等，J.Ped.Surg.，1988年，第4期，第33卷，第564-567页中，其涉及伤口愈合。透明质酸酶是一种通过催化透明质酸水解以得到透明质酸的低聚糖而分解透明质酸的酶。这种分解具有降低透明质酸粘性的效果。这种粘性降低无可挽回地导致在填充皱纹或粘弹性补充领域的期望效果随时间降低，导致缩短了每次注射间隔的时间以恢复其效果，容易导致患者的不适或疼痛。解决该问题的第一种解决方案可以是用其他多糖替代透明质酸，所述多糖对透明质酸酶较不敏感且天然存在于人体中。在胞外基质(ECM)的组分多糖中，硫酸软骨素、硫酸皮肤素及硫酸角质素可为有利的。这是因为它们与透明质酸一起部分造成皮肤的保湿与柔顺，并且它们天然存在于真皮中使得能够预见其对于作为填充皱纹的产品、对于补水或对于粘弹性补充的优异的耐受性和有效性。令人遗憾的是，硫酸软骨素是动物源性的，迄今为止，通过生物发酵途径合成硫酸软骨素的任何尝试均不可生产出适应于工业开发的量。这同样适用于硫酸皮肤素及硫酸角质素，其仅可在工业上作为动物来源产品而获得。目标在于减少通过透明质酸酶对透明质酸分解的另一种解决方案是提供包含与透明质酸组合的具备透明质酸酶抑制性能的化合物的组合物。在文献中已知硫酸酯基团的抗氧化及抗自由基性质，以及高保湿能力和抗透明质酸酶活性。关于硫酸酯基团的抗氧化及抗自由基性质，它们保护糖胺聚糖(GAG)免受活性氧物质的解聚，如Moseley R等在Biochim.Biophys.Acta.，(1995)，1244(2-3)，第245-52页中所述的。关于硫酸酯基团的高保湿能力，例如R.Servaty等在International Journal of Biological Macromolecules，(2001)，28，第121-127页中证明：相比于透明质酸，硫酸软骨素所具有更强的水分子吸收能力是由于存在硫酸软骨素所具有的硫酸酯基团所导致。关于硫酸酯基团的抗透明质酸酶活性，已知硫酸化多糖、更特别是全部O-硫酸化糖胺聚糖具有高的抗透明质酸酶活性，这例如从T.Toida等，Archives of Biochemistry and Biophysics，1999年，第370(2)期，第176-182页中可知。该出版物中所述的全部O-硫酸化糖胺聚糖为硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸肝素及硫酸化透明质酸。所获得的结果显示：所有的全部O-硫酸化糖胺聚糖都以剂量依赖性的方式抑制透明质酸酶，并且在已测试的全部O-硫酸化糖胺聚糖中，全部O-硫酸化透明质酸是最佳的透明质酸酶抑制剂。全部O-硫酸化透明质酸的缺点是其不能交联。尽管如此，在美容领域中，超过80％的组合物基于交联透明质酸；因此，不可能开发基于非交联透明质酸的填充剂产品。可以设想将少量的动物源性硫酸化多糖并入基于透明质酸的组合物中；例如，Hermida名下的专利申请WO 03/041724描述了基于透明质酸钠及硫酸软骨素的混合物的无菌注射组合物意在用于关节内用途。同样，在Marcum名下的专利申请WO 2004/034980中，描述了基于透明质酸、硫酸软骨素及N-乙酰葡糖胺的注射组合物，其用于通过关节内注射进行软骨再生。这种组合物的缺点仍然是硫酸软骨素的动物源性。关于人工合成的硫酸化多糖，硫酸葡聚糖抑制透明质酸组合物中透明质酸酶的试验也已例如描述于K.Zimmermann的J.Cancer Res.Clin.Oncol.，1983年，第105期，第189-190页中。根据纳尔逊(Nelson)法测定了如下组合物中透明质酸的水解，所述组合物包含透明质酸、透明质酸酶及不同浓度的分子量为17.7kDa的硫酸葡聚糖。硫酸葡聚糖被描述为透明质酸酶的强力抑制剂，并且如果分子量为17.7kDa的硫酸葡聚糖的活性剂量远低于毒性剂量，则毒性随分子量增大而升高，并且仅一些高分子量的分子才显著升高毒性，正如Walton，Br.在J.Pharmacol.，1954年，第9期，第1-14页中所证实的。另外，硫酸葡聚糖还被描述为可用于体内和体外试验的抗凝剂，正如例如在US2715091中所述，并且这些抗凝性质与作为可植入组合物的组分的用途本来就不兼容。在植物源性的硫酸化多糖中，角叉菜聚糖是已知的，但已知这些多糖会引起炎症反应，以致用于测试抗炎性的模型都基于这些多糖的性质。另外，Depuy名下的WO03/000191公开了用于治疗关节炎的包含透明质酸及透明质酸酶抑制剂(例如硫酸化多糖)的组合物，所述硫酸化多糖例如硫酸葡聚糖、硫酸木糖或硫酸乙酰肝素，这些多糖组分的一部分包覆在脂质体中以确保其扩散受控，但在特别意在交联的组合物中使用脂质体令人难以想象。因此，可用作透明质酸添加剂(以降低透明质酸酶活性)的大多数多糖是动物源性的或者显示潜在毒性，这两个条件都与所设想的用途不相容。从理论角度而言，可设想以硫酸根离子的形式引入硫酸盐溶液；尽管如此，它们在所注入组织中的扩散会太快，事实上甚至是立即扩散，因此，对于填充皱纹或粘弹性补充领域中组合物的抗透明质酸酶的性质而言是无效的。因此，优选选择通过硫酸酯基团官能化的化合物。另一种潜在的解决方案是使用属于硫酸化单糖和硫酸化寡糖类别的硫酸化化合物。该类别的硫酸化单糖或寡糖(由1至10个单糖单元形成)令人关注，因为它们会容易地通过合成制得，还因为它们的糖类结构仍然与胞外基质的组分糖胺聚糖的糖类结构近似，它们可以很好地被代谢，同时产生无毒的分解产物。例如，对透明质酸酶有活性的低聚半乳糖已被描述于已发本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在水性介质中的灭菌组合物，所述灭菌组合物包含至少一种透明质酸及至少一种蔗糖八硫酸酯水溶性盐，其特征在于：所述组合物是物理混合物，并且透明质酸的含量[HA]与蔗糖八硫酸酯水溶性盐的含量[SOS]按重量计的比率[HA]/[SOS]大于或等于0.1。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.06.13 FR 1255543;2012.06.13 US 61/659,1401.一种在水性介质中的灭菌组合物，所述灭菌组合物包含至少一种
透明质酸及至少一种蔗糖八硫酸酯水溶性盐，其特征在于：所述组合物是
物理混合物，并且透明质酸的含量[HA]与蔗糖八硫酸酯水溶性盐的含量
[SOS]按重量计的比率[HA]/[SOS]大于或等于0.1。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：当对所述组合物进
行质子1H NMR光谱分析时，所述蔗糖八硫酸酯水溶性盐的端基质子的
化学位移值，与单独处于溶液中的所述蔗糖八硫酸酯水溶性盐的端基质子
的化学位移值相等。
3.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于：透明质
酸的含量[HA]与蔗糖八硫酸酯水溶性盐的含量[SOS]按重量计的比率
[HA]/[SOS]为0.1至5000。
4.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于：所述透
明质酸的分子量Mw为0.01MDa至5MDa。
5.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于：透明质
酸相对于组合物的含量为2mg/g至50mg/g。
6.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于：透明质
酸相对于组合物的含量为4mg/g至40mg/g。
7.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于：所述组
合物包含至少一种非交联透明质酸。
8.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于：所述组
合物额外地包含至少一种交联透明质酸。
9.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于：所述交联透明质酸
显示0.001至0.5的交联度X。
10.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于：所述组
合物包含被赋予亲脂性或保湿性的基团取代的至少一种透明质酸。
11.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于：所述组
合物额外地包含另一种多糖。
12.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于：所述蔗
糖八硫酸酯水溶性盐选自碱金属盐、碱土金属盐、银盐、铵盐及氨基酸盐。
13.根据权利要求12所述的组合物，其特征在于：所述蔗糖八硫酸
酯水溶性盐选自所述碱金属盐和所述碱土金属盐。
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【专利技术属性】
技术研发人员：埃斯特尔·皮龙，热雷米·邦贝唐，
申请(专利权)人：实验室维维西公司，
类型：发明
国别省市：法国;FR