用于调节TOSO活性的方法和组合物技术

本发明专利技术进一步涉及用于调节Toso蛋白的活性的方法和组合物。本发明专利技术进一步涵盖使用包括可溶性Toso蛋白的组合物治疗与炎症、自身免疫性病症和癌症相关的病症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于调节TOSO活性的方法和组合物 相关申请的交叉引用 本申请要求2012年3月16提交的美国临时申请号61/612, 183、2012年5月 11日提交的美国临时申请号61/646, 143和2012年11月29日提交的美国临时申请号 61/731，428的优先权的权益，所述临时申请的内容出于所有目的以引用的方式整体明确地 并入本文。 专利技术背景 Toso或Faim3 (Fas细胞凋亡诱导分子3)是最初通过Jurkat细胞（一种T细 胞白血病家系）中的逆转录病毒过量表达筛选而表征的单个跨膜细胞表面受体，其作为 Fas-诱导的细胞凋亡性细胞死亡的介体（Hitoshi，Y.等人，Toso, a cell surface, specific regulator of Fas-induced apoptosis in T cells. Immunity,1998. 8(4) :p. 461-71)。后 续研究已经表明Toso是IgM的难以捉摸的受体。Toso的表达还似乎与慢性淋巴细胞性白 血病或CLL的特别侵袭性的形式相关。 需要表征Toso的体内作用以便鉴别其作为治疗靶标和用于包含能够结合Toso和 /或调节其活性的药剂的组合物的用途。 专利技术概述 因此，本专利技术提供用于调节Toso活性和治疗与Toso有关的疾病和病症的方法和 组合物。 -方面，本专利技术提供一种治疗受试者中的自身免疫性病症的方法，所述方法包括 用含有治疗有效量的可溶性Toso蛋白的组合物治疗所述受试者的步骤。在示例性实施方 案中，自身免疫性病症是但不限于类风湿性关节炎、多发性硬化症、狼疮或I型糖尿病。 另一方面，本专利技术提供一种治疗受试者中的II型糖尿病的方法，所述方法包括用 包含治疗有效量的可溶性Toso蛋白的组合物治疗所述受试者的步骤。 一方面，本专利技术提供一种治疗受试者中的哮喘的方法，所述方法包括用包含治疗 有效量的可溶性Toso蛋白的组合物治疗所述受试者的步骤。 另一方面，本专利技术提供通过向受试者施用具有SEQ ID N0 :5或6的氨基酸序列或 其片段或缺失变体的可溶性多肽来治疗所述受试者中的糖尿病、哮喘、多发性硬化症或类 风湿性关节炎的方法。在其它实施方案中，受试者中的Toso活性在受试者中被降低。在仍 然其它实施方案中，本专利技术提供通过施用包含SEQ ID N0. 1-25中的任何一个或多个的氨基 酸序列的可溶性多肽来治疗受试者中的糖尿病、哮喘、多发性硬化症或类风湿性关节炎的 方法。 另一方面，本专利技术提供治疗受:试者中的癌症、过敏症、C0PD、_ IgM综合征、狼疮或 中性白细胞增多症相关的病症的方法，所述方法包括用包含治疗有效量的可溶性Toso蛋 白的组合物治疗所述受试者的步骤。 在其它实施方案中并且根据上述中的任一项，本专利技术的可溶性Toso蛋白包括 NP_005440. 1 (人Toso同种型a)的氨基酸残基氨基酸P21至G251 (参见Shima等人，Int. Immunol.，2010,其特此出于所有目的并且特别是出于涉及Toso的胞外结构域的所有教导 的目的而整体并入）。 在仍然其它实施方案中并且根据上述中的任一项，本专利技术的可溶性Toso蛋白包 括人Toso蛋白的胞外结构域。在其它实施方案中，本专利技术中使用的可溶性Toso蛋白包括 SEQ ID N0 :7的氨基酸残基18-253。 在仍然其它实施方案中并且根据上述中的任一项，用于本专利技术的方法中的可溶性 Toso蛋白包含根据SEQ ID N0 :5或6的氨基酸序列。在又其它实施方案中，可溶性Toso蛋 白包含与SEQ ID N0 :5或6具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。在又其它实施方案 中，本专利技术的可溶性Toso蛋白包括SEQ ID N0:5或6的缺失变体。在仍然其它实施方案中 并且根据上述中的任一项，用于本专利技术的方法中的可溶性Toso蛋白包含SEQ ID N0. 1-25 中的任何一个或多个的氨基酸序列。 在其它实施方案中并且根据上述中的任一项，本专利技术的可溶性Toso蛋白是多聚 体。在仍然其它实施方案中，所述多聚体由6个单体组成。在仍然其它实施方案中，多聚体 Toso蛋白的每个单体包含根据SEQ ID N0 :6的序列。 另一方面，本专利技术提供用于抑制Toso活性的方法，所述方法包括将可溶性Toso多 肽应用至包含膜结合Toso受体的细胞。 在仍然另一方面，本专利技术提供一种包括SEQ ID N0 :5或SEQ ID N0 :6的多肽的组 合物。在一个实施方案中，所述组合物抑制Toso活性。在另一实施方案中，所述多肽是多 聚体。在仍然另一实施方案中，所述多聚体包括6个单体，其中每个单体包含根据SEQ ID NO :6的序列。 在另一实施方案中，本专利技术提供一种编码根据本文所描述的任何蛋白质的可溶性 Toso蛋白的分离的核酸。在仍然另一实施方案中，本专利技术提供一种表达编码根据本文所描 述的任何蛋白质的可溶性Toso蛋白的分离的核酸的宿主细胞。 另一方面，本专利技术提供一种包含人Toso蛋白的胞外结构域、Fc区和多聚化标签的 融合蛋白。在另一实施方案中，所述胞外结构域包含人Toso蛋白的氨基酸21-251。在仍然 另一实施方案中，所述多聚化标签包含SEQ ID N0 :4。在又另一实施方案中，Fc区包含SEQ ID N0 :3。 在另一实施方案中，本专利技术提供一种编码上述融合蛋白的分离的核酸。在仍然另 一实施方案中，本专利技术提供一种包含编码上述融合蛋白的核酸的宿主细胞。 另一方面，本专利技术提供一种分离的可溶性多肽，所述多肽包含与SEQ ID N0. 8-24 或与包含SEQ ID NO :7的氨基酸残基18-251的多肽区具有至少90%序列同一性的氨基酸 序列。 另一方面，本专利技术提供用于产生编码本文所描述的任何可溶性Toso蛋白的多肽 的方法，所述方法包括提供包含编码所述多肽的核酸的细胞，将所述细胞在适于表达所述 多肽的条件下进行培养。在其它实施方案中，本专利技术提供一种编码本文所描述的任何可溶 性Toso蛋白的核酸。 附图简述 图1示出与T〇S〇+小鼠中的炎症有关的数据。图1A示出使用数字测径器如通过 踝关节厚度的变化测量的关节炎症的量度。图1B示出基于可见肿胀和活动性的每个关节 的疾病严重程度得分。图1C示出引流淋巴结中的淋巴细胞群体的流式细胞术分析。 图2示出来自关于T〇S〇f小鼠和野生型小鼠的OVA诱导的哮喘模型的数据。图 2A示出哮喘模型的诱导的示意性图解。图2B示出如通过DifQuik染色评定的关于嗜酸性 粒细胞迁移至支气管肺泡空间中的数据。图2C示出通过对每个载玻片至少200个白细胞 进行计数量化的关于嗜酸性粒细胞的数据。 图3A-C示出如通过ELISA评定的关于BALF中0VA诱导的TH2细胞因子IL-4、IL-5 和IL-13的数据。图3D示出关于BALF中的嗜酸性细胞活化趋化因子（Eotaxin)( -种嗜 酸性粒细胞虏获C-C趋化因子）的数据。图3E示出响应于平滑肌细胞中的TNF a治疗产 生的嗜酸性细胞活化趋化因子的水平。 图4示出关于Toso+小鼠中的IgE的数据。图4A和B示出Toso+小鼠中的总 IgE水平和特异性IgE水平，并且图4C示出野生型小鼠与TOS本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗受试者中的自身免疫性病症的方法，所述方法包括用包含治疗有效量的可溶性Toso蛋白的组合物治疗所述受试者。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.03.16 US 61/612183;2012.05.11 US 61/646143;201. 一种治疗受试者中的自身免疫性病症的方法，所述方法包括用包含治疗有效量的可 溶性Toso蛋白的组合物治疗所述受试者。2. 如权利要求1所述的方法，其中所述可溶性Toso蛋白包含SEQ ID NO :7的氨基酸 残基 18-253。3. 如权利要求1所述的方法，其中所述可溶性Toso蛋白包含根据SEQ ID NO :5或6的 氨基酸序列。4. 如权利要求1所述的方法，其中所述可溶性Toso蛋白包含与SEQ ID NO :5或6具 有至少90 %序列同一性的氨基酸序列。5. 如权利要求1至4所述的方法，其中所述可溶性Toso蛋白是多聚体。6. 如权利要求5所述的方法，其中所述多聚体包含6个单体，其中每个单体包含根据 SEQ ID NO :6 的序列。7. 如权利要求1至6所述的方法，其中所述自身免疫性病症是选自类风湿性关节炎、多 发性硬化症、狼疮和I型糖尿病的成员。8. -种治疗受试者中的II型糖尿病或哮喘的方法，所述方法包括用包含治疗有效量 的可溶性Toso蛋白的组合物治疗所述受试者。9. 如权利要求8所述的方法，其中所述可溶性Toso蛋白包含SEQ ID NO :7的氨基酸 残基 18-253。10. 如权利要求8所述的方法，其中所述可溶性Toso蛋白包含根据SEQ ID NO :5或6 的氨基酸序列。11. 如权利要求8所述的方法，其中所述可溶性Toso蛋白包含与SEQ ID NO :5或6具 有至少90 %序列同一性的氨基酸序列。12. 如权利要求8-11所述的方法，其中所述可溶性Toso蛋白是多聚体。13. 如权利要求12所述的方法，其中所述多聚体包含6个单体，其中每个单体包含根据 SEQ ID NO :6 的序列。14. 一种治疗受试者中的1型糖尿病、2型糖尿病、哮喘、多发性硬化症或类风湿性关节 炎的方法，所述方法包括向所述受试者施用具有SEQ ID NO :5或6的氨基酸序列或其片段 或缺失变体的可溶性多肽。15. 如权利要求14所述的方法，其中所述受试者中的Toso活性被降低。16. 如权利要求14-15所述的方法，其中所述可溶性多肽包含SEQ ID NO :5或6的缺 失变体。17. 如权利要求16所述的方法，其中所述缺失变体包含选自：SEQ ID NO. 9-24的成员。18. -种治疗受试者中的癌症、过敏症、C0PD、高-IgM综合征或中性白细胞增多症相关 的病症的方法，所述方法包括用包含治疗有效量的可溶性Toso蛋白的组合物治疗所述受 试者。19. 如权利要求18所述的方法，其中所述可溶性Toso蛋白包含SEQ ID NO :7的氨基 酸残基18-253。20. 如权利要求18所述的方法，其中所述可溶性Toso蛋白包含根据SEQ ID NO :5或6 的氨基酸序列。21. 如权利要求18所述的方法，其中所述可溶性Toso蛋白包含与SEQ ID NO :5或6具 有至少90%序列同一性的氨基酸序...

【专利技术属性】
技术研发人员：MW图舍，TW马克，PS奧哈施，P朗，K朗，D布伦纳，G林，
申请(专利权)人：大学保健网络，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA