用免疫层析技术检测小分子有机化合物的试纸条和方法技术

技术编号:11041911 阅读:129 留言:0更新日期:2015-02-12 05:00
本发明专利技术涉及用免疫层析技术检测小分子有机化合物的试纸条和方法,具体的,公开了一种用免疫层析技术检测小分子有机化合物的试纸条,包括:含光致发光微球标记的小分子有机化合物检测抗体的标记物垫、含小分子有机化合物抗原的捕获膜。本发明专利技术还公开了一种用免疫层析技术检测小分子有机化合物的方法,包括:将含小分子有机化合物的溶液滴加到前述试纸条的样品垫上,反应一段时间后用检测仪检测光信号。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及纳米材料技术、免疫学技术、侧流层析技术等领域。更具体的,本专利技术涉及一种用免疫层析技术检测小分子有机化合物的试纸条;此外,本专利技术还涉及一种用免疫层析技术来检测小分子有机化合物的方法。
技术介绍
由于动物饲料中常含三聚氰胺,各种瘦肉精如盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等,各种抗生素如氯霉素、链霉素、四环素、青霉素、红霉素等,各种类固醇激素如己烯雌酚、甲孕酮、雌二醇、甲睾酮等,以及真菌毒素如黄曲霉毒素(主要有BI和Ml两类)、玉米赤霉烯酮等小分子有机化合物,所以动物奶、动物肉或内脏都有可能含这些小分子有机化合物,人食用这些动物奶、动物肉或动物内脏后就会对人体产生危害。三聚氰胺在体内积累到一定量后,会引起肾结石甚至肾衰竭,严重危害身体健康,对婴幼儿的危害尤其严重。瘦肉精如盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇属于b-兴奋剂,在人体内积累到一定量后会损伤心血管系统。而抗生素在人体的积累则会导致抗生素耐药性,链霉素、庆大霉素还会损害听力。类固醇激素中的雌激素、孕激素或雄激素在体内积累会影响青少年的性发育,在育龄妇女体内积累甚至会影响下一代的性发育。食物中含真菌毒素如黄曲霉毒素或玉米赤霉烯酮会使人致癌或不孕、流产。此外,可卡因、海洛因、吗啡、氯胺酮及美沙酮等毒品小分子有机化合物也严重危害人类的身心健康。运动员为提高成绩使用的兴奋剂如苯丙胺、麻黄碱、氯三苯乙烯及皮质类固醇等小分子有机化合物也会对身体造成严重伤害。 因此,有必要对饲料、奶、肉的原料和加工产品都进行这些小分子有机化合物的监测,也需要对吸毒者、运动员的体液进行检测。 目前检测小分子有机化合物的方法主要有色谱法、质谱法、酶联免疫分析法(ELISA)以及胶体金免疫层析法。其中色谱法、质谱法、ELISA都要用到昂贵的设备,需要专业技术人员在实验室中操作,而且操作步骤多,耗时长。胶体金免疫层析法则操作简单、方便、快速且便宜,但是其灵敏度较低,而且不能定量检测。因此有必要提供一种快速、方便、简单且高灵敏度的小分子有机化合物定量检测方法。
技术实现思路
本专利技术旨在解决本领域中的上述各种问题和实现以下目标。具体地,本专利技术的目的就是要提供一种方便、快速而且高灵敏度地检测样品中的小分子有机化合物的试纸条和方法。 具体的,本专利技术提供了一种用免疫层析技术检测样品中的小分子有机化合物的试纸条。 在一种实施方式中,本专利技术提供了一种用免疫层析技术检测小分子有机化合物的试纸条,包括标记物垫和捕获膜,其特征在于,所述标记物垫含有光致发光微球标记的小分子有机化合物检测抗体,所述捕获膜含有小分子有机化合物抗原。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述小分子有机化合物是三聚氰胺。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述小分子有机化合物是瘦肉精。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述瘦肉精是盐酸克伦特罗。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述瘦肉精是莱克多巴胺。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述小分子有机化合物是抗生素。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述抗生素是氯霉素。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述抗生素是链霉素。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述小分子有机化合物是类固醇激素。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述类固醇激素是己烯雌酚。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述类固醇激素是甲孕酮。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述小分子有机化合物是真菌毒素。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述真菌毒素是黄曲霉毒素。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述真菌毒素是玉米赤霉烯酮。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述光致发光微球是突光微球。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述光致发光微球是时间分辨突光微球。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述时间分辨荧光微球是含铕复合物的荧光微球。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述光致发光微球是磷光微球。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述磷光微球是含钼复合物的磷光微球。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述光致发光微球是二氧化娃微球。 在进一步的实施方式中,其特征在于,所述光致发光微球是聚苯乙烯微球。 在另一种实施方式中,本专利技术提供了一种用免疫层析技术检测小分子有机化合物的方法,其特征在于,在权利要求1所述的试纸条样品垫上滴加含小分子有机化合物的样品,反应后检测光信号。 详细说明用免疫层析技术检测样品中小分子有机化合物的试纸条如图1示,包括样品垫1,标记物垫2,捕获膜3,吸水垫4,支撑底板5。捕获膜3上含有C线6和T线7。 其中样品垫一般为玻璃纤维、滤纸或滤血膜。标记物垫可为玻璃纤维、滤纸或聚酯膜。当样品垫和标记物垫材质相同时可整合在一起,用一条玻璃纤维、滤纸或聚酯膜来完成样品垫和标记物垫的功能。所述标记物垫含有光致发光微球标记的小分子有机化合物检测抗体,还可以含有光致发光微球标记的对照蛋白或抗体,如链亲和素或兔抗体。 捕获膜可以是硝酸纤维素膜(NC膜)、尼龙膜等,所述捕获膜的T线含有小分子有机化合物抗原,C线为阳性对照,C线可含有能结合小分子有机化合物检测抗体的二抗,也可含有其他可做阳性对照的蛋白或抗体,如生物素标记的牛血清白蛋白或卵清蛋白(标记物垫上含链亲和素),或者羊抗兔抗体(标记物垫上含兔抗体)。 用免疫层析技术检测样品中小分子有机化合物的方法,如图1示,当样品溶液滴加到试纸条的样品垫I上后,液体将沿水平箭头方向移动,先到达标记物垫2,样品中的小分子有机化合物将与标记物垫2中光致发光微球标记的小分子有机化合物检测抗体结合形成复合物,即‘小分子有机化合物-小分子有机化合物检测抗体?光致发光微球’,除此之外,溶液中还含有未与小分子有机化合物结合的‘小分子有机化合物检测抗体?光致发光微球’,当溶液继续移动到达捕获膜的T线时,溶液中的‘小分子有机化合物检测抗体?光致发光微球’将与此处的小分子有机化合物抗原形成‘小分子有机化合物抗原-小分子有机化合物检测抗体?光致发光微球’复合物并被固定在T线上,而在到达T线前形成的‘小分子有机化合物-小分子有机化合物检测抗体?光致发光微球’则继续移动,可被C线处能结合小分子有机化合物检测抗体的二抗结合。随后用检测仪来检测T线上的荧光/磷光信号,并与光信号-小分子有机化合物浓度标准曲线比较计算出待测样品中小分子有机化合物的浓度。 由于T线处小分子有机化合物抗原捕获的光致发光微球包含有很多光致发光分子(荧光分子或磷光分子),所以T线处可以检测到很强的光信号,从而使这种免疫层析技术检测小分子有机化合物的方法有很高的灵敏度。当光致发光分子是时间分辨荧光复合物或磷光复合物时,由于发射光有数百微秒到数毫秒的突光寿命,可以在激发光撤掉后数十微秒到数百微秒检测发射光信号,此时激发光和背景荧光都已经消失,只有光致发光分子特异的荧光或磷光信号,所以检测的特异性和灵敏度都大大提高。 本专利技术中的‘小分子有机化合物’指分子量在1000道尔顿以下主要由碳、氢、氧组成的化合物,包括但不限于:三聚氰胺,各种瘦肉精如盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等,各种抗生素如氯霉素、链本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种用免疫层析技术检测小分子有机化合物的试纸条,包括标记物垫和捕获膜,其特征在于,所述标记物垫含有光致发光微球标记的小分子有机化合物检测抗体,所述捕获膜含有小分子有机化合物抗原。

【技术特征摘要】
1.一种用免疫层析技术检测小分子有机化合物的试纸条,包括标记物垫和捕获膜,其特征在于,所述标记物垫含有光致发光微球标记的小分子有机化合物检测抗体,所述捕获膜含有小分子有机化合物抗原。2.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于,所述小分子有机化合物是三聚氰胺。3.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于,所述小分子有机化合物是瘦肉精。4.如权利要求3所述的试纸条,其特征在于,所述瘦肉精是盐酸克伦特罗。5.如权利要求3所述的试纸条,其特征在于,所述瘦肉精是莱克多巴胺。6.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于,所述小分子有机化合物是抗生素。7.如权利要求6所述的试纸条,其特征在于,所述抗生素是氯霉素。8.如权利要求6所述的试纸条,其特征在于,所述抗生素是链霉素。9.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于,所述小分子有机化合物是类固醇激素。10.如权利要求9所述的试纸条,其特征在于,所述类固醇激素是己烯雌酚。11.如权利要求9所述的试纸条,其特征在于,所述类固醇激素是甲孕酮。12.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于,...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨挥
申请(专利权)人:嘉兴朝云帆生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:浙江;33

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