本发明专利技术公开了一种提取鹿皮胶原蛋白的方法、将梅花鹿皮或马鹿皮去毛，切成小块，用高速组织捣碎机捣碎，用超临界CO2萃取方法除去脂溶性成分，得到除脂后的鹿皮；向其中加入NaCl溶液，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装置中，以温度20～50℃，场强10～30KV，脉冲数5～10为参数提取，连续收集提取液，离心，弃上清，得到除杂蛋白沉淀，沉淀用蒸馏水冲洗，离心，弃水层，得除盐后的沉淀，沉淀中加入有机酸溶液，加入蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装置中，连续收集提取液，离心，上清液浓缩至一定体积，冷冻干燥，得白色固体的本发明专利技术产品。热敏成份不变性，提取连续、快速，技术先进，环保高效。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及一种利用高压脉冲电场技术从鹿皮中提取胶 原蛋白的方法。
技术介绍
胶原（collagen)是一种由动物细胞合成的生物高分子，广泛存在于有机体中的 结构蛋白质，约占哺乳动物总蛋白的1/3，是皮肤、软骨、动脉血管壁及结缔组织的主要 成分，在动物体内起支持、保护、连接等多种作用。胶原蛋白具有良好的生物相容性和弱抗 原性，在保健品、药品辅料以及生物材料等领域应用十分广泛，常规胶原蛋白提取方法包括 酸法、碱法、热降解法、酶法以及这些方法结合使用等，在提取过程中存在工艺周期长，工艺 步骤复杂，提取率较低等问题，Gomez - Guillen等研究了高压处理对胶原蛋白提取过程 的影响，此外，超声、压力脉冲等预处理方法也被尝试用于胶原蛋白提取。孟黄军等人以胶 原蛋白的热稳定性为基础，考察了基于多级逆流固液萃取技术的鱼鳞胶原蛋白提取工艺， 探讨了酶促反应和膜分离耦合技术用于制备胶原蛋白多肽的可行性。王建辉等人采用酸法 和酶法从东北特产梅花鹿鹿皮中提取胶原蛋白，对其中的水分、灰分、氮含量、微量元素及 羟脯氨酸含量、分子量、氨基酸及饱湿性和吸水性进行测定，并与牛皮和猪皮的胶原进行 比较。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从梅花鹿皮或马鹿皮中提取胶原蛋白方法，采用该方法 提取梅花鹿皮或马鹿皮中胶原蛋白具有提取周期短、提取率高等优点。 本专利技术的技术方案如下： ①鹿皮前处理：取新鲜梅花鹿皮去毛、刮去油脂、洗净，切成I. OcmX I. Ocm的小块，用 蒸馏水洗至无血色；②脱脂：胶体磨或高速组织捣碎机捣碎鹿皮，采用超临界C02萃取装置 萃取1?5小时，萃取后鹿皮即为脱脂鹿皮;③去除杂蛋白：脱脂鹿皮中加入5倍?20倍 (W/V)的1%?5%NaCl溶液混匀，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装置中，以温度 20?50°C，场强10?30KV，脉冲数5?10为参数提取，连续收集提取液，离心，弃上清，得 到去除杂蛋白的沉淀；沉淀用10倍?30倍(W/V)的蒸馏水冲洗，离心，弃上清，得除盐后的 沉淀；④胶原蛋白的提取：取上述步骤获得的沉淀，按10倍?30倍（W/V)量加入pHl?7 的有机酸溶液，加入鹿皮重量1. 〇%?5. 0% (W/W)的蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高压 电脉冲提取装置中，以温度20?50°C，场强10?30KV，脉冲数5?10为参数提取，连续收 集提取液，离心，上清液40°C浓缩至一定体积，冷冻干燥，得白色固体的本专利技术产品，本专利技术 具有的优点在于鹿皮胶原蛋白的提取方法较已有工艺快速、高效、提取率高，适合工业放大 生广等优点。 具体实施例： 实施例I ①鹿皮前处理：取新鲜梅花鹿皮去毛、刮去油脂、洗净，切成I. OcmX I. Ocm的小块，用 4°C蒸馏水洗至无血色，浙干，取I. Okg鹿皮备用；②脱脂：取鹿皮，高速组织捣碎机捣碎，置 超临界C02萃取釜中25MPa 40°C萃取1小时，取萃取后鹿茸0. 85kg备用；③去除杂蛋白： 取脱脂鹿皮〇. 85kg加入4. 25L 5%NaCl溶液混匀，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提 取装置中，以温度50°C，场强30KV，脉冲数10,供料速度，5ml/min为参数提取，连续收集提 取液，离心，弃上清得到去除杂蛋白的沉淀；沉淀用25. 5L蒸馏水冲洗，离心，弃水层，得除 盐后的沉淀0. 70kg。④胶原蛋白的提取：取上述步骤获得的沉淀0. 70kg，加入pH2的柠檬 酸溶液21L，加入Hg胃蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高压电脉冲提取装置中，以温度 37°C，场强30KV，脉冲数10,供料速度5ml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，上清液 用旋转蒸发仪在40°C下浓缩至I. 4L，-55°C冷冻干燥，得鹿皮胶原蛋白390g。 实施例2 ①鹿皮前处理：取新鲜梅花鹿皮去毛、刮去油脂、洗净，切成I. OcmX I. Ocm的小块，用 4°C蒸馏水洗至无血色，浙干，取3. Okg鹿皮备用；②脱脂：取鹿皮，胶体磨磨碎，置超临界 C02萃取釜中30MPa 35°C萃取5小时，取萃取后鹿茸2. 5kg备用；③去除杂蛋白：取脱脂鹿 皮2. 5kg加入75L l%NaCl溶液混匀，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装置中，以 温度20°C，场强10KV，脉冲数5,供料速度，lOml/min为参数提取，连续收集提取液，离心， 弃上清得到去除杂蛋白的沉淀；沉淀用25L的蒸馏水冲洗，离心，弃水层，得除盐后的沉淀 2. 2kg 胶原蛋白的提取：取上述步骤获得的沉淀2. 2kg，加入pH6的苹果酸溶液66L，加 入220g木瓜蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高压电脉冲提取装置中，以温度50°C，场强 10KV，脉冲数5,供料速度，lOml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，上清液用旋转蒸 发仪在40°C下浓缩至5. OL，-55°C冷冻干燥，得鹿皮胶原蛋白1210g。 实施例3 ①鹿皮前处理：取新鲜梅花鹿皮去毛、刮去油脂、洗净，切成I. OcmX I. Ocm的小块，用 4°C蒸馏水洗至无血色，浙干，取5. Okg鹿皮备用通)脱脂：取鹿皮，高速组织捣碎机捣碎，置 超临界C02萃取釜中35MPa 40°C萃取3小时，取萃取后鹿皮4. 2kg备用；③去除杂蛋白：取 脱脂鹿皮4. 2kg加入94L 3. 0%NaCl溶液混匀，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提取装 置中，以温度40°C，场强15KV，脉冲数5,供料速度15ml/min为参数提取，连续收集提取液， 离心，弃上清得到去除杂蛋白的沉淀；沉淀用IOOL的蒸馏水冲洗，离心，弃水层，得除盐后 的沉淀3. 6kg 胶原蛋白的提取：取上述步骤获得的沉淀3. 6kg，加入pH5的柠檬酸溶液 72L，加入180g胃蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高压电脉冲提取装置中，以温度40°C， 场强15KV，脉冲数5,供料速度15ml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，上清液用旋转 蒸发仪在40°C浓缩至7L，-55°C冷冻干燥，得鹿皮胶原蛋白2006g。 实施例4 ①鹿皮前处理：取新鲜梅花鹿皮去毛、刮去油脂、洗净，切成I. OcmX I. Ocm的小块，用 4°C蒸馏水洗至无血色，浙干，取IOkg鹿皮备用；②脱脂：取鹿皮，高速组织捣碎机捣碎，置 超临界C02萃取釜中30MPa 40°C萃取5小时，取萃取后鹿皮8. 5kg备用；③去除杂蛋白： 取脱脂鹿皮8. 5kg加入170L 3. 0%NaCl溶液混匀，用液体泵将料液连续泵入高电压脉冲提 取装置中，以温度35°C，场强20KV，脉冲数6,供料速度30ml/min为参数提取，连续收集提 取液，离心，弃上清得到去除杂蛋白的沉淀；沉淀用200L的蒸馏水冲洗，离心，弃水层，得除 盐后的沉淀7. 3kg ;?胶原蛋白的提取：取上述步骤获得的沉淀7. 3kg，加入pH4的酒石酸 溶液145L，加入365g胃蛋白酶，用液体泵将料液连续泵入高压电脉冲提取装置中，以温度 35°C，场强20KV，脉冲数6,供料速度30ml/min为参数提取，连续收集提取液，离心，上清液 用旋转蒸发仪在40°C浓缩至1本文档来自技高网...
【技术保护点】
从鹿皮中提取高活性胶原蛋白，其特征在于：采用高电压脉冲提取技术提取胶原蛋白。
【技术特征摘要】
1. 从鹿皮中提取高活性胶原蛋白，其特征在于：采用高电压脉冲提取技术提取胶原蛋 白。2. 根据权利要求1所述的一种鹿皮胶原蛋白提取技术，其特征在于通过以下制备方 法：包括鹿皮清洗、切块，捣碎，除去脂肪，除去杂蛋白，调节pH值，加入蛋白酶，运用高电压 脉冲技术提取，离心，提取液浓缩，冻干等一系列步骤。3. 根据权利要求2所述的制备方法，捣碎过程可以用胶体磨，组织捣碎机；除去脂肪过 程是用超临界C02萃取装置来进行的；杂蛋白的去除是用1%?5%NaCl溶液在高电压脉冲 装置中进行的；pH值的调节可以是柠檬酸、酒石酸、苹果酸等有...
【专利技术属性】
技术研发人员：王全凯，李庆杰，王莲萍，胡太超，博士儒，陶珊，
申请(专利权)人：王全凯，
类型：发明
国别省市：吉林;22
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