一种低酸价灵芝孢子油的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种低酸价灵芝孢子油的制备方法，包括以下步骤：称取破壁、制粒后的灵芝孢子粉，置于超临界流体萃取设备的萃取段中，通入超临界ＣＯ↓［２］流体，进行超临界萃取；再从萃取段上部流出的含有灵芝孢子油的ＣＯ↓［２］在加入甘油后进入到预先装有固定化脂肪酶的反应段中，进行脂肪酶催化的酯化反应；最后从反应段上部流出的含有反应后的灵芝孢子油的ＣＯ↓［２］进入到分离段中，减压后从分离段放料口放出物料，除去水分和其它杂质后得到灵芝孢子油。本发明专利技术提供了一种在产品质量、环保性等方面更具优势的低酸价灵芝孢子油的制备方法，得到具有重要生理活性和强氧化稳定性的高品质灵芝孢子油。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种灵芝孢子油的制备方法，特别是一种低酸价灵芝孢子油的制备方法。
技术介绍
灵芝又称为瑞草、灵芝草。灵芝孢子是灵芝生长成熟期从菌盖弹射出来极其细小的孢子，为灵芝的生殖细胞，具有灵芝的全部遗传活性物质。灵芝孢子具有结实坚固的细胞壁，可耐酸、耐碱、耐温、耐压，对消化酶也非常稳定，孢内物质被包覆而不宜提取。为提高对灵芝孢子的生物利用率，对灵芝孢子进行有效的破壁，而后萃取孢子内含物十分必要。灵芝孢子油是从灵芝孢子中萃取得到的油状脂质物。灵芝孢子油的提取方法有传统的溶剂提取法，但存在提取效率低、能耗高、费时长等缺点。超临界CO2萃取技术是新兴的一项萃取、分离和纯化的技术，具有出油率高、产品质量高、功能性物质的活性保持完好、无化学溶剂消耗和残留、无污染等优点，是灵芝孢子油提取的理想方法。专利CN1194079C公开了一种灵芝孢子油超临界CO2萃取的制备方法，将灵芝孢子膨化、制粒后超临界萃取孢子油，该法采用的灵芝孢子膨化的过程温度较高(达80～140℃)，将会加速孢子内油脂类物质的氧化及酸败过程，影响了孢子油产品的品质。专利CN1114446C也公开了一种灵芝孢子有效成分的萃取方法，但所述的工艺条件比较宽泛，在实际生产中是难以在如此宽泛的条件下得到高纯度和高出油率的孢子油产品的。专利CN1094766C公开了一种灵芝孢子油的超临界萃取加工方法，涉及将灵芝孢子与水、明胶或淀粉的混合物为粘合剂制粒成型后进行超临界萃取，但是所加入的辅料和粘合剂有造成提取物污染的可能，此工艺所涉及的超临界萃取的温度、压力较宽，生产时难以掌握好工艺条件以制得高纯度孢子油产品，同时萃取时间也达到35小时，难以真正实施工业化生产。专利CN1239100C也公开了一种灵芝孢子油及其制备方法和用途，涉及以破壁孢子为原料，用乙醇溶液制粒干燥后超临界CO2萃取孢子油。专利CN1907303A公开了一种采用超生强化超临界流体技术提取灵芝孢子油的制备方法，提取率比常规的超临界流体萃取法提高15～30％，并采用了一步干压制粒法将破壁灵芝孢子粉制成颗粒后提取，无需加入任何辅料和粘合剂，也不需要经过加热和干燥的过程，简化了工艺，节约了生产成本。专利CN1883590A公开了一种全灵芝孢子油的制备方法，以灵芝孢子粉、灵芝粉为原料，经酶法破壁、湿法制粒、超临界CO2萃取、离心精制后得到，与常规的机械破壁孢子萃取的灵芝孢子油相比，其有效成分的种类更加齐全，生物效能更高，产品的过氧化值也较低，但此工艺比较复杂，加工周期也很长，不太适合工业化生产。上述公开的超临界CO2萃取制备灵芝孢子油的方法，都不同程度的存在着工艺条件要求高、-->提取收率不稳定等问题，而且应用上述方法所制备的灵芝孢子油产品，都无例外的存在着一个问题：酸价过高(即其中存在着较多的游离脂肪酸)。在所给出的酸价数据中可以看出，绝大部分最终的灵芝孢子油产品的酸价在20mgKOH/g油以上，最高的达到40mgKOH/g油(对应的游离脂肪酸含量为20％)。灵芝孢子油的脂肪酸组分中，不饱和脂肪酸的含量在60％以上，有的还达到75.7％(中国食用菌，2007，25：40)，我们知道，不饱和脂肪酸具有不耐热、稳定性差等缺点，在使用及储存过程中极易氧化，产生伤害人体的自由基及各种有毒氧化产物，而且游离形式的脂肪酸要比以酯形式存在的脂肪酸的稳定性差，在相同条件下，游离态的脂肪酸更易发生氧化。在应用上述方法得到的灵芝孢子油产品中，过高的游离脂肪酸含量(10～20％)，而且大部分游离脂肪酸为不饱和脂肪酸，这给产品在使用及储存过程中的氧化稳定性带来很大的隐患，如果控制的不好将会发生氧化变质，对产品的气味、外观等产生影响，而且还会产生对人体有害的物质，带来安全问题。由于上述的缺点，需要进行进一步的研究适宜的工艺条件，并有必要引入一些新思路、新方法来制备具有重要生理活性和强氧化稳定性的高品质灵芝孢子油，为相关的药品、保健品、食品等行业提供优质的原料。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对已有技术存在的缺点，将超临界流体萃取技术与超临界流体酶催化反应相耦合，提供一种低酸价灵芝孢子油的制备方法。本专利技术的低酸价灵芝孢子油的制备方法，主要包括以下步骤：(1)取灵芝孢子粉将其破壁、制粒；(2)称取步骤(1)中的灵芝孢子粉，置于超临界流体萃取设备的萃取段中，通入超临界CO2流体，进行超临界萃取，萃取压力为20～35MPa，温度为30～70℃，萃取时间为1～4h；(3)从萃取段上部流出的含有灵芝孢子油的CO2在加入甘油后进入到预先装有固定化脂肪酶的反应段中，在30～70℃，超临界CO2压力为20～35MPa的条件下进行脂肪酶催化的酯化反应，反应时间为1～4h；甘油加入量为灵芝孢子粉干重的0.3～2％，固定化脂肪酶的加入量为灵芝孢子粉干重0.5～5％；(4)从反应段上部流出的含有反应后的灵芝孢子油的CO2进入到分离段中，减压后从分离段放料口放出物料，再除去水分和其它杂质后，得到灵芝孢子油。所述步骤(1)中破壁是通过机械作用或酶的降解作用，所述步骤(1)中制粒是将粉细度为350-450目的破壁孢子粉制成直径为0.1～0.5cm的颗粒。所述步骤(3)的固定化脂肪酶为根霉属、曲霉属、毛霉属、细菌或酵母菌来源的微生物脂肪酶中的一种或多种。所述步骤(4)中除去水分和其它杂质是以5000～15000r/min速度离心，再通过无水硫酸钠除去少量水分。-->本专利技术与现有技术相比，具有如下有益效果：本专利技术提供了一种在产品质量、环保性等方面更具优势的低酸价灵芝孢子油的制备方法，得到具有重要生理活性和强氧化稳定性的高品质灵芝孢子油。具体实施方式下面结合实施例详细描述本专利技术的一种低酸价灵芝孢子油的制备方法，但本专利技术的保护范围不受下列实施例的限制。灵芝孢子油中总三萜的含量采用可见分光光度法测定，并以熊果酸为对照。酸价的测定方法按中国药典附录的方法测定。实施例1(1)取灵芝孢子粉将其通过机械作用破壁或酶的降解作用、将粉细度为400目的破壁孢子粉制成直径为0.1cm的颗粒。(2)称取(1)得到的灵芝孢子粉1000g，置于超临界流体萃取设备的萃取段中，通入超临界CO2流体，进行超临界萃取，萃取压力为30MPa，温度为50℃，萃取时间为1h；(3)从萃取段上部流出的含有灵芝孢子油的CO2在加入3g甘油后进入到预先装有5g固定化脂肪酶LipozymeRM IM(Novozymes公司，来源于毛霉Rhizomucor miehei)的反应段中，在30℃，超临界CO2压力为20MPa的条件下进行脂肪酶催化的酯化反应，反应时间为1h。(4)从反应段上部流出的含有反应后的灵芝孢子油的CO2进入到分离段中，减压后从分离段放料口放出物料，再5000r/min速度离心，再通过无水硫酸钠除去少量水分得到淡黄色澄清的油状物，即为灵芝孢子油1。实施例2(1)取灵芝孢子粉将其通过机械作用破壁或酶的降解作用、将粉细度为350目的破壁孢子粉制成直径为0.5cm的颗粒。(2)称取(1)得到的灵芝孢子粉1000g，置于超临界流体萃取设备的萃取段中，通入超临界CO2流体，进行超临界萃取，萃取压力为20MPa，温度为30℃，萃取时间为3h；(3)从萃取段上部流出的含有灵芝孢子油的CO2在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种低酸价灵芝孢子油的制备方法，其特征在于，将超临界流体萃取技术与超临界流体酶催化反应相耦合，包括以下步骤：　　　　（１）取灵芝孢子粉将其破壁、制粒；　　　　（２）称取步骤（１）得到的灵芝孢子粉，置于超临界流体萃取设备的萃取段中，通入超临界ＣＯ↓［２］流体，进行超临界萃取，萃取压力为２０～３５ＭＰａ，温度为３０～７０℃，萃取时间为１～４ｈ；　　　　（３）从萃取段上部流出的含有灵芝孢子油的ＣＯ↓［２］在加入甘油后进入到预先装有固定化脂肪酶的反应段中，在３０～７０℃，超临界ＣＯ↓［２］压力为２０～３５ＭＰａ的条件下进行脂肪酶催化的酯化反应，反应时间为１～４ｈ，其中，甘油加入量为灵芝孢子粉干重的０．３～２％，固定化脂肪酶的加入量为灵芝孢子粉干重０．５～５％；　　　　（４）从反应段上部流出的含有反应后的灵芝孢子油的ＣＯ↓［２］进入到分离段中，减压后从分离段放料口放出物料，再除去水分和杂质后，得到灵芝孢子油。

【技术特征摘要】
1.一种低酸价灵芝孢子油的制备方法，其特征在于，将超临界流体萃取技术与超临界流体酶催化反应相耦合，包括以下步骤：(1)取灵芝孢子粉将其破壁、制粒；(2)称取步骤(1)得到的灵芝孢子粉，置于超临界流体萃取设备的萃取段中，通入超临界CO2流体，进行超临界萃取，萃取压力为20～35MPa，温度为30～70℃，萃取时间为1～4h；(3)从萃取段上部流出的含有灵芝孢子油的CO2在加入甘油后进入到预先装有固定化脂肪酶的反应段中，在30～70℃，超临界CO2压力为20～35MPa的条件下进行脂肪酶催化的酯化反应，反应时间为1～4h，其中，甘油加入量为灵芝孢子粉干重的0.3～2％，固定化脂肪酶的加入量为灵芝孢子粉干重0.5～5％；(...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨继国，杨博，王永华，宁正祥，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]