一种黄萱益肝片的制备方法及其在制备抑制肺癌细胞LLC细胞增殖药物中的应用技术

本发明专利技术属于中药技术领域，具体涉及一种黄萱益肝片的制备方法及应用。本发明专利技术的黄萱益肝片的制备方法，由土大黄291g、萱草103g、千里光92g、猕猴桃92g、红土茯苓92g、野蔷薇62g、獐芽菜62g、骚羊古62g、南五味子62g作为原料药制成，采用超临界萃取、微波萃取和大孔树脂吸附制备而成，使得大黄素含量有很大提高。本发明专利技术还提供了黄萱益肝片在制备抑制小鼠肺癌细胞LLC细胞增殖药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】
一种黄萱益肝片的制备方法及其在制备抑制肺癌细胞LLC 细胞增殖药物中的应用
本专利技术属于中药
，具体涉及一种黄萱益肝片的制备方法及其在制备抑制 小鼠肺癌细胞LLC细胞增殖药物中的应用。
技术介绍
黄萱益肝散标准号WS-10465(ZD-0465)-2002,记载于国家中成药标准汇编内科肝 胆分册。由土大黄291g、萱草103g、千里光92g、猕猴桃92g、红土茯苓92g、野蔷薇62g、獐 芽菜62g、骚羊古62g、南五味子62g作为原料药制成，具有清热解毒，疏肝利胆的功效。用 于肝胆湿热所致的慢性乙型肝炎。 现有技术中，尚未有黄萱益肝散在提取制备方面采用CO2超临界萃取、微波技术和 大孔树脂吸附技术提取的报道，而中药直接打粉取的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患 者用量过大，不方便服用，严重影响了本品在临床上应用。
技术实现思路
为了解决上述的技术问题，本专利技术提供了一种黄萱益肝片的制备方法。 本专利技术的另一个目的在于提供一种黄萱益肝片在制备抑制小鼠肺癌细胞LLC细 胞增殖药物中的应用。 本专利技术的目的是通过如下的方案实现的： 一种黄萱益肝片的制备方法，由土大黄291g、萱草103g、千里光92g、称猴桃92g、红土 茯苓92g、野蔷薇62g、獐芽菜62g、骚羊古62g、南五味子62g作为原料药制成，所述的制备 方法由下列步骤组成：取野蔷薇、骚羊古、南五味子，粉碎成细粉，加入到C02超临界萃取器 中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力20-30MPa，温度 30-50°C，CO 2流量l-3ml/g生药·π?η，萃取时间130-170min，得超临界萃取物，备用；萃取 后的野蔷薇、骚羊古、南五味子残渣与其他六味药材，粉碎，加入5L的60%乙醇，投入微波萃 取装置中进行微波萃取，萃取功率600-800W，萃取2次，每次5-10分钟，合并萃取液，浓缩， 加到DlOl大孔吸附树脂柱上，60%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩 并干燥，得微波提取物，将超临界萃取物、微波提取物混合加入淀粉，60%乙醇制颗粒，干燥， 压片，制成200片，每片重0. 5g。 上述的黄萱益肝片的制备方法中，所述CO2超临界萃取中夹带剂占总萃取溶剂的 体积百分比为5%。 上述的黄萱益肝片的制备方法中，所述CO2超临界萃取中萃取压力为25 MPa。 上述的黄萱益肝片的制备方法中，所述CO2超临界萃取中萃取温度为60°C。 上述的黄萱益肝片的制备方法中，所述CO2超临界萃取中CCV流量2ml/g生 药· min〇 上述的黄萱益肝片的制备方法中，所述CO2超临界萃取中萃取时间为150min。 上述的黄萱益肝片的制备方法中，所述微波萃取功率为700W。 上述的黄萱益肝片的制备方法中，所述微波萃取每次萃取时间为8分钟。 上述的黄萱益肝片在制备抑制小鼠肺癌细胞LLC细胞增殖药物中的应用。 现有技术中，黄萱益肝散口服，成人一次9g，一日3次。黄萱益肝散服药量大。米 用本专利技术方法制备成的黄萱益肝片每片重〇. 5g，每次仅需2片，一日服用3次。在具有更多 活性成分的条件下大大减少了服用量。此结论可以通过下述试验证明。 试验一、不同方法制备的黄萱益肝片中大黄素含量的比较 1、仪器及试药本专利技术黄萱益肝片：按实施例1方法制备，使用918g原料药，经提取制成 200片，每片重0. 5g。原黄萱益肝散，按照WS-10465 (ZD-0465) -2002标准方法制备，作为 对照。Agilentl200高效液相色谱仪；AE240电子分析天平；大黄素对照品（中国药品生物 制品检定所)。 2、方法 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D)测定。 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0. 25% 磷酸溶液（80 : 20)为流动相；检测波长为436nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于 3000。 对照品溶液的制备取经五氧化二磷干燥至恒重的大黄素对照品适量，精密称 定，加甲醇制成每Iml含0. 05mg的溶液，即得。 本专利技术产品供试品溶液的制备取本专利技术的黄萱益肝片，研细，取〇.4g，精密称 定，置索氏提取器中，加乙醇适量，加热回流提取至无色，提取液浓缩至约5ml，放冷，加入稀 盐酸5ml，氯仿30ml，加热回流30分钟，放冷，分取氯仿液，水液用氯仿振摇提取2次（20ml、 15ml)，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇 匀，离心，取上清液，即得。 对照品供试品溶液的制备取本对照的黄萱益肝散，研细，混匀，取2g，精密称定， 置索氏提取器中，加乙醇适量，加热回流提取至无色，提取液浓缩至约5ml，放冷，加入稀盐 酸5ml，氯仿30ml，加热回流30分钟，放冷，分取氯仿液，水液用氯仿振摇提取2次（20ml、 15ml)，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇 匀，离心，取上清液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液、本专利技术产品供试品溶液与对照品供试品溶液 各1〇μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。 3、结果 结果表明，本专利技术黄萱益肝片中大黄素的含量为2-4mg/片；而原黄萱益肝散中大黄素 的含量为〇. 21mg/粒，每片大黄素含量相当于散剂每g散剂含量的10-20倍，在服用量减少 的情况下，大黄素含量有很大提高。 上述研究表明，采用本专利技术制备方法制备的黄萱益肝片，有效成分含量远远高于 WS-10465 (ZD-0465) -2002标准记载的方法制备的黄萱益肝散。 【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解 本专利技术，但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本专利技术上述 内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。 实施例1 取土大黄291g、萱草103g、千里光92g、猕猴桃92g、红土茯苓92g、野蔷薇62g、獐芽菜 62g、骚羊古62g、南五味子62g :取野蔷薇、骚羊古、南五味子，粉碎成细粉，加入到CO2超临 界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力25MPa， 温度40°C，CO 2流量2ml/g生药· min，萃取时间150min，得超临界萃取物，备用；萃取后的 野蔷薇、骚羊古、南五味子残渣与其他六味药材，粉碎，加入5L的60%乙醇，投入微波萃取装 置中进行微波萃取，萃取功率700W，萃取2次，每次8分钟，合并萃取液，浓缩，加到DlOl大 孔吸附树脂柱上，60%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得 微波提取物，将超临界萃取物、微波提取物混合加入淀粉，60%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成 200片，每片重0. 5g。 经检测，成品中大黄素的含量为4. 02mg/片。 实施例2 取土大黄291g、萱草103g、千里光92g、猕猴桃92g、红土茯苓92g、野蔷薇62g、獐芽菜 62g、骚羊古62g、南五味子62g :取野蔷薇、骚羊古、南五味子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黄萱益肝片的制备方法，由土大黄291g、萱草103g、千里光92g、猕猴桃92g、红土茯苓92g、野蔷薇62g、獐芽菜62g、骚羊古62g、南五味子62g作为原料药制成，其特征在于，所述的制备方法由下列步骤组成：取野蔷薇、骚羊古、南五味子，粉碎成细粉，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4‑6%，萃取压力20‑30MPa，温度30‑50℃，CO2流量l‑3ml/g生药·min，萃取时间130‑170min，得超临界萃取物，备用；萃取后的野蔷薇、骚羊古、南五味子残渣与其他六味药材，粉碎，加入5L的60%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率600‑800W，萃取2次，每次5‑10分钟，合并萃取液，浓缩，加到D101大孔吸附树脂柱上，60%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，将超临界萃取物、微波提取物混合加入淀粉，60%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成200片，每片重0.5g。

【技术特征摘要】
1. 一种黄萱益肝片的制备方法，由土大黄291g、萱草103g、千里光92g、称猴桃92g、红 土茯苓92g、野蔷薇62g、獐芽菜62g、骚羊古62g、南五味子62g作为原料药制成，其特征在 于，所述的制备方法由下列步骤组成：取野蔷薇、骚羊古、南五味子，粉碎成细粉，加入到CO 2 超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力 20-30MPa，温度30-50°C，C0 2流量l-3ml/g生药.min,萃取时间130-170min，得超临界萃取 物，备用；萃取后的野蔷薇、骚羊古、南五味子残渣与其他六味药材，粉碎，加入5L的60%乙 醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率600-800W，萃取2次，每次5-10分钟，合并 萃取液，浓缩，加到DlOl大孔吸附树脂柱上，60%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压 回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，将超临界萃取物、微波提取物混合加入淀粉，60%乙 醇制颗粒，干燥，压...

【专利技术属性】
技术研发人员：权栋栋，王洪涛，刘艳辉，权威宇，胡乃合，
申请(专利权)人：山东中大药业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37