本发明专利技术涉及一种用于激光显微剖切装置的激光显微剖切物试样收集器(1),其中该试样收集器包括用于收集剖切物(111)的收集室(10),其特征在于,所述收集室(10)在试样侧具有向着环境敞开的、用于容纳剖切物(111)的开孔,所述收集室(10)具有第一阀门(102,122),它在关闭状态形成收集室(10)的远离试样的封堵,用于滞留剖切物(111),并且在第一阀门(102,122)下游设置毛细管线(107),它与收集室处于连接以输送来自所述收集室(10)的剖切物(111)。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术涉及一种用于激光显微剖切装置的激光显微剖切物试样收集器(1),其中该试样收集器包括用于收集剖切物(111)的收集室(10),其特征在于,所述收集室(10)在试样侧具有向着环境敞开的、用于容纳剖切物(111)的开孔,所述收集室(10)具有第一阀门(102,122),它在关闭状态形成收集室(10)的远离试样的封堵,用于滞留剖切物(111),并且在第一阀门(102,122)下游设置毛细管线(107),它与收集室处于连接以输送来自所述收集室(10)的剖切物(111)。【专利说明】用于收集激光显微剖切物的试样收集器
本专利技术涉及一个用于激光显微剖切装置的激光显微剖切物试样收集器和一个这种激光显微剖切装置。
技术介绍
在激光显微剖切中为了继续分析,借助于聚焦的激光射线选择的组织范围或者细胞从显微镜的组织试样中分出来或者切下来(“剖切”)。 申请者的DE 100 18 253 C2,DE 10 2005 028 062 B4和DE 10 2005 008 925 Al 描述了用于在使用显微镜的条件下激光显微剖切的可能的方法和系统。 基于毛细管的分析仪已经发展到可以在小液滴或溶液中通过毛细系统输运、分选、分析从组织中分解出来单个细胞或者甚至染色体,并且在分析后也可以继续使用。以基于毛细管的分析技术例如由公司Fluidigm(http://www.fluidgim.com)和RainDanceTechnplogies (http://www.raindancetechnologies.com)应用和推广。 为了可以利用这种技术分析,必需首先分离试样和单个细胞;这可以通过基于荧光的流式细胞术、激光显微剖切和移液到相应的用于毛细系统的输送介质里面实现。 对于在激光显微剖切中切割的所谓的“剖切物”提供不同的收集器供使用,例如所谓的“tube-caps”,八联管条(8er streifen),八联管条盖或者所谓的“口袋实验室”(英文也称为:Lab on a Chip),例如AmpliGrid装置。在激光显微剖切过程以后从剖切机中物理地取出这个收集器,并且独立地继续处理。为此通常需要离心步骤和移液步骤,直到剖切物在相应的溶液中输送到分析方法,例如聚合酶-链反应(英文:Polymerase ChainReact1n, PCR),逆转译PCR (RT-PCR)或者即时或定量PCR(rt_、qPCR)或者质谱仪(MS)。 这些工作原理的缺陷是,明显地限制在利用激光显微剖切分离以后直接用于自动地继续处理试样的可能性。此外必需的费事的离心和移液步骤含有高的污染和试样损失隐串 ■/Q1、O 由EP 2 083 257 Al已知一种用于传递显微的、分离的试样的方法和装置。在此微吸盘被定位在试样上面,试样从试样体上在物体台上切下来。在微吸盘偏转之前微吸盘主动地从物体台上吸住试样,并且接着将试样在另一位置再吹下来。由此可以将试样转移到反应罐里面。但是在抽吸前不可能或者至少不能足够地视觉地检查试样,因为它还被保留的试样体(试样从其上被切割下来)包围。 DE 10 2009 016 512 B4公开了一个激光切除腔,由一个容器组成,它可以从上面通过玻璃盖气密地封闭,要被检查的试样位于其底面上。该容器具有用于输送气体(例如氩气)的输入管和排出管。首先实现试样检查,且确定利用激光切除要去除的部位。通过激光显微剖切仪在充分利用这种仪器的高分辨率物镜的条件下进行这种检查。在确定相应的部位以后利用激光切除从试样上去除这个部位,并且通过输入输送气体从气密的容器例如输送到分析装置,例如质谱仪。根据分析结果可以分析其它试样部位。为此可以使用已知的激光显微剖切,它能够以高精度以亚微米范围剖切试样切片。为了激光显微剖切,所述激光切除腔被替换为常见的用于激光显微剖切的试样容器。 DE 103 29 674 Al的目的是克服UV切除的缺陷,例如在生物组织中的UV射线吸收或者较低的切割质量。为了切割生物材料,在这里建议使用超短皮秒或飞秒范围的激光脉冲,在激光波长为大于400nm(近红外)时重复频率为至少1000Hz,其中激光聚焦在试样上,用于在那里产生至少1012W/cm2的高强度。由此实现所谓的非共振多光子吸收,它为了切割作用产生离子。在一实施例中切割下来的生物材料通过电离作用与周围的试样分开并且落到以赖氨酸覆层的玻璃盖上。在此例如将试样通过载有它的薄膜涂覆在玻璃窗的底面上。硅环连接玻璃窗与以赖氨酸覆层的玻璃盖。切下来的生物材料例如可以通过插入两个针管通过硅环或者吸出来或者利用流体动力流冲出来并且利用无菌过滤器收集。上玻璃窗、硅环和用于收集切下来的材料的玻璃盖一起形成封闭的无菌室。 因此本专利技术的目的是,在完成激光显微剖切以后实现自动的试样处理,尤其具有可视或者说观察剖切物的可能性。
技术实现思路
这个目的通过如独立权利要求所述的用于激光显微剖切装置的激光显微剖切试样收集器和这种装置得以实现。在各从属权利要求和下面的描述中公开了优选的实施例。 按照本专利技术的激光显微剖切物试样收集器具有能够检查的、用于容纳剖切物的收集室,其中所述收集室在试样侧具有向着环境基本敞开的、用于容纳剖切物的开孔。所述收集室还具有第一阀门,它在关闭状态形成收集室的远离试样的封堵(或底部),用于尤其暂时滞留剖切物。在第一阀门下游设置毛细管线,它为了输送来自收集室的剖切物(在阀门打开时)与这个收集室处于连接。 下面的定义“下游”和“上游”涉及一流动方向,它从收集室的试样侧开孔通过第一阀门指向毛细管线方向,因此流动方向描述了剖切物的输运途径。 所述收集室的“向着环境基本敞开的开孔”要理解为,所述收集室不是气体或液体隔绝地密封。 本专利技术的优点是,按照本专利技术的试样收集器收集切下来的试样(剖切物),首先在通过关闭的第一阀门形成的底部上滞留,并且接着再导送到且通过毛细管线,无需手动的工作步骤。在剖切物的收集与继续导送之间必要时可以视觉地检查或观察剖切物。在其继续导送以后剖切物可以输送到分析。所述试样收集器对于继续导送尤其无需手动地取出和/或倾斜。通过这种方式实现试样处理的自动化,这改善了工作舒适性并且减少工作时间。此外可以避免或者至少减少由于手动的工作步骤带来的污染和/或材料损失。所述试样尤其可以通过使用适合的缓冲剂或者溶剂为了冲洗直接在剖切过程以后被保护并且输送到分析。 所述收集室可以是试样收集器的内部表面的一部分。所述收集室与毛细管线的连接可以以直接接头的形式出现,该接头包括第一阀门。在此收集室和毛细管线可以作为公共的、单个零部件的分段制成,例如由玻璃或塑料制成。这种分段可以相互连接,或者该零部件可以具有(阀门)段,它设置在两个上述分段之间。备选地可以使所述收集室和毛细管线由独立的零部件或者独立零部件的一部分呈现,它们直接或者通过一个或多个连接部件(第一阀门)相互连接。独立的零部件可以由同一种材料制成。备选地可以使至少一个零部件含有至少一种材料,而在其它零部件中不含有它。 所述毛细管线可以是毛细管或管道。 收集室例如可以用于,收集多个剖切物,然后使它们共同地通过第一阀门穿过毛细管线导引并且从那里供其它反应过程使用。这种本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于激光显微剖切装置的激光显微剖切物试样收集器(1),其中该试样收集器包括用于收集剖切物(111)的收集室(10),其特征在于,所述收集室(10)在试样侧具有向着环境敞开的、用于容纳剖切物(111)的开孔,所述收集室(10)具有第一阀门(102,122),它在关闭状态形成收集室(10)的远离试样的封堵,用于滞留剖切物(111),并且在第一阀门(102,122)下游设置的毛细管线(107),它与所述收集室处于连接以输送来自所述收集室(10)的剖切物(111)。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员:F·施劳德拉夫,
申请(专利权)人:莱卡微系统CMS有限责任公司,
类型:发明
国别省市:德国;DE
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