一种用于甘蔗叶部真菌病害菌株致病性鉴定的感染方法技术

本发明专利技术涉及甘蔗病害检验技术领域，提出一种用于甘蔗叶部真菌病害菌株致病性评价的感染方法，包括步骤有：菌株的准备、叶片的采集及预处理、感染叶片的准备、感染、培养、菌株的致病性评价，其特征在于：感染叶片的准备步骤是：把叶片剪成4～8cm的长段，用纸巾包住叶片的两端，放入灭过菌的培养皿内，并往叶片两端的纸巾滴加灭过菌的清水；感染步骤是：用扎孔器对培养皿中的叶片沿叶中脉两侧扎孔，用灭过菌的镊子夹菌丝块放到叶片扎有孔的位置上作为试验培养皿；本发明专利技术具有以下突出的实质性特点和显著进步：（1）感染需要的甘蔗叶片和菌丝块少；（2）感染后蔗叶可以控温及双重控湿，保证了病原菌发病对高温高湿的要求；（3）感染后有致病性的菌株发病显著、灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种用于甘蔗叶部真菌病害菌株致病性鉴定的感染方法，其特征在于包括以下步骤：1）、菌株的准备：用常规方法从甘蔗叶部病斑分离菌株，在PDA培养基上对菌株进行第一次纯化，获得直径约2～4厘米的菌落；2）、叶片的采集及预处理：采集蔗株的+2、+3或+4张叶，叶宽度要求至少2cm，把采集的干净叶片插到水中，使叶片不萎蔫；3）、感染叶片的准备：从步骤2）的水中取出叶片并去掉基部和尾部，把叶片剪成4～8 cm的长段，用纸巾包住叶片的两端，放入灭过菌的培养皿内，往叶片两端的纸巾滴加灭过菌的清水，直至纸巾湿透为止；4）、感染：用经过灭菌的扎孔器，对步骤3）的培养皿中的叶片沿叶中脉两侧扎孔，孔距1.5～2 cm，将其中1个培养皿盖上培养皿盖子成为对比培养皿，对其它培养皿，用灭过菌的镊子夹一块步骤1）准备的菌丝块，放到叶片扎有孔的位置上，盖上培养皿盖子成为试验培养皿； 5）、培养：把步骤4）的装有叶片的试验培养皿和对比培养皿放到一陶瓷盘或塑料箱里，并在上面覆盖湿毛巾后再放到温度为27～29℃的培养箱里培养；48小时后，去掉湿毛巾、陶瓷盘或塑料盘和试验培养皿中的菌丝块，再放到培养箱里继续培养，培养期间每2～3天往叶片两端的纸巾滴加灭过菌的清水，使纸巾保湿；6）、菌株的致病性评价：步骤5）的试验培养皿和对比培养皿继续培养5～7天后，检查发病情况，如对比培养皿中叶片无病斑，再根据试验培养皿中叶片病斑的有无，判断菌株有无致病性。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈健文，刘睿，杨湛端，邓海华，齐永文，徐苑娴，
申请(专利权)人：广州甘蔗糖业研究所，
类型：发明
国别省市：广东;44