半乳糖配体及其在肝靶向脂质体中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种半乳糖配体分子以及其在肝靶向脂质体中的应用。本发明专利技术提供了一种全新的半乳糖配体分子，可作为肝靶向介导物质，修饰脂质体，使得由其制备的脂质体具有肝靶向性。该半乳糖配体分子是以半乳糖基、固醇基和二元酸二乙酯基为原料酯化而得。本发明专利技术还提供了由半乳糖配体分子修饰的脂质体载体，以及包载药物的肝靶向脂质体复合物，从而实现半乳糖配体分子介导相关药物靶向到肝细胞，降低其对正常组织的毒性，提高药物的肝病防治效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
，具体是涉及一种小分子量半乳糖配体，其合成方法及利用该半乳糖配体制备的肝靶向脂质体及肝靶向药物。
技术介绍
在新药研发中，如何让活性成分有效地靶向到目标细胞或组织中是重要的研究课题之一。例如，不论某药物的药理作用如何好，如果不能到达需治疗的组织，如病灶部位，也不能达到期望的药理效果。除了局部给药方法外，通常，活性药物成分(药物)，需要经过口服或注射的方式给药，药物经血液运输达到作用部位后发挥其药理作用。如果药物不能有效到达治疗组织，就需要加大药物的给药剂量，但药物的副作用随之增加。为了提高药物在靶点部位的聚集，需要供助载体、配体或抗体将药物通过胃肠道、或全身血液循环而选择性地浓集定位于靶组织、靶器官、靶细胞或细胞内结构，我们称这种定向的给药方式为靶向给药系统。去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)是位于肝实质细胞表面的内吞性受体，可专一识别未端带有非还原性半乳糖残基的糖蛋白或小分子化合物。由于ASGPR是肝实质细胞特有受体，专一存在于肝实质细胞表面，因此ASGPR成为肝脏定向转移的最佳受体，为肝癌的治疗、肝脏基因的定向表达和肝功能检测提供了良好的研究途径。利用ASGPR的特性，可设计一种含半乳糖配基的小分子化合物，将其共价偶联于脂质体表面得到肝脏靶向脂质体，用于装载药物发挥导向作用，选择性提高肝实质细胞内的药物浓度、延长作用于肝部位药物的时效、同时减少给药剂量、降低药物毒性，提高药物的治疗指数。其中可被ASGPR专一性识别的未端带有非还原性半乳糖残基的糖蛋白或小分子化合物，我们称之为半乳糖配体。目前半乳糖配体分子的合成多采用化学合成法。化学合成法工艺较复杂，合成步骤多，产率较低，所用试剂多含有一定毒性。例如，Shao-ning等(Wang S N，Deng Y H，Xu H，et al.Synthesis of a novel galactosylated lipid and its application to the hepatocyte-selective targeting of liposomal doxorubicin[J].Eur J Pharm Biopharm，2006，62(1)：32-38.)用胆固醇、乳糖酸钙、乙二胺、琥珀酸酐等为原料，分三步合成目标产物：第一步将乳糖酸脱水形成内酯，然后与乙二胺酰化生成1-N-[O-β-D-Galactopyranosyl-(1，4)-D-Gluconamide]-2-N`-methylamine(LA-ED)；第二步胆固醇、琥珀酸酐和N-羟基琥珀酰亚胺生成N-Hydroxysuccinimidly5-Cholesten-3-yloxy Succinate(CHS-NHS)；第三步LA-ED与CHS-NHS生成目标产物(5-Cholesten-3-yl)4-oxo-4-[2-(lactobionyl amido)ethylamido]butanoate(CHS-ED-LA)，如果以乳糖酸钙为起始原料计算收率，最终得率为10.8％，前述反应过程可参见下文所列反应式：又比如，Leo等(Sliedregt L A，Rensen P C，Rump E T，et al.Design and synthesis of novel amphiphilic dendritic galactosides for selective targeting of liposomes to the hepatic asialoglycoprotein receptor[J].J Med Chem，1999，42(4)：609-618.)用化学法合成一种带三个半乳糖单元配体分子，合成步骤达6步之多，最终收率约为0.1％，这种合成效率远不能满足实际生产需求。总结以往公开有关半乳糖配体分子的制备方法，尚存在以下不足：1、文献中记录的半乳糖配体分子的制备方法都是采用化学法，所用试剂和反应介质多有毒性，而且反应后很难除尽，产品很难满足注射制剂的质量要求。2、化学合成法步骤较多，而且副产物多，产品纯化困难，只能满足实验室少量制备要求，不适用工业化生产。3、合成产率低，目前采用化学合成法最高得率仅为10％左右。4、化学合成法所用的试剂和反应所产生的副产物一般很难回收再利用，对环境造成一定的污染。除此之外，上述现有方法合成的半乳糖配体分子结构，不能轻易地任意延长碳桥的长度来获得不同链长的配体分子。而分子中半乳糖基与脂质体表层的空间距离可以显著影响ASGPR对脂质体的识别能力，一般来说，距离越长，ASGPR对半乳糖化脂质体的识别能力越高。故，现有方法合成的配体分子很难调整被ASGPR识别的能力。同时，背技术提到的半乳糖配体分子呈正电性，与带负电性的磷脂耦联制备脂质体时，会降低脂质体ZETA电位，导致得到脂质体不稳定，使制备肝脏靶向脂质体时，收率低。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术目的之一是提供一种新型的半乳糖配体分子，其具有至少与现有技术的半乳糖配体分子相当或更佳的特性，便于与脂质体耦联制备肝靶向脂质体。本专利技术的半乳糖配体分子，其包括三个部分：半乳糖基、长链碳桥和固醇基，其化学结构式(I)为：其中n为0到99的整数，较佳为1-50，更佳为5-20；其中R为固醇基，选自以下结构中的一种：上述固醇基分别来源于菜籽固醇、胆固醇、麦角固醇、谷固醇及豆固醇。R’为半乳糖基，反应位点为C-6位，选自以下结构中的一种：所述的半乳糖基分别来源于乳糖醇、半乳糖及乳糖。上述n可以取值0-99之间，通过选择不同链长的酯基化合物作为碳桥，连接在半乳糖基和固醇基之间，可以任意延长碳桥的长度来获得不同链长的配体分子，以增加ASGPR对载体的识别能力。本专利技术半乳糖配体分子为几乎呈中性分子或略带负电，与带负电的脂质体耦联后，不会降低脂质体的ZETA电位，故脂质体稳定性更佳。本专利技术的半乳糖配体分子的一端含有可被去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)识别的半乳糖残基，另一端含有固醇基，可用于耦联在脂质体表面而发挥肝靶向作用。本专利技术另一个目的是提供一种新的半乳糖配体分子合成方法，可避免使用有毒化学试剂和原料，满足制作注射剂型靶向药物的质量要求，对环境无污染，且合成步骤简单，副产物少，纯化容易。本专利技术的半乳糖配体分子是采用固醇、乳糖醇(或乳糖或半乳糖)与二乙烯酯在酶的催化酯化而成。具体地，本专利技术的合成方法是在非水相中，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种半乳糖配体，其分子结构式I为：其中n为0到99的整数；其中R为固醇基，选自以下结构中的一种：R’为半乳糖基，反应位点为C‑6位，R’选自以下结构中的一种：

【技术特征摘要】
1.一种半乳糖配体，其分子结构式I为：
其中n为0到99的整数；
其中R为固醇基，选自以下结构中的一种：
R’为半乳糖基，反应位点为C-6位，R’选自以下结构中的一种：
2.一种肝靶向配体脂质体，其特征是，将权利要求1所述的半乳糖配体
共价耦联于脂质体表面而形成。
3.根据权利要求2所述的肝靶向配体脂质体，其特征是，所述肝靶向配
体脂质体是由权利要求1所述的半乳糖配体与磷脂及胆固醇组成，其中，
各组分配...

【专利技术属性】
技术研发人员：程怡，高幼衡，陈宇潮，郑品劲，
申请(专利权)人：程怡，
类型：发明
国别省市：广东;44