一种黑曲霉孢子悬浮液的制备方法及黑曲霉孢子的储存方法技术

本发明专利技术公开了一种黑曲霉孢子悬浮液的制备方法，其中，该方法包括将黑曲霉孢子制备成黑曲霉孢子悬浮液，所述黑曲霉孢子悬浮液的pH值为1-2.5。本发明专利技术还公开了一种黑曲霉孢子的储存方法，其中，该方法包括将黑曲霉孢子制备成黑曲霉孢子悬浮液，所述黑曲霉孢子悬浮液的制备方法为本发明专利技术提供的方法。采用本发明专利技术的方法，能够有效地降低黑曲霉孢子在储存期间的染菌率，从而能够提高黑曲霉种子液的质量，并提高柠檬酸的发酵水平。

【技术实现步骤摘要】
一种黑曲霉孢子悬浮液的制备方法及黑曲霉孢子的储存方法
本专利技术涉及一种黑曲霉孢子悬浮液的制备方法，以及一种黑曲霉孢子的储存方法。
技术介绍
柠檬酸安全无毒，是目前世界上产量最大的发酵有机酸。大量应用于化工、医药、环保、食品等领域，如作为酸味剂、调味剂及防腐剂、保鲜剂、缓冲剂、螯合剂。在化工行业、化妆品行业及洗涤行业中可作抗氧化剂、增塑剂、洗涤剂。在医药行业中可作抗凝剂。发酵制备柠檬酸的工艺通常为：制备黑曲霉麸曲，再将黑曲霉麸曲接种到种子罐的种子培养基中进行培养，得到黑曲霉种子液，再将该黑曲霉种子液接种到发酵罐的发酵培养基中进行发酵，得到柠檬酸发酵液。由于受工艺的限制，通常无法使用新鲜的黑曲霉麸曲制备黑曲霉种子液，而是先将制备好的黑曲霉麸曲置于一定的环境中进行储存（使用的黑曲霉麸曲一般需要储存24-48小时），待使用时再将其取出进行扩大培养制备黑曲霉种子液，并进行后续的柠檬酸发酵。但现有工艺的缺点是：现有方法制备的黑曲霉麸曲在储存的过程中极易染菌，尤其是在春夏季节其染菌率更高。而采用染菌的黑曲霉麸曲进行扩大培养，得到的种子液质量较低，从而影响最终的柠檬酸发酵水平。杂菌过多时，甚至会出现倒罐的现象，将给生产造成严重的损失。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服现有方法制备的黑曲霉麸曲在储存过程中易染菌的缺陷，提供一种在储存过程中染菌率低的黑曲霉孢子悬浮液的制备方法，以及一种黑曲霉孢子的储存方法。本专利技术的专利技术人发现，在柠檬酸发酵过程中，发酵水平较低的原因在于：传统的黑曲霉麸曲在储存期间易滋生杂菌，将带有杂菌的黑曲霉麸曲接入种子罐中进行种子液的制备时，杂菌会迅速生长，从而会消耗种子罐内的大量营养物质。在这种带有杂菌生长的环境下生长的黑曲霉孢子，生长会受到极大的抑制，菌球形态松散，种子液的质量较低。当将这样的种子液接入发酵罐中进行发酵时，一方面，带入的杂菌同样也会消耗发酵罐中的大部分营养物质，使得柠檬酸的发酵转化率降低；另一方面，将带有杂菌的种子液接入发酵罐后，发酵培养基的粘度会升高，使得发酵产酸变慢，从而会延长发酵周期；再一方面，生长状态较差的黑曲霉种子无法进行高效的产酸，使得发酵的酸度降低。因此，降低黑曲霉麸曲在储存过程中的染菌率是提高柠檬酸发酵水平的关键。本专利技术的专利技术人首先想到的是，一方面，在允许的范围内增加用于制备黑曲霉孢子的原料的灭菌时间和灭菌温度，以将原料中的杂菌充分致死；另一方面，对用于储存黑曲霉孢子的容器采用多种方法或多种方法相结合进行灭菌，如，高温蒸汽灭菌、酒精消毒、干热灭菌；再一方面，保证储存环境的无菌性。但结果却都收效甚微。本专利技术的专利技术人意外的发现，将黑曲霉孢子在无菌水中制备成黑曲霉孢子悬浮液，并以黑曲霉孢子悬浮液的形式进行储存能够在一定程度上降低染菌率，但结果仍不理想。由于黑曲霉孢子在种子培养基中吸水膨胀萌发的最适pH值为5-7.5，而无菌水本身的pH值也在此范围内，因此，为了不对黑曲霉孢子造成损伤，并使得储存的黑曲霉孢子能够较快的适应种子培养基的环境以及节省操作步骤，故一般不对黑曲霉孢子悬浮液的pH值进行调节。然而，本专利技术的专利技术人却意外的发现，将黑曲霉孢子悬浮液的pH值调节至1-2.5，在储存过程中不但能够进一步有效地降低染菌率，而且也不会影响黑曲霉孢子的存活率，低pH值下储存的黑曲霉孢子对黑曲霉种子的培养周期也不会造成影响。因此，将黑曲霉麸曲制备成黑曲霉孢子悬浮液，并将黑曲霉孢子悬浮液的pH值调节至1-2.5，能够有效地降低黑曲霉孢子在储存期间的染菌率，从而能够提高黑曲霉种子液的质量，并提高柠檬酸的发酵水平。基于以上发现，一方面，本专利技术提供了一种黑曲霉孢子悬浮液的制备方法，其中，该方法包括将黑曲霉孢子制备成黑曲霉孢子悬浮液，所述黑曲霉孢子悬浮液的pH值为1-2.5。优选地，所述黑曲霉孢子悬浮液的pH值为2-2.5。另一方面，本专利技术还提供了一种黑曲霉孢子的储存方法，其中，该方法包括将黑曲霉孢子制备成黑曲霉孢子悬浮液，所述黑曲霉孢子悬浮液的制备方法为本专利技术提供的方法。采用本专利技术的方法，将黑曲霉孢子制备成黑曲霉孢子悬浮液，将黑曲霉孢子悬浮液的pH值调节至1-2.5，优选调节至2-2.5，并将该黑曲霉孢子以悬浮液的形式进行储存，不但抑制了多数中性及碱性细菌的生长，而且还能有效抑制酸性细菌的生长，因此，能够有效地降低黑曲霉孢子在储存期间的染菌率，从而能够提高黑曲霉种子液的质量，并提高柠檬酸的发酵水平。本专利技术的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。具体实施方式以下对本专利技术的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限制本专利技术。一方面，本专利技术提供了一种黑曲霉孢子悬浮液的制备方法，其中，该方法包括将黑曲霉孢子制备成黑曲霉孢子悬浮液，所述黑曲霉孢子悬浮液的pH值为1-2.5。通常在发酵生产上，当发酵受到杂菌污染时，一般会对用于发酵的原料（例如，种子液、发酵培养基等）及设备（例如，发酵罐等），甚至发酵的环境等进行逐一并逐级的检查，直至寻找到杂菌的污染源头。通过采用上述方法发现，在柠檬酸发酵过程中的杂菌污染主要源于黑曲霉麸曲。主要原因为：由于受现有工艺的限制，在发酵过程中无法使用新鲜的黑曲霉麸曲制备黑曲霉种子液，而在黑曲霉麸曲储存的过程中，极易污染杂菌。但本专利技术的专利技术人发现，发现污染源后，采用通常的处理方法，即对用于制备黑曲霉麸曲的原料，储存黑曲霉麸曲的容器，以及黑曲霉的储存环境等的灭菌状况进行了严格的控制，但仍不能有效地抑制杂菌的污染。本专利技术的专利技术人意外的发现，将黑曲霉麸曲中的黑曲霉孢子制备成黑曲霉孢子悬浮液，并以黑曲霉孢子悬浮液的形式进行储存，能够在一定程度上降低储存过程中黑曲霉孢子的染菌率。本专利技术的专利技术人又意外的发现，将黑曲霉孢子悬浮液的pH值调节至1-2.5，不但能够进一步有效地降低储存过程中黑曲霉孢子的染菌率，而且不会影响黑曲霉孢子的存活率，低pH值下储存的黑曲霉孢子对黑曲霉种子的培养周期也不会造成影响。更优选地，所述黑曲霉孢子悬浮液的pH值为2-2.5。当将黑曲霉孢子悬浮液的pH值调节至2-2.5时，储存过程中黑曲霉孢子能够更好的存活，且在制备种子液时，黑曲霉孢子能更好的适应黑曲霉种子培养基的环境。从而能够进一步提高发酵效率。根据本专利技术的黑曲霉孢子悬浮液的制备方法，调节pH值的方法可以为本领域常用的方法，例如用酸性试剂调节；所述酸性试剂可以是本领域常用的各种酸性试剂，只要不影响黑曲霉孢子的存活就可以，优选地，所述酸性试剂选自柠檬酸、盐酸和硫酸中的一种或多种。由于该孢子悬浮液之后用于生产柠檬酸，因此，更优选地，所述酸性试剂为柠檬酸。根据本专利技术的黑曲霉孢子悬浮液的制备方法，将黑曲霉麸曲中的黑曲霉孢子制成孢子悬浮液的方法可以采用本领域技术人员公知的各种方法，例如，可以直接将黑曲霉麸曲与无菌水混合、搅拌，使黑曲霉悬孢子悬浮于无菌水中制得孢子悬浮液。根据本专利技术的黑曲霉孢子悬浮液的制备方法，为了使黑曲霉孢子充分从麸曲中游离出来，并且能够得到均匀分散的孢子悬浮液。优选地，将黑曲霉在无菌水中进行分散得到孢子悬浮液的方法还包括：将黑曲霉分散到无菌水中，在300-1000rpm条件下，搅拌30-60min；然后在20000-40000频本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黑曲霉孢子悬浮液的制备方法，其特征在于，该方法包括将黑曲霉孢子制备成黑曲霉孢子悬浮液，所述黑曲霉孢子悬浮液的pH值为1‑2.5。

【技术特征摘要】
1.一种黑曲霉孢子悬浮液的制备方法，其特征在于，该方法包括将黑曲霉孢子制备成黑曲霉孢子悬浮液，所述黑曲霉孢子悬浮液的pH值为1-2.5；其中，所述黑曲霉孢子以黑曲霉麸曲的形式存在，将黑曲霉孢子制备成黑曲霉孢子悬浮液的方法包括：将黑曲霉麸曲中的黑曲霉孢子分散于无菌水中，得到黑曲霉孢子悬浮液。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述黑曲霉孢子悬浮液的pH值为2-2.5。3.根据权利要求1所述的方法，其中，将黑曲霉孢子分散于无菌水中的方法包括，将黑曲霉麸曲与无菌水混合，...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊结青，卢宗梅，钟华，刘梦涵，
申请(专利权)人：中粮生物化学安徽股份有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34