从扁藻中提取虾青素的方法技术

本发明专利技术提供了一种从扁藻中提取虾青素的方法，涉及提取工艺技术领域。该方法的步骤如下：（1）筛选出克隆号为MACC/P66的扁藻作为藻种；（2）把藻种用修正的厄尔德-施赖伯培养液进行培养，藻种数天后开始分泌出一种红色色素，形成红色色素培养液；（3）分离红色色素培养液和藻种；（4）用离子交换柱从红色色素培养液中分离出红色色素，减压浓缩并干燥后得到红色色素粉末；（5）通过凝胶色谱柱对红色色素中的各组分进行层析，得到纯虾青素以及红色色素粉末中各成分的含量。运用本发明专利技术提供的方法，虾青素含量在藻种所分泌的红色色素中高达16%，同时虾青素的重量能达到藻种重量的16%，而且该方法不会导致藻种死亡，藻种能继续用于生产虾青素。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术提供了一种，涉及提取工艺
。该方法的步骤如下：（1）筛选出克隆号为MACC/P66的扁藻作为藻种；（2）把藻种用修正的厄尔德-施赖伯培养液进行培养，藻种数天后开始分泌出一种红色色素，形成红色色素培养液；（3）分离红色色素培养液和藻种；（4）用离子交换柱从红色色素培养液中分离出红色色素，减压浓缩并干燥后得到红色色素粉末；（5）通过凝胶色谱柱对红色色素中的各组分进行层析，得到纯虾青素以及红色色素粉末中各成分的含量。运用本专利技术提供的方法，虾青素含量在藻种所分泌的红色色素中高达16%，同时虾青素的重量能达到藻种重量的16%，而且该方法不会导致藻种死亡，藻种能继续用于生产虾青素。【专利说明】从扁漂中提取虫下青素的方法
本专利技术涉及提取工艺
，尤其涉及一种。
技术介绍
目前，天然的虾青素主要从雨生红球藻中提取，雨生红球藻将虾青素积累储藏到藻体内，提取虾青素时需要破壁，因此生产成本较高。雨生红球藻中的虾青素含量只能达到藻体重量的1.5%?3.0%，虾青素的含量较低。
技术实现思路
本专利技术的目的在于解决目前从雨生红球藻中提取天然虾青素时需要破壁从而导致雨生红球藻死亡，以及雨生红球藻中的虾青素含量不高的问题，提供一种，运用本专利技术提供的方法提取虾青素，虾青素含量在藻种所分泌的红色色素中高达16%，同时虾青素的重量能达到藻种重量的16%，而且该方法不会导致藻种死亡，藻种能继续用于生产虾青素。 为实现上述目的，本专利技术提供的技术方案如下:本专利技术提供的包括以下步骤:(1)扁藻的筛选从扁藻属中筛选出克隆号为MACC/P66的扁藻作为藻种；(2)藻种的培养将维生素用蒸馏水溶解，再将PH值调整至4.5?5.0，经微孔滤膜过滤后得到维生素水溶液，把维生素水溶液加入厄尔德-施赖伯培养液得到修正的厄尔德-施赖伯培养液，将藻种用修正的厄尔德-施赖伯培养液进行培养，藻种在培养数天后开始分泌出一种红色色素，该红色色素溶解于修正的厄尔德-施赖伯培养液中形成红色色素培养液；(3)红色色素培养液和藻种的分离将经过步骤(2)后形成的红色色素培养液和藻种进行分离，分离出来的藻种放入到新的修正的厄尔德-施赖伯培养液中继续培养；(4)从红色色素培养液中分离出红色色素:将红色色素培养液加入到离子交换柱中，使离子交换柱中的离子交换树脂吸附红色色素培养液中的红色色素，然后用蒸馏水冲洗离子交换柱，再用氨水洗脱被吸附在离子交换柱上的红色色素，同时收集被洗脱出来的红色色素溶液，然后对红色色素溶液进行减压浓缩并干燥，得到红色色素粉末；(5)检验红色色素粉末的成分并分离出虾青素用蒸馏水溶解步骤(4)得到的红色色素粉末，得到样品溶液，然后将样品溶液通过凝胶色谱柱对红色色素进行层析，得到纯虾青素以及红色色素粉末中各成分的含量。 优选的，所述修正的厄尔德-施赖伯培养液中维生素的含量小于1%。 优选的，所述维生素为水溶性维生素中的一种或几种。 优选的，所述维生素水溶液中用于调整pH值的酸为盐酸；在所述步骤(4)中，用蒸馏水冲洗所述离子交换柱至无氯离子检出为止。 优选的，所述步骤(3)的分离方法为离心分离。 优选的，所述离子交换柱在进行步骤(4)之前通过以下方法进行处理:将离子交换树脂用强碱溶液在室温下浸泡20?22h，然后用蒸馏水将离子交换树脂上的强碱洗干净，再把离子交换树脂放入到含有金属阳离子的溶液中浸泡并搅拌2?3h，然后用蒸馏水清洗离子交换树脂，最后装柱。 优选的，所述强碱溶液为NaOH溶液，所述含有金属阳离子的溶液为MnS04溶液。 优选的，所述凝胶色谱柱为葡聚糖凝胶G-1O色谱柱。 本专利技术的有益效果:选择克隆号为MACC/P66的扁藻作为藻种，藻种能够直接将红色色素分泌到培养液中，而经检测,红色色素中含有16%的虾青素，同时虾青素的重量能达到藻种重量的16%，虾青素含量较高，而且从藻种中提取虾青素，无需破壁，不会因此导致藻种死亡，藻种能继续用于生产虾青素，大大降低了提取虾青素的成本；另外，红色色素具有对光和热稳定、水溶性好的特点，红色色素通过凝胶色谱柱层析，即可得到纯天然虾青素；而且该方法是在室内采用密闭的生物反应器内进行的，因此操作过程中的条件易于控制，藻种不会流失而污染周边环境，而外来物种也无法侵入密闭的生物反应器。 【具体实施方式】 以下结合附图对本专利技术做进一步的说明，以下列举的实施例仅代表一种或几种最佳实施方式，不应该构成对本专利技术的限制。 本专利技术提供的包括以下步骤:(I)扁藻的筛选在显微镜下从扁藻属中筛选出克隆号为MACC/P66的扁藻作为藻种。其中，克隆号为MACC/P66的扁藻呈椭球状，藻体大小为3.0?4.2 μ mX9.0?10.5 μ m，顶部生长有四根鞭毛，绝大多数以单细胞形式存在。 (2)藻种的培养将维生素用少量蒸馏水溶解，再用浓度为IN的盐酸将pH值调整至4.5?5.0，再用蒸馏水将维生素的含量稀释至小于或等于0.1%，经4.5 μ m微孔滤膜过滤后得到维生素水溶液，把维生素水溶液加入厄尔德-施赖伯培养液得到修正的厄尔德-施赖伯培养液，其中，修正的厄尔德-施赖伯培养液中维生素的含量小于0.1%，维生素为水溶性维生素中的一种或几种。 将藻种加入到修正的厄尔德-施赖伯培养液中，在光照5000LUX，30° C的条件下进行培养，藻种在培养一周后开始分泌出一种红色色素，该红色色素溶解于修正的厄尔德-施赖伯培养液中形成红色色素培养液。 (3)红色色素培养液和藻种的分离将经过步骤(2)后形成的红色色素培养液和藻种在3000rpm下离心15分钟，分离出来的藻种放入到新的修正的厄尔德-施赖伯培养液中继续培养。 其中，红色色素培养液经国产721型分光光度仪检测，当波长为400nm时，0.D.>0.30。 (4)从红色色素培养液中分离出红色色素本步骤选择使用离子交换柱将红色色素从红色色素培养液中分离出来，其中，离子交换树脂为D401离子交换树脂，在进行步骤(4)之前离子交换树脂通过以下方法进行处理:将500g离子交换树脂用100ml浓度为40%的NaOH溶液在室温下浸泡20?22h，然后用蒸馏水将离子交换树脂上的NaOH溶液洗干净，再把离子交换树脂放入到100ml浓度为20%的MnS04溶液中浸泡并搅拌2?3h，然后用蒸馏水清洗D401离子交换树脂，最后将离子交换树脂装入到尺寸为70cmX4.0cm的柱子中。 将红色色素培养液加入到离子交换柱中，控制流速为lL/h，然后用蒸馏水冲洗离子交换柱至无氯离子检出为止，再用浓度为0.5N的氨水洗脱被吸附在离子交换柱上的红色色素，同时收集被洗脱出来的红色色素溶液，然后对红色色素溶液在35°C下进行减压浓缩并干燥，得到红色色素粉末。 (5)检验红色色素粉末的成分并分离出虾青素用蒸馏水溶解步骤(4)得到的红色色素粉末，得到样品溶液，然后将样品溶液通过葡聚糖凝胶G-1O色谱柱对红色色素进行层析，得到纯虾青素以及红色色素粉末中各成分的含量。 以下为对红色色素粉末及从红色色素粉末中分离出来的虾青素进行检测所得到的结果:经中国军事医学科学院二所检验，红色色素粉末中虾青素的含量为16%，经过葡聚糖凝胶G-1O色谱柱分离本文档来自技高网...

【技术保护点】
从扁藻中提取虾青素的方法，其特征在于，该方法的步骤如下：（1）扁藻的筛选从扁藻属中筛选出克隆号为MACC/P66的扁藻作为藻种；（2）藻种的培养将维生素用蒸馏水溶解，再将pH值调整至4.5～5.0，经微孔滤膜过滤后得到维生素水溶液，把维生素水溶液加入厄尔德‑施赖伯培养液得到修正的厄尔德‑施赖伯培养液，将藻种用修正的厄尔德‑施赖伯培养液进行培养，藻种在培养数天后开始分泌出一种红色色素，该红色色素溶解于修正的厄尔德‑施赖伯培养液中形成红色色素培养液；（3）红色色素培养液和藻种的分离将经过步骤（2）后形成的红色色素培养液和藻种进行分离，分离出来的藻种放入到新的修正的厄尔德‑施赖伯培养液中继续培养；（4）从红色色素培养液中分离出红色色素：将红色色素培养液加入到离子交换柱中，使离子交换柱中的离子交换树脂吸附红色色素培养液中的红色色素，然后用蒸馏水冲洗离子交换柱，再用氨水洗脱被吸附在离子交换柱上的红色色素，同时收集被洗脱出来的红色色素溶液，然后对红色色素溶液进行减压浓缩并干燥，得到红色色素粉末；（5）检验红色色素粉末的成分并分离出虾青素用蒸馏水溶解步骤（4）得到的红色色素粉末，得到样品溶液，然后将样品溶液通过凝胶色谱柱对红色色素进行层析，得到纯虾青素以及红色色素粉末中各成分的含量。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张玉石，
申请(专利权)人：张玉石，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA