本发明专利技术涉及药物领域，特别是涉及青钱柳的应用领域，更为具体的说是涉及青钱柳在制备用于抑制apoB48分泌的药物中的应用。利用青钱柳叶醇提物对肠道apoB48的合成、分泌的抑制作用，达到有效地控制由长期外源性脂质过度摄入造成的高血脂症的目的。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及药物领域，特别是涉及青钱柳的应用领域，更为具体的说是涉及青钱柳在制备用于抑制apoB48分泌的药物中的应用。利用青钱柳叶醇提物对肠道apoB48的合成、分泌的抑制作用，达到有效地控制由长期外源性脂质过度摄入造成的高血脂症的目的。【专利说明】青钱柳在制备用于抑制肠道apoB48合成、分泌的药物中的应用
本专利技术涉及药物领域，特别是涉及青钱柳的应用领域，更为具体的说是涉及青钱柳在制备用于抑制apoB48合成、分泌的药物中的应用。
技术介绍
脂质代谢紊乱是指多种原因导致的一种全身血脂代谢异常的高发疾病，体内脂质代谢紊乱，血液粘稠度将会增加，血管壁上极易沉积有血脂，从而易引发动脉粥样硬化、心肌梗塞、脑中风、冠心病等疾病。 体内脂质有两个来源:一是来自食物的外源性脂质主要包括大部分甘油三酯和少部分胆固醇，经消化后由小肠吸收被利用；二是由人体自身合成的内源性脂质。随着生活水平提高，不健康饮食习惯日益加剧，导致日常摄取的食物中高脂肪、高胆固醇过多，因此外源性脂质过度吸收已成为引发脂质代谢紊乱及相关疾病的重要诱因。通过药物调控外源性脂质的吸收代谢，对防治此类疾病具有重要意义。 外源性脂质吸收和代谢是一个复杂的生理过程。由于脂质不溶或微溶于水，其吸收代谢过程中必须与一种特殊蛋白质结合形成脂蛋白，这种担负着运转脂类的蛋白质被称为载脂蛋白(Apolipoprotein, Apo)。 研究小肠来源ApoB48的表达量的改变会对小肠脂蛋白的合成，乃至肝脏脂蛋白的合成产生重要的影响。研究表明，小肠ApoB48的产量增加会使更多的肝脏被运送至肝脏，肝脏VLDL的产量也会增加。此外，Apo B48表达异常不仅导致高脂血症，而且还与动脉粥样硬化、肥胖等疾病密切相关。胰岛素抵抗状态下，CM在血中清除率降低，CM残基易沉积在血管壁；肥胖病人体内，ApoB48的水平也显著提高。因此对小肠apoB48的调节有助于改善外源性脂质的摄入，有效地控制动脉粥样硬化、肥胖、高血脂症等疾病的发生。 现在用于临床的肠道降胆固醇药物主要为胆汁酸螯合剂，近几年也研发出新的肠道降脂药物，如MTTP抑制剂和apoB表达抑制剂。通过减少胆汁酸重吸收，抑制MTTP和apoB的表达来调节体内的高脂水平和外源性脂质的过渡摄入，但是apoB表达抑制剂主要集中在apoB-100降脂剂药物的开发上，因此相关肠道apoB48的药物开发有限，不能完全地控制因脂质过多摄入而引发的高血脂症，造成病情延误。
技术实现思路
本专利技术针对目前相关肠道调节apoB48药物开发的局限性，公开了青钱柳在制备用于抑制apoB48合成、分泌药物中的应用。 更进一步地说，所述青钱柳为青钱柳醇提物。 通过研究，我们发现青钱柳叶醇提物能够抑制apoB48的过度分泌，特别地，是对于长期高脂饮食造成的高血脂症引起的apoB48的抑制效果。因此，我们基于这一理论分别用不同方法做了验证试验，表明青钱柳对于高脂状态下，肠道apoB48的分泌具有抑制作用。 【专利附图】【附图说明】 图1为青钱柳醇提物在高脂小鼠血清中apoB48的蛋白电泳分析图。 图2为青钱柳醇提物在高脂小鼠血清中apoB48的Elisa分析图。 【具体实施方式】 本实验实施例部分所用的材料如下: KM小鼠(购买)，青钱柳醇提物(自制)，总胆固醇试剂盒(南京建成生物工程研究所),apoB48酶联免疫分析(Elisa)试剂盒(南京森贝伽生物科技有限公司)，山羊抗apoB抗体(Santa Cruz B1technology, Inc.),兔抗山羊辣根过氧化物酶二抗(Cell SignalingTechnology, Inc.),酶联免疫检测仪(B1Tek Corporat1n),垂直电泳槽(B1-rad),稳压稳流电泳仪(南京科宝仪器研究所)，控温离心机(Beckman Coulter), X线胶片暗匣(上海跃进医用光学器械厂)以上未提及的材料，除非特别说明，否则均为市售产品。 实施例1青钱柳醇提物的制备 青钱柳叶在提取前，去除杂质和较粗的枝干。取生药量2.5kg，采用8倍量80%的乙醇回流提取三次，每次2h，合并提取物，得浸膏466g。浸膏溶于0.5% CMC-Na中，制成悬浮液。 实施例2血清样本的制备 40只雄性KM小鼠适应性饲养I周，随机分为两组，空白组10只，给予普通饲料和普通水，余下造模组30只，给予高脂饲料6周。6周后，小鼠眼眶取血(取血前禁食12h)，3000r/min离心15min，取血清测量空腹总胆固醇(TC)水平，以TC > 3.85mmol/L(150mg/dL)为高血脂症成功模型，按TC值随机分为3组，每组10只。高脂模型组12h)，3000r/min离心15min，取血清测量空腹总胆固醇(TC)水平，以TC > 3.85mmol/L (150mg/dL)为高血脂症成功模型，按TC值随机分为3组，每组10只。高脂模型组(HC)，青钱柳醇提物低剂量组(EEL，2g/kg)，醇提取物中剂量组(EEM，4g/kg)，醇提取物高剂量组(EHl，8g/kg)。各组给予CMC-Na悬浮液，空白组和高脂模型组给予等体积0.5% CMC-Na。灌胃给药4周。 4周后小鼠禁食过夜，用10%水合氯醛(0.3mL/100g)麻醉，眼眶取全血，3000r/min,离心 15min 得血清。取 200 μ L 血清，加 4mI KBr 溶液(density = 1.006g/ml)，60，000Xg, 15°C离心3h。离心得样品上层液。 实施例3样品apoB48含量的测定 实施例3.1蛋白质印迹法测定apoB48含量 实施例3.1.1 SDS-PAGE凝胶电泳工作液配制 A液(丙烯酰胺储存液，10mL):29.2g丙烯酰胺，0.8g双丙烯酰胺，置通风橱操作，加双蒸水至10mL,缓慢搅拌直至丙烯酰胺粉末完全溶解，并以石蜡封口，4°C储存。 B液(4X 分离胶缓冲液，10mL):75mL 2M Tris-HCl (PH 8.8)，4mL 10% SDS，21mL双蒸水，4 °C储存。 C液(4X 堆积胶缓冲液，10mL):50mL IM Tris-HCl (PH 6.8), 4mL 10% SDS,46mL 双蒸水，密闭，4°C储存。 电泳缓冲液(IL):3g Tris-base，14.4g甘氨酸，Ig SDS，加双蒸水至 1L，PH 8.3左右，室温保存。 5Χ 样品缓冲液(1mL):0.6mL IM Tris-HCl (PH6.8), 5mL 50% 的甘油，2mL 10%SDS, 0.5mL 2-巯基乙醇，ImL I %溴酚蓝，0.9mL的双蒸水，可在4°C储存数周。 实施例3.L 2电泳 制备10%聚丙烯酰胺分离胶:A液3.96mL, B液3mL，双蒸水5.04mL, 10%过硫酸胺60 μ L，TEMED 6 μ L，总量12mL ;制备聚丙烯酰胺堆积胶:A液3.45mL, C液1.5mL,双蒸水3.45mL, 10%过硫酸胺45 μ L，TEMED7.5 μ L，总量6mL ;将分离胶注入垂直电泳槽的玻璃平板夹层中，本文档来自技高网...
【技术保护点】
青钱柳在制备用于抑制肠道apoB48合成、分泌的药物中的应用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张健，蒋翠花，高萌，殷志琦，姚楠，李玥，马永兰，林孜，
申请(专利权)人：江苏省中医药研究院，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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