一种珍珠酶解液及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种珍珠酶解液，其原料包括珍珠粉、乳酸、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二钠盐、蒸馏水。还公开了制备该珍珠酶解液的方法，包括如下步骤，(1)制备乳酸溶液；(2)酶解反应；(3)对酶解产物进行离心，将得到的上清液进行灭菌处理，即得到珍珠酶解液。本发明专利技术的优点在于，从木瓜粉中简便、低成本、高纯度地提取出了木瓜肽酶，采用该肽酶对珍珠粉进行酶解，主要能够得到二十种氨基酸、以及分子量约为300-1000的小分子多肽物质，并且丰富了酶解珍珠粉的种类，使在酶解珍珠时不再只能单一的使用一种酶进行酶解，进一步促进了珍珠粉真正高效的利用。

【技术实现步骤摘要】
一种珍珠酶解液及其制备方法
本专利技术属于生物酶解的
，具体是一种珍珠酶解液及其制备方法。
技术介绍
珍珠是祖国医药宝库中的一颗瑰宝，早在汉朝的“名医别录”至明代的“本草纲目”中对珍珠的疗效均有确切的记载。长期以来人们采用长期服用珍珠粉的方法使肌肤一直保持润滑细腻，但由于珍珠粉中主要的成分是碳酸钙及其他一些成分不易被人体吸收。特别是珍珠中的壳角蛋白质在体内不易分解吸收。因此大大阻碍了珍珠粉的积极作用及它的特殊功能。随着科学技术的不断发展，人们生活水平的不断提高，对珍珠粉的利用开发也有新的设想，国内报道的珍珠水解液、高效珍珠粉等仅仅是将难溶的碳酸钙制成可溶的有机钙，实质上它是碳酸钙及部分微量元素。而壳角蛋白质还未利用。而专利技术名称为“水溶性全成分珍珠粉系列产品新制备方法”CN1051394A的专利申请可食性羧酸或氨基酸置换珍珠中矿物质的碳酸根，使珍珠硬蛋白分离出来，然后用酸、酶二重水解法制得几种水溶性全程分珍珠产品，但均存在一定的不足之处。由于珍珠粉末未能被完全水解成人体能容易吸收的成分，因此目前还存在一定的缺点，特别它的主要成分之一的壳角蛋白质还未被人体完全吸收和充分利用。为了解决这一技术缺陷，申请号为94112053.8的专利公开采用木瓜蛋白酶将珍珠粉酶解，可以得到人体可以吸收的氨基酸以及多肽，但是此法酶解不彻底，酶解得到的多肽片段分子量大，为了提高酶解效率，得到更多小分子肽产品，经过反复试验专利技术此方法。
技术实现思路
为了解决
技术介绍
中所述的技术缺陷，本专利技术公开了一种酶解珍珠液以及制备方法，本专利技术目的在于发现一种天然活性物质能使珍珠粉酶解成人体极易吸收的氨基酸及人体有益的小肽分子，使珍珠粉完全被利用，充分发挥它的特殊功能，打破现有技术只能采用蛋白酶的技术瓶颈。实现上述目的，所采用的技术方案为，本专利技术公开的珍珠酶解液，该酶解液的原料包括珍珠粉、体积浓度为5～10％乳酸溶液、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二钠盐、蒸馏水，上述成分的质量比为15～30:50～100:10～15:1～3:1～3:1000。本专利技术采用木瓜肽酶对珍珠中的壳角蛋白质进行酶解，所采用的原料均无毒副作用，使酶解得到的产物也无任何毒性，从而使该珍珠酶解液应用范围宽广。除此之外，本专利技术还公开了该珍珠酶解液的制备方法，包括如下步骤，(1)制备乳酸溶液，乳酸溶液的体积浓度为5～10％；(2)首先向步骤(1)制备好的乳酸溶液中添加珍珠粉进行酸解反应，酸解反应后离心，得到的沉淀物即为珍珠壳角蛋白，再将珍珠壳角蛋白、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二胺盐、蒸馏水混合，进行酶解反应,珍珠粉、所述乳酸溶液、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二钠盐、蒸馏水的质量比为15～30:50～100:10～15:1～3:1～3:1000，木瓜肽酶的氨基酸序列是如SEQIDNO:1所示的序列；(3)酶解反应后，对酶解产物进行离心，将得到的上清液进行灭菌处理，即得到珍珠酶解液。本专利技术先将珍珠粉用乳酸处理，使其成为可溶性的乳酸钙液。它的主要成分为珍珠活性钙和微量元素，而不溶解部分为珍珠壳角蛋白质，将珍珠壳角蛋白质用天然活性物质木瓜钛酶进行水解，在选择酶解酶时，木瓜粉一般是木瓜乳汁经干燥得到的粉状物质，木瓜乳汁中存在多种酶，主要含有四种半胱氨酸酶:木瓜蛋白酶、木瓜肽酶、木瓜凝乳蛋白酶A和B。除此之外，还含有溶菌酶，Ⅱ型几丁质酶和脂肪酶等，各种酶的氨基酸序列不同，其生化性质也有很大差别。本专利技术经过试验，最终采用木瓜肽酶将珍珠粉酶解，使原来不易被人吸收的珍珠粉中壳角蛋白成为人体易吸收的二十种氨基酸，其中有八种人体必需的氨基酸，以及多肽物质，通过本专利技术的制备方法得到的酶解液中氨基酸总含量为10.19mg/ml-22.82mg/ml，还含有分子量大约300-1000的小分子多肽与氨基酸的混合物在机体内的吸收率和速度都比单纯的氨基酸佳。而它们的生物效价高于纯的氨基酸，显著提高了珍珠粉的有效利用率。优选地，步骤(3)提取木瓜肽酶的方法为：①将木瓜粉溶解于0.1M醋酸-醋酸钠缓冲溶液中；②向①步混合液中加入硫酸铵，使混合液的饱和度达到0.45，放置12-16h后抽滤，将上清液体用质量浓度0.1MNaCl溶液透析；③将②步得到的透析液上柱CM-Sepharose，然后用质量浓度为0.05－1.0MNaCl溶液进行梯度洗脱，收集最后流出的液体；④向③步得到的液体加入硫酸铵直至溶液饱和度达到0.85，放置12-16h后抽滤，将得到的沉淀用质量浓度0.05MNaCl溶液透析；将透析液冷冻干燥即可得到木瓜肽酶粉末。木瓜肽酶的分离纯化不易操作，本专利技术选择该方法将木瓜肽酶提取出来，提取的纯度最高，操作方法最为简便。优选地，步骤(3)中珍珠粉、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二钠盐、蒸馏水的质量比为，所选择的质量配比在成本最低的条件下，酶解的最为充分。优选地，步骤(2)中酶解温度为55～65℃，酶解pH为6～7，酶解时间为12～24h。该参数条件正好可以使珍珠粉充分酶解为小分子多肽和氨基酸。综上，本专利技术的有益效果是，从木瓜粉中简便、低成本、高纯度地提取出了木瓜肽酶，并且木瓜肽酶是一种天然生物活性物质，采用该肽酶对珍珠粉进行酶解，主要能够得到二十种氨基酸、以及分子量约为300-1000的小分子多肽物质，酶解率高，并且得到的氨基酸以及多肽物质能够很好的被人体吸收，显著提高了珍珠粉的有效利用率，并且丰富了酶解珍珠粉的种类，使在酶解珍珠时不再只能单一的使用一种酶进行酶解，进一步促进了珍珠粉真正高效的利用。具体实施方式以下结合具体实施例对本
技术实现思路
作出进一步的说明。在没有特殊说明下，操作方法都是采用的本领域技术人员公知的方法。实施例一：本专利技术开发出的一种珍珠酶解液，该酶解液的原料包括珍珠粉、体积浓度为5％乳酸溶液、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二钠盐、蒸馏水，上述成分的质量比为15:50:15:1:1:1000。本专利技术所采取的原料均无毒副作用，得到的酶解液也无任何毒性，做为保健饮品饮用、化妆品涂于皮肤均没有副作用，将酶解珍珠液按上海药品检验所对药品毒性试验法进行小白鼠灌胃急性毒性LD50试验。结果如下：采用昆明杂种小白鼠，体重为20克，分成雌雄二组。每组10只，同剂量给药，实验观察七天，酶解珍珠液以最大耐受灌胃给药每只1ml，每日灌胃二次，连续三天灌后观察小白鼠的毛色光滑，活动状态良好，其他均属正常，得出急性毒性小白鼠灌胃1ml/20克。小白鼠体重相当于50ml/kg液量灌入动物胃内，均未出现死亡。本品属无毒级。实施例二：本专利技术的珍珠酶解液的原料包括珍珠粉、体积浓度为10％乳酸溶液、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二钠盐、蒸馏水，上述成分的质量比为30:100:10:3:3:1000。制备上述珍珠酶解液的方法包括如下步骤，(1)制备乳酸溶液，乳酸溶液的体积浓度为10％；(2)首先向步骤(1)制备好的乳酸溶液中添加珍珠粉进行酸解反应，酸解反应后离心，得到的沉淀物即为珍珠壳角蛋白，再将珍珠壳角蛋白、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二胺盐、蒸馏水混合，进行酶解反应,珍珠粉、所述乳酸溶液、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二钠盐、蒸馏水的质量比为30:100:10:3:3:1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种珍珠酶解液，其特征在于，该酶解液的原料包括珍珠粉、体积浓度为5～10％乳酸溶液、木瓜肽酶、L‑半胱氨酸、乙二胺四乙酸二钠盐、蒸馏水，上述成分的质量比为15～30:50～100:10～15:1～3:1～3:1000。

【技术特征摘要】
1.一种珍珠酶解液，其特征在于，该酶解液的原料包括珍珠粉、体积浓度为5～10％乳酸溶液、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二钠盐、蒸馏水，上述成分的质量比为15～30:50～100:10～15:1～3:1～3:1000。2.一种制备权利要求1所述珍珠酶解液的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤，(1)制备乳酸溶液，乳酸溶液的体积浓度为5～10％；(2)首先向步骤(1)制备好的乳酸溶液中添加珍珠粉进行酸解反应，酸解反应后离心，得到的沉淀物即为珍珠壳角蛋白，再将珍珠壳角蛋白、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二胺盐、蒸馏水混合，进行酶解反应,珍珠粉、所述乳酸溶液、木瓜肽酶、L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸二钠盐、蒸馏水的质量比为15～30:50～100:10～15:1～3:1～3:1000，木瓜肽酶的氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：丛峰松，王定恩，李朝阳，
申请(专利权)人：上海荣神生物化学有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31