成肌细胞分化促进剂制造技术

本发明专利技术涉及选自下列的肽：Ala-Hyp-Gly，Hyp-Gly-Pro，Leu-Hyp，Glu-Hyp，Gly-Pro-Hyp，Pro-Ala，Hyp-Gly和Pro-Hyp，或其药学可接受的盐，其具有优于常规领域的成肌细胞分化促进效应。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】成肌细胞分化促进剂
本专利技术涉及包含肽分子等的成肌细胞分化促进剂。
技术介绍
最近，运动器官综合征和少肌症(肌肉量和肌肉强度减小,及身体功能降低)的预防等受到关注，及需要由肌肉量和肌肉强度的增加改善该症状。对于健康人也需求肌肉疲乏的预防和肌肉的增强。在肌肉细胞分化的初始过程，未分化的细胞分化为作为肌肉纤维来源的细胞的成肌细胞。成肌细胞进一步分化，及表达特异于肌肉细胞的蛋白。肌肉细胞的分化中的特征性现象是细胞融合，即，单核细胞的成肌细胞融合而分化为作为多核细胞的肌管细胞的现象。而且，通过自成熟的肌管细胞形成具有收缩能力的肌肉纤维的过程而肌肉完成。在成肌细胞分化期间，产生特征性蛋白诸如原肌球蛋白和肌球蛋白重链，并将这些用作分化标志物(非-专利文献1)。肽分子已知具有各种药理学效应。例如，专利文献1描述，二肽诸如Hyp-Gly具有破骨细胞分化抑制效应，碱性磷酸酶抑制效应等。非-专利文献2描述，肽诸如Hyp-Gly-Pro具有抗氧化效应。专利文献2描述，诸如Pro-Gly和Hyp-Gly(其还在它们的上游区和/或在它们的下游区具有达10氨基酸)的肽具有刺激骨等的生长，维持和修复的效应。专利文献3描述，刺梨(Rosaroxburghii)，大豆肽，C12肽等具有成肌细胞活化效应。但是，不知道是否这些肽分子具有成肌细胞分化促进效应。非-专利文献3显示，当橄榄球运动员结合锻炼摄取胶原肽和乳清肽的等量混合物3个月时的肌肉重量变化率。尽管在摄入此等量混合物之后肌肉重量增加(图2)，体重也增加(图1)，及肌肉，每体重的肌肉重量比率相比开始时更减少。与此相比，在本专利技术中，肌肉重量与体重的比显著地增加，如描述于随后-描述的试验例2。【现有技术文献】【专利文献】专利文献1：WO2010/038323专利文献2：日本特表2006-502971专利文献3：日本特开2008-156294【非专利文献】非专利文献1：J.Biol.Chem.，Vol.286，No.4,41455(2011)非专利文献2：日本氨基酸学会第5次学术大会(JSAAS2011)要点集，p.74非专利文献3：FoodStyle21，Vol.14，No.7,62-65(2010)
技术实现思路
【专利技术要解决的技术课题】本专利技术旨在提供相比以往技术更优良的包含肽分子的成肌细胞分化促进剂。【解决课题的技术方案】经锐意的努力的结果，本专利技术人发现，肽分子Ala-Hyp-Gly，Hyp-Gly-Pro，Leu-Hyp，Glu-Hyp，Gly-Pro-Hyp，Pro-Ala，Hyp-Gly和Pro-Hyp具有优良的成肌细胞分化促进效应，由此完成了本专利技术。特别是，本专利技术如下。[1]成肌细胞分化促进剂，其包含选自下列的肽：Ala-Hyp-Gly，Hyp-Gly-Pro，Leu-Hyp，Glu-Hyp，Gly-Pro-Hyp，Pro-Ala，Hyp-Gly和Pro-Hyp，或其药学可接受的盐。[2]根据[1]的成肌细胞分化促进剂，其包含选自下列的肽：Hyp-Gly和Pro-Hyp，或其药学可接受的盐。[3]根据[1]的成肌细胞分化促进剂，其包含选自下列的2种或更多肽：Ala-Hyp-Gly，Hyp-Gly-Pro，Leu-Hyp，Glu-Hyp，Gly-Pro-Hyp，Pro-Ala，Hyp-Gly和Pro-Hyp，或其药学可接受的盐。[4]根据[1]～[3]之任一项的成肌细胞分化促进剂，其中促进剂为下列形式：用于口服施用的制剂，用于向肌肉直接施用的注射剂，经皮剂，栓剂，滴鼻剂或吸入剂。[5]饮料或食品或饲料，其包含选自下列的肽：Ala-Hyp-Gly，Hyp-Gly-Pro，Leu-Hyp，Glu-Hyp，Gly-Pro-Hyp，Pro-Ala，Hyp-Gly和Pro-Hyp，或其药学可接受的盐。【专利技术效果】本专利技术可提供相比以往技术更优良的成肌细胞分化促进剂，其包含Ala-Hyp-Gly，Hyp-Gly-Pro，Leu-Hyp，Glu-Hyp，Gly-Pro-Hyp，Pro-Ala，Hyp-Gly和Pro-Hyp的肽分子。【实施方式】以下详细地说明本专利技术。【1.肽】本专利技术中使用的肽是Ala-Hyp-Gly，Hyp-Gly-Pro，Leu-Hyp，Glu-Hyp，Gly-Pro-Hyp，Pro-Ala，Hyp-Gly和Pro-Hyp，且这些肽可为药学可接受的盐的形式。优选的肽的例包括Hyp-Gly和Pro-Hyp。"药学可接受的盐"的例包括无机酸盐诸如盐酸盐，硫酸盐和磷酸盐，有机酸盐诸如甲磺酸盐，苯磺酸盐，琥珀酸盐和草酸盐，无机碱式盐诸如钠盐，钾盐和钙盐，及有机碱式盐诸如三乙基铵盐。本肽可例如，由"固相合成方法"和"液相合成方法"(例如,日本特开2003-183298)合成。作为固相合成方法，知道Fmoc方法和Boc方法，及本肽可以任何这些方法合成。以下会具体描述固相合成方法的一例。将表面用氨基修饰的具有约0.1mm的直径的聚苯乙烯聚合物凝胶珠用作固相，及将二异丙基碳二亚胺用作稠合剂。首先，将C-端氨基酸的氨基用Fmoc基团或Boc基团保护，并使与上述的聚苯乙烯聚合物凝胶的氨基形成肽键。将固相用溶剂好好洗净，及除去残留的剂和氨基酸，然后除去与固相结合的氨基酸的氨基的保护基。随后，由使用保护了氨基的氨基酸依次重复相同的反应，在固相上合成肽。最后，将固相在三氟乙酸中消化，以将肽自固相分开，由此可合成肽。本肽也可通过用2种或更多种内切蛋白酶和外切蛋白酶的组合水解明胶来产生。而且，可将由以上水解获得的肽混合物本身，或由肽混合物的部分纯化获得的混合物用作成肌细胞分化促进剂。在本专利技术中，本肽可化学修饰。化学修饰可对个体氨基酸，例如，在羟脯氨酸的羟基，在N-端氨基酸的氨基，及在C-端氨基酸的羧基实施。该化学修饰致使溶解在弱酸性至中性条件下，及也使与随后描述的其他活性成分的兼容性改善。具体而言，在羟脯氨酸的羟基的化学修饰包括，例如，O-乙酰化。在N-端氨基酸的氨基的化学修饰包括，例如，聚肽基化，琥珀酰化，马来酰化，乙酰化，脱氨基化，苯甲酰化，烷基磺酰化，烯丙基磺酰化，二硝基苯基化，三硝基苯基化，氨甲酰化，苯基氨甲酰化和巯基化等。在C-端氨基酸的羧基的化学修饰包括，例如，酯化和酰胺化。当将本肽阳离子化时，可实施乙二胺化，精胺化等。至于化学修饰的具体手段或处理条件，应用通常的肽化学修饰技术。例如，羟脯氨酸的羟基的O-乙酰化可通过使乙酸酐在水溶剂或非水溶剂中发挥作用来达到。例如，C-端氨基酸的羧基的酯化可例如，通过在悬浮于甲醇后，使干氯化氢气体通气来达到，及其酰胺化可通过向其作用碳二亚胺等来达到。而且，作为化学修饰的其他具体例，可应用描述于专利公开No.62-44522和专利公开No.5-79046的化学修饰技术。【2.成肌细胞分化促进剂】本肽等具有成肌细胞分化促进效应，如描述于随后-描述的测试例。因此，本肽等可用于治疗或预防需要肌肉增强的各种疾病。本专利技术的成肌细胞分化促进剂可用于，例如，运动器官综合征的治疗，少肌症的治疗，运动员、学生等的训练效果的改善，老年人、长期住院患者等的体力增强及家畜肉质改善。本专利技术的成肌细胞分化促进剂可以各种形式的药学制备物经口或肠胃外施用。所述形式的例包括本文档来自技高网...

【技术保护点】
成肌细胞分化促进剂，其包含选自下列的肽：Ala‑Hyp‑Gly，Hyp‑Gly‑Pro，Leu‑Hyp，Glu‑Hyp，Gly‑Pro‑Hyp，Pro‑Ala，Hyp‑Gly和Pro‑Hyp，或其药学可接受的盐。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.12.13 JP 2012-2721101.选自下列的肽或其药学可接受的盐用于制备成肌细胞分化促进剂的用途：Ala-Hyp-Gly，Hyp-Gly-Pro，Leu-Hyp，Glu-Hyp，Gly-Pro-Hyp，Pro-Ala，Hyp-Gly和Pro-Hyp。2.权利要求1的用途，其中促进剂包含选自下列的肽：Hyp-Gly和Pro-Hyp，或其药学可接受的盐。3.权利要求1的用途，其中促进剂包含选自下列的2种或更多肽：Ala-Hyp-Gly，Hyp-Gly-Pro，Leu-Hyp，Glu-Hyp，Gly-Pro-Hyp，Pro-Ala，Hyp-Gly和Pro-Hyp，或其药学可接受的盐。4.权利要求1～3之任一项的用途，其中促进剂为下列形式：用于口服施用的制剂，用于向肌肉直接施用的注射剂，经皮剂，栓剂，滴鼻剂或吸入剂。5.权利要求1～3之任一项的用途，其中促进剂用于运动器官综合征的治疗，少肌症的治疗，运动员、学生等的训练效果的改善，老年人、长期住院患者等的体力增强及家畜肉质改善。6.权利要求1～3之任一项的用途，其中一个成年的每天肽剂量在口服施用的情况中是约1～1000mg，及在直接施用到患病的部分的情况中是约0.01～200mg。7.权...

【专利技术属性】
技术研发人员：小泉圣子，杉原富人，井上直树，
申请(专利权)人：新田明胶株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP