对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法及用所述方法检测的基因技术

本发明专利技术涉及一种对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法及用所述方法检测的基因，尤其提供一种对诱发癌症的AKR/J小鼠和正常的ICR小鼠照射高强度放射线，并从中采集胸腺，且针对所述胸腺而执行微阵列化而分类有关脂肪酸代谢的基因，并扩增所述基因且测定表达量，从而在癌症诱发个体中发掘并在正常个体中得到验证的对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法。这样构成的本发明专利技术的效果在于，通过防止干扰变量的介入，能够准确地检测出对放射线起到特异的反应的基因。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法及用所述方法 检测的基因
本专利技术涉及一种对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法及用所述方法检测 的基因，尤其涉及一种对癌症诱发小鼠和正常小鼠照射高强度放射线，从而由胸腺分类在 正常小鼠和癌症诱发小鼠中共同特异地观察到的有关脂肪酸代谢的基因的对高强度电离 放射线敏感的基因的检测方法。
技术介绍
随着工业及医疗用放射线的利用的增加，关于对人体的影响的研究正在多样地进 行，主要是利用放射线照射的癌症治疗方面的关注对象。已知高剂量电离放射线会引起DNA 损伤、基因变形以及包括癌症的疾病，然而200mGy以下的剂量和6mGy/小时以下的剂量率 的放射线却激活免疫反应而抑制癌的出现。 通常，对于放射线与致癌之间的相关性（尤其是基因反应）的研究进行至今，然而 夹杂有妨碍其结果的可靠性的干扰变量。然而，对于目前为止的大部分研究而言，使一部分 基因变形或者利用癌细胞株，因此无法说明构成身体的细胞、组织、脏器以及在身体阶段观 察到的多种多样的反应。即，由于利用普通老鼠而评估基因反应，因此表达基因多种多样， 不仅如此，由于癌的出现并未局限于特定脏器，因此存在难以解释基因反应的问题。 对于现有技术中为了癌症研究而利用细胞的方法而言，使基因发生改变或者将放 射线照射于致癌方面重要的P53缺失的癌细胞，因此与正常细胞的反应根本上不同，故存 在无法将其结果应用于个体的问题，且为了缓解这样的缺点，利用基因与人类相似95%以 上的小鼠而进行针对放射线的致癌研究。然而，由于通常的小鼠的自然癌变发生率很低，因 此利用多种多样的癌症研究用模型小鼠。 以往为了发掘出对电离放射线敏感的与脂肪酸代谢相关联的基因而利用了多种 多样的方法。然而，本专利技术中披露的与脂肪酸代谢相关联的基因却未曾在现有技术中公开 其为对高强度电离放射线敏感的基因。 在本专利技术的基因谱发掘方面有如下现有技术。 ①已知Ppargcla作为生物周期调节物的构成要素，对生物节律和能量代谢起到 重要作用（LiuCet.al.，Nature2007 ;447 :477-481)。 ②Ppargcla在第一型子宫体癌中激活了线粒体的生物合成（CormioAet.al.， BiochemBiophusResCommum2009 ;390 :1182_1185)。 ③在脂肪细胞中通过Acsll与FATP1的相互作用而使长链脂肪酸的流入增加 (RichardsMRet.al. ,JLipidRes2006 ；47 ：665-72)〇 ④在注入了插入于腺病毒的Acsll的C57BL6小鼠与Wistar大鼠（Rats)之间增加 了脂肪蓄积（ParkesHAet.al.，AmJPhysiolEndocrinolMetab2006 ;291 :E737_744)。 ⑤Lipe作为在脂肪细胞中用于甘油二酯（Diacylglycerol)与胆固醇复活剂水解 过程中的限速反应酶而被周知（HolmCet.al.，Science1998 ;241 :1503-1506)。 ⑥在脂肪细胞中EPK信号传递的激活通过HSL磷酸化而促进脂肪酸的分解 (GreenbergASet.al.，JBiolChem2001;276 :45456-454561)。 ⑦在HSL的表达受到抑制的胰岛中减少了胰岛素的分泌（Larsson，2008)。 ⑧已知Scd为参与到由饱和脂肪酸合成不饱和脂肪酸的过程的限速反应酶(NtambiJM,MiyazakiM,ProgLipidRes2004 ；43 ：91-104；FlowersMT,NtambiJM,Curr OpinLipidol2008;19:248-256)。 ⑨癌细胞为了调节连接于糖的脂质合成而将Scdl激活。然而，当Scdl的功能出 现问题时，抑制借助于AMPK的acetyl-CoAcarboxylase活性，并抑制饱和脂肪酸的合成， 从而使蓄积受到抑制（ScagliaNet.al. (2009)PL〇SOne4:e6812)。 基于此，本申请的专利技术人发掘出对高强度电离放射线敏感的脂肪酸代谢相关的基 因谱，从而完成了本专利技术。
技术实现思路
技术问题 本专利技术的目的在于提供一种对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法及用所 述方法检测的基因。 技术方案 为了达到如上所述的目的，本专利技术提供一种对高强度电离放射线敏感的基因的检 测方法，包括如下步骤：1)对诱发癌症的AKR/J小鼠和正常的ICR小鼠照射高强度放射线； II)从所述AKR/J小鼠和ICR小鼠中采集胸腺；III)对所述胸腺执行微阵列化；IV)由所述 微阵列分类有关脂肪酸代谢的基因；V)扩增所述基因，并测定表达量，而且，从癌症诱发个 体中发掘并在正常个体中验证。 并且，本专利技术提供一种放射线敏感性或放射线致癌诊断用标记，包括：从由作为参 与到胸腺癌恶化的有关脂肪酸代谢的基因的Ppargcla(NM_008904)、Acsll(NM_007981)、 Lipe(NM_010719)、Scdl(NM_009127)以及Scd3(NM_024450)构成的组中选择的基因的碱基 序列。 而且，本专利技术提供一种包括如上所述的标记的放射线敏感性或放射线致癌诊断用 套件。 并且，本专利技术提供一种包括如上所述的标记的放射线敏感性或放射线致癌诊断用 微阵列。 而且，本专利技术提供一种用于治疗或抑制放射线敏感性或放射线致癌的药物的检 索方法，包括如下步骤：1)对除了人类的具有胸腺癌的哺乳动物照射放射线；II)使从被 照射所述放射线的哺乳动物中提取的胸腺组织与实验物质相接触；III)由所述胸腺组 织测定从由作为参与到胸腺癌恶化的有关脂肪酸代谢的基因的PpargCla(NM_008904)、 Acsll(NM_007981)、Lipe(NM_010719)、Scdl(NM_009127)以及Scd3(NM_024450)构成的组 中选择的基因的表达变化。 以下，详细说明本专利技术。 在放射线对人体的影响方面，许多致癌研究进行至今，然而由于利用了癌细胞、基 因变形的细胞株或者普通小鼠，因此难以说明多种多样的身体反应（基因反应）。尤其，未 曾在个体层次上发掘出对电离放射线敏感且与脂肪酸代谢相关联的基因谱并说明功能。对 此，在本专利技术中，1)针对正常的ICR小鼠和胸腺癌发病的AKR/J小鼠，用高强度（0. 8Gy/分 钟）放射线照射（致癌刺激因子）之后，发掘出在胸腺中特异地表达的对高强度放射线敏 感的脂肪酸代谢相关基因谱并分析功能，然后，2)欲使用为可用于诊断胸腺癌发生阶段的 脂肪酸代谢相关基因谱的构成要素。 本专利技术提供一种对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法，包括如下步骤：1) 对诱发癌症的AKR/J小鼠和正常的ICR小鼠照射高强度放射线；II)从所述AKR/J小鼠和 ICR小鼠中采集胸腺；III)对所述胸腺执行微阵列化；IV)由所述微阵列分类有关脂肪酸代 谢的基因；V)扩增所述基因，并测定表达量，而且，从癌症诱发个体中发掘并在正常个体中 验证。 在本专利技术的对高强度电离放射线敏感的基因的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法，包括如下步骤：I)对诱发癌症的AKR/J小鼠和正常的ICR小鼠照射高强度放射线；II)从所述AKR/J小鼠和ICR小鼠中采集胸腺；III)对所述胸腺执行微阵列化；IV)由所述微阵列分类有关脂肪酸代谢的基因；V)扩增所述基因，并测定表达量，而且，从癌症诱发个体中发掘并在正常个体中验证。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.05.10 KR 10-2012-00495881. 一种对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法，包括如下步骤： I) 对诱发癌症的AKR/J小鼠和正常的ICR小鼠照射高强度放射线； II) 从所述AKR/J小鼠和ICR小鼠中采集胸腺； III) 对所述胸腺执行微阵列化； IV) 由所述微阵列分类有关脂肪酸代谢的基因； V) 扩增所述基因，并测定表达量， 而且，从癌症诱发个体中发掘并在正常个体中验证。2. 如权利要求1所述的对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法，其特征在于， 所述高强度电离放射线是以〇.8Gy/分钟的强度最终照射4. 5Gy的放射线剂量的γ线 Cs-137。3. 如权利要求1所述的对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法，其特征在于，所 述方法被利用为胸腺癌诊断用套件的制作、癌症患者的癌变进展及治疗程度的评估、工业 及医疗从事人员的放射线暴露与致癌之间的相关性评估、放射线与致癌的因果关系评估、 对于放射线暴露的生物学剂量评估、或者基于高强度放射线的胸腺癌的引发及进展度评估 的指标。4. 如权利要求1所述的对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法，其特征在于，所 述癌症为胸腺癌。5. 如权利要求1所述的对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法，其特征在于，所 述步骤II)中的胸腺的采集是在由于癌症而开始出现死亡的时间点上进行。6. 如权利要求1所述的对高强度电离放射线敏感的基因的检测方法，其特征在 于，所述有关脂肪酸代谢的基因是从由Ppargcla (NM_008904)、Acsll (NM_007981)、 Lipe(NM_010719)、Scdl(N...

【专利技术属性】
技术研发人员：金熙善，崔承镇，崔茂铉，奉珍钟，申硕澈，
申请(专利权)人：韩国水力原子力株式会社，
类型：发明
国别省市：韩国;KR