一种牛奶凤梨快速繁殖培养方法,包括以下步骤,步骤一:培养基选择;步骤二:外植体诱导;步骤三:继代培养;步骤四:幼苗转入;步骤五:幼苗培养;培养基选择改良MS基本培养基,其中含有3800mg硝酸钾、3300mg硫酸铵、170mg磷酸二氢钾、185mg硫酸镁、440mg氯化钙、0.83mg碘化钾、6.2mg硼酸、22.3mg硫酸锰、8.6mg硫酸锌、0.25mg钼酸钠、0.025mg硫酸铜、0.025mg氯化钴、100mg肌醇、0.1mg盐酸硫胺素、0.5mg盐酸吡哆醇、0.5mg烟酸、37.3mg乙二胺四乙酸二钠和27.8mg硫酸亚铁;该方法得到牛奶凤梨再生植株且平均根数7,株移栽成活率近100%且无表型变异;研究发现,继代近30代未发现有变异苗出现,说明只要培养基以及激素浓度配合使用恰当,可以高代培养。
【技术实现步骤摘要】
专利
本专利技术涉及,属于生物培养基培养
。
技术介绍
凤梨是台湾三大名果之一,最常见的凤梨有金钻凤梨和果肉如牛奶般的牛奶凤梨;金钻凤梨全年都有,牛奶凤梨产量很少,只有在夏季少量生产;目前在生物培养
,生物培养基技术已初步成熟,若果在牛奶凤梨方面探究一种快速繁殖的方法,进而改变现有的牛奶凤梨在生产量较小的情形,从而达到经济效益提高的目的。
技术实现思路
本专利技术为解决现有技术导致牛奶凤梨外植体繁殖培育效率较低的问题,本专利技术旨在提供,其包括以下步骤:步骤一:培养基选择;步骤二:外植体诱导;步骤三:继代培养;步骤四:幼苗转入;步骤五:幼苗培养; 在步骤一中:改良MS基本培养基中含有3800mg硝酸钾、3300mg硫酸铵、170mg磷酸二氢钾、185mg硫酸镁、440mg氯化|丐、0.83mg碘化钾、6.2mg硼酸、22.3mg硫酸猛、8.6mg硫酸锌、0.25mg钥酸钠、0.025mg硫酸铜、0.025mg氯化钴、10mg肌醇、0.1mg盐酸硫胺素、 0.5mg盐酸卩比卩多醇、0.5mg烟酸、37.3mg乙二胺四乙酸二钠和27.8mg硫酸亚铁。 在步骤二中:1/2MS基本培养基+6-苄基腺嘌呤0.5?1.5mg/l+糖30g/l+萘乙酸 0.5 ?1.5mg/l+ 琼脂 6.5g/l, pH5.6 ?5.8。 在步骤三中:在改良MS培养基+6-苄基腺嘌呤2mg/l+糖30g/l+萘乙酸0.5? 1.5mg/l+琼脂6.5g ;不定芽的大量形成,增值7倍以上; 在步骤四中:当芽生长2_3cm长的苗转入壮苗生根培养基为改良1/2MS培养基+6-苄基腺嘌呤0.5mg/l+吲哚丁酸0.5mg/l+0.1 %天然附加物; 在步骤五中:选择苗壮效果好,植株矮壮,叶色浓绿,根多且粗壮的外植体作为幼苗移植的对象,进行移植。 与现有技术相比,该牛奶凤梨培育方法,通过合理选择培养基及控制外植体诱导移植中各项因素,得到到牛奶凤梨再生植株且平均根数7,株移栽成活率近100%且无表型变异。 【具体实施方式】 为了让牛奶凤梨外植体可以迅速繁殖培育进而获得更高的经济效益,本专利技术旨在提供。 ,包括以下步骤,步骤一:培养基选择;步骤二:外植体诱导;步骤三:继代培养;步骤四:幼苗转入;步骤五:幼苗培养; 在步骤一中:改良MS基本培养基中含有3800mg硝酸钾、3300mg硫酸铵、170mg磷酸二氢钾、185mg硫酸镁、440mg氯化|丐、0.83mg碘化钾、6.2mg硼酸、22.3mg硫酸猛、8.6mg硫酸锌、0.25mg钥酸钠、0.025mg硫酸铜、0.025mg氯化钴、10mg肌醇、0.1mg盐酸硫胺素、 0.5mg盐酸卩比卩多醇、0.5mg烟酸、37.3mg乙二胺四乙酸二钠和27.8mg硫酸亚铁。 在步骤二中:1/2MS基本培养基+6-苄基腺嘌呤0.5?1.5mg/l+糖30g/l+萘乙酸 0.5 ?1.5mg/l+ 琼脂 6.5g/l, pH5.6 ?5.8。 在步骤三中:在改良MS培养基+6-苄基腺嘌呤2mg/l+糖30g/l+萘乙酸0.5? 1.5mg/l+琼脂6.5g ;不定芽的大量形成,增值7倍以上; 在步骤四:当芽生长2_3cm长的苗转入壮苗生根培养基为改良1/2MS培养基+6-苄基腺嘌呤0.5mg/l+吲哚丁酸0.5mg/l+0.1 %天然附加物; 在步骤五中:选择苗壮效果好,植株矮壮,叶色浓绿,根多且粗壮的外植体作为幼苗移植的对象,进行移植;将灭菌的牛奶凤梨幼嫩茎端切割后做为外植体,在无菌条件下将外植体接种于不定芽诱导培养基上,培养20天时诱导出不定芽,继续培养10天;然后在无菌条件下将不定芽切割后接种于增殖培养基上培养30天;再在无菌条件下将增殖培养后的不定芽转接于生根培养基上培养20天,获得牛奶凤梨组培苗;以上培养条件均为:温度25±2°C,12h光照与12h黑暗交替培养,光照强度为1800?2000Lux ;待所述组培苗长至4cm?5cm高,根系较多时,可以将苗移栽出来。打开瓶塞炼苗3?5天后,洗去根部琼脂,再移栽到素沙与草炭的质量比为2: I的栽培介质中,株移栽成活率近100%且无表型变巳 研究发现,继代近30代未发现有变异苗出现,说明只要激素浓度使用恰当,可以高代培养。 对于本领域技术人员而言,显然本专利技术不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本专利技术的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本专利技术。因此,无论从哪一点来看,均应将专利技术例看作是示范性的,而且是非限制性的,本专利技术的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本专利技术内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种牛奶凤梨快速繁殖培养方法,包括以下步骤,步骤一:培养基选择;步骤二:外植体诱导;步骤三:继代培养;步骤四:幼苗转入;步骤五:幼苗培养;其特征在于:在步骤一中:改良MS基本培养基中含有3800mg硝酸钾、3300mg硫酸铵、170mg磷酸二氢钾、185mg硫酸镁、440mg氯化钙、0.83mg碘化钾、6.2mg硼酸、22.3mg硫酸锰、8.6mg硫酸锌、0.25mg钼酸钠、0.025mg硫酸铜、0.025mg氯化钴、100mg肌醇、0.1mg盐酸硫胺素、0.5mg盐酸吡哆醇、0.5mg烟酸、37.3mg乙二胺四乙酸二钠和27.8mg硫酸亚铁;在步骤二中:外植体诱导培养基为:1/2MS基本培养基+6‑苄基腺嘌呤0.5~1.5mg/l+糖30g/l+萘乙酸0.5~1.5mg/l+琼脂6.5g/l,pH5.6~5.8;在步骤三中:在改良MS培养基+6‑苄基腺嘌呤2mg/l+糖30g/l+萘乙酸0.5~1.5mg/l+琼脂6.5g;不定芽的大量形成,增值7倍以上;在步骤四:当芽生长2‑3cm长的苗转入壮苗生根培养基为改良1/2MS培养基+6‑苄基腺嘌呤0.5mg/l+吲哚丁酸0.5mg/l+0.1%天然附加物+0.1%活性炭;在步骤五中:选择苗壮效果好,植株矮壮,叶色浓绿,根多且粗壮的外植体作为幼苗移植的对象,进行移植;将灭菌的牛奶凤梨幼嫩茎端切割后做为外植体,在无菌条件下将外植体接种于不定芽诱导培养基上,培养20天时诱导出不定芽,继续培养10天;然后在无菌条件下将不定芽切割后接种于增殖培养基上培养30天;再在无菌条件下将增殖培养后的不定芽转接于生根培养基上培养20天,获得牛奶凤梨组培苗;以上培养条件均为:温度25±2℃,12h光照与12h黑暗交替培养,光照强度为1800~2000Lux;待所述组培苗长至4cm~5cm高,根系较多时,可以将苗移栽出来。打开瓶塞炼苗3~5天后,洗去根部琼脂,再移栽到素沙与草炭的质量比为2∶1的栽培介质中,株移栽成活率近100%且无表型变异。...
【技术特征摘要】
1.一种牛奶凤梨快速繁殖培养方法,包括以下步骤,步骤一:培养基选择;步骤二:夕卜植体诱导;步骤三:继代培养;步骤四:幼苗转入;步骤五:幼苗培养;其特征在于: 在步骤一中:改良MS基本培养基中含有3800mg硝酸钾、3300mg硫酸铵、170mg磷酸二氢钾、185mg硫酸镁、440mg氯化韩、0.83mg碘化钾、6.2mg硼酸、22.3mg硫酸猛、8.6mg硫酸锌、0.25mg钥酸钠、0.025mg硫酸铜、0.025mg氯化钴、10mg肌醇、0.1mg盐酸硫胺素、0.5mg盐酸卩比卩多醇、0.5mg烟酸、37.3mg乙二胺四乙酸二钠和27.8mg硫酸亚铁; 在步骤二中:外植体诱导培养基为:1/2MS基本培养基+6-苄基腺嘌呤0.5?1.5mg/l+糖 30g/l+ 萘乙酸 0.5 ?1.5mg/l+ 琼脂 6.5g/l, pH5.6 ?5.8 ; 在步骤三中:在改良MS培养基+6-苄基腺嘌呤2mg/l+糖30g/l+萘乙酸0.5?1.5mg/1+琼脂6.5g...
【专利技术属性】
技术研发人员:王立,
申请(专利权)人:王立,
类型:发明
国别省市:广东;44
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