铜钻抗炎成分的分离提取及其抗炎活性的测试制造技术

本发明专利技术公开了一种铜钻抗炎成分的提取的方法,该方法的主要步骤：一、乙醇浸泡，二、提取浓缩得到浸膏,三、将浸膏溶于5%酒石酸，过滤，得到酸水不溶物。四、将酸水不溶物萃取。五、得到Frs．E1～E7共7个部分的抗炎成分,经试验该活性成分能够显著抑制LPS刺激的N9小胶质细胞NO(一氧化氮)释放，并且在其发挥抑制作用的浓度范围内不影响小胶质细胞存活率。为制备新药奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
铜钻抗炎成分的分离提取及其抗炎活性的测试
本专利技术涉及药物的提取，具体是瑶药铜钻抗炎成分的分离提取及抗炎活性的测 试。
技术介绍
广西瑶医常用药材铜钻，为茶莱英科植物定也藤iot/oit/es Hand.-Mazz.的干燥藤茎。瑶语称don曲nzunx(铜钻），亦称黄钻、黄麻骨风、甜果藤。 功能主治巧风除湿，调经活血，止痛。用于风湿性关节炎，类风湿性关节炎，黄痘，跌打损伤， 月经不调，痛经，闭经；外用治外伤出血，毒蛇咬伤，为瑶医常用药材十八钻之一。经文献 资料检索，已经报道的国内外关于铜钻的研究文献只有少数几篇。周丽娜、戴斌发表了瑶药 铜钻的生药鉴定，进行了药材性状、显微组织及理化鉴别研究，为瑶药铜钻的鉴定、质量标 准及临床应用提供依据。2000年中山大学陈承声等从铜钻中分离到一种新倍半聰醇，通过 波谱方法和旋光度对比确定其为（-)-雪松醇，并应用2D NMR技术确定了其分子中C，H化 学位移的归属。尹文清、曾立等对铜钻的化学成分进行了进一步研究，利用娃胶色谱技术进 行分离和纯化，根据波谱数据和理化性质鉴定化合物的化学结构，从铜钻中分离得到7个 化合物，均为首次从铜钻中分离得到；同时对铜钻中的酷性成分进行了研究，得到6个酷类 化合物；采用正交试验优选了铜钻中总黄丽提取与纯化工艺；研究了铜钻中总有机酸的最 佳提取工艺，采用电位滴定法测定了铜钻中总有机酸的含量。近几年亦有从铜钻中分离得 到生物碱类成分的报道，且部分生物碱具有较好的抗肿瘤活性。迄今为止，未见关于系统研 究瑶药铜钻抗炎有效成分及其相关抗炎产品的报道。 【
技术实现思路
】 本专利技术的目的提供一种瑶药铜钻抗炎成分的提取及抗炎活性的测试。 实现本专利技术的技术方案是： 一种铜钻抗炎成分的提取方法，包括如下步骤： (1) 己醇浸泡；将铜钻的干燥茎切成小段，用体积分数为95%的己醇浸泡，加热回流提 取3次； (2) 提取浓缩得到浸膏； (3) 将浸膏溶于5%酒石酸，过滤，得到酸水不溶物； (4) 将酸水不溶物热溶于水，用己酸己醋萃取； (5) 将萃取物经娃胶柱色谱分离，W二氯甲焼与甲醇混合溶液梯度洗脱，得到化S. El?E7共7个组分。 步骤（1)所述的回流提取时间为；第一次3 h，第二、第H次各2 h。 步骤（5)所述的二氯甲焼与甲醇混合溶液的体积比为100 ;0?0 ;100。 本专利技术的优点是；提供了从瑶药铜钻中提取抗炎成分的方法，为制备新药奠定了 基础。 【附图说明】 图1为本专利技术的提取、分离工艺流程图 图2为实施例流程图。 【具体实施方式】 参照图1、图2,本专利技术铜钻抗炎成分的提取方法，是将铜钻的干燥茎20 kg,切成 小段，用体积分数为95%的己醇浸泡3 h后，加热回流提取3次，第一次3 h，第二次第H次 各2 h，提取液减压浓缩得到浸膏1.2 kg。将浸膏溶于5%酒石酸，过滤，得到酸水不溶物460 g。酸水不溶物460g热溶于水，用己酸己醋萃取。己酸己醋萃取部分（110 g)经娃胶柱色谱 分离，W二氯甲焼与甲醇溶剂系统（体积比为100 ;〇?0 ;1〇〇)梯度洗脱，得到化EU3. 2 g)、化.E2(1.4 g)、化.E3(25. 0 g)、化.E4(40. 0 g)、化.E5(21. 1 g)、化.E6(10. 5 g)和 化.E7 (1.3 g)共7个部分。 抗炎成分的活性检测 小胶质细胞活化介导的慢性炎症反应是神经退行性疾病的发生、发展过程中的重要环 节，抑制小胶质细胞的激活成为药物发现的一个新祀点。LI^激活小胶质细胞释放NO、促炎 症细胞因子和活性氧等。 本实验通过建立体外LI^激活N9小胶质细胞异常活化的筛选模型，W激活小胶质 细胞释放NO为指标，筛选对小胶质细胞活化有抑制作用的成分。 1.实验材料 (1)实验细胞株及来源；N9 ;小鼠小胶质细胞株。 (2)实验试剂与仪器：本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种铜钻抗炎成分的提取方法，其特征是：包括如下步骤：(1)乙醇浸泡：将铜钻的干燥茎，切成小段，用体积分数为95%的乙醇浸泡，加热回流提取3次；(2)提取浓缩得到浸膏；(3)将浸膏溶于5%酒石酸，过滤，得到酸水不溶物；(4)将酸水不溶物热溶于水，用乙酸乙酯萃取；(5)将萃取物经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷与甲醇溶剂系统梯度洗脱，得到Frs．E1～E7共7个组分。

【技术特征摘要】
1. 一种铜钻抗炎成分的提取方法，其特征是：包括如下步骤： (1) 乙醇浸泡：将铜钻的干燥茎，切成小段，用体积分数为95%的乙醇浸泡，加热回流提 取3次； (2) 提取浓缩得到浸膏； (3) 将浸膏溶于5%酒石酸，过滤，得到酸水不溶物； (4) 将酸水不溶物热溶于水，用乙酸乙酯萃取； (5) 将萃取物经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷与甲醇溶剂系统梯度洗脱，得到Frs. El?E7共7个组分。2. 根据权利要求1所述的提取方法，其特征是：步骤（1)所述的回流提取时间为：第一 次3 h，第二、第三次各2 h。3. 根据权利要求1所述的提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁东，张贵杰，胡峰，潘英明，
申请(专利权)人：广西师范大学，
类型：发明
国别省市：广西;45