一株弯曲乳杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株弯曲乳杆菌及其应用。本发明专利技术公开一株弯曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)，其保藏编号为CGMCC No.9388。本发明专利技术公开的弯曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)IMC-12，具有较强的产生H2O2的能力，可有效抑制外来的病原菌和其他条件致病菌的生长，同时又具有较强的对阴道上皮细胞的粘附作用，保证了菌株在阴道上皮的定植，弯曲乳杆菌IMC-12在泌尿生殖道感染防治方面具有一定的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一株弯曲乳杆菌及其应用
本专利技术涉及一株弯曲乳杆菌及其应用，属于微生物领域。
技术介绍
泌尿生殖道感染为妇女最为常见但又未受到重视的多发病,发病率仅次于呼吸道感染，可高达40％；女性泌尿生殖道感染是尿路感染和生殖道感染的总称，它不仅直接影响妇女的身心健康,而且也会影响众多家庭的幸福和稳定,进而影响全社会的人口质量和经济发展。女性尿路感染常见的病原是革兰氏阴性杆菌,其中以大肠埃希菌最多见,葡萄球菌次之；这些多数为人体肠道及皮肤黏膜上的正常菌群,由于机体免疫力下降,这些细菌可由肠道及皮肤粘膜等寄居部位迁移至泌尿系统并大量繁殖引起尿路感染。女性常见的生殖道感染病原包括滴虫、霉菌和衣原体等，生殖道感染绝大多数先由阴道感染而起；因病情迁延扩散可引起盆腔炎,并导致不孕症。泌尿生殖道感染是“小疾病，大麻烦”，还可增加艾滋病和淋病等性病的危险；患者生活质量明显下降，精神负担很重。妊娠妇女可出现一系列妊娠并发症，如早产及绒毛膜羊膜炎等不良妊娠结局；分娩时由产道还可直接使新生儿受同类病原体感染而致病。目前，泌尿生殖道感染的治疗主要依靠各种抗生素,但治疗效果不佳，治愈率在40％以下，而且复发的比例很高，可达40％以上。原因主要是患者生殖道内耐药性病原菌的存在致使抗生素失效；另外，抗生素治疗即使可以杀死病原菌，但同时也杀死了有益菌(益生菌)，因此，难以恢复健康状态下的泌尿生殖道优势菌群。健康育龄妇女泌尿生殖道内存在着大量的细菌，总称为泌尿生殖道菌群，其中包括多种不同种类的细菌，可粗略分为“有益菌”和“致病菌”两大类，其中乳酸杆菌是维持泌尿生殖道健康最常见和最重要的有益菌(“正义菌”)，大肠埃希菌、葡萄球菌、滴虫、霉菌和衣原体则为致病菌(“邪恶菌”)。某些因素导致某一种致病菌异常增殖，引起泌尿生殖道感染。阴道内细菌种类的变化与妇女和胎儿的健康密切相关，其中的弯曲乳杆菌和詹氏乳酸杆菌是维持阴道健康微生态环境的主要优势“正义菌”，可占健康泌尿生殖道菌群细菌总量的90％以上。它们主要通过抑制外来的病原菌和其他条件致病菌(“邪恶菌”)的生长和侵入来维持泌尿生殖道菌群的健康环境，“正义菌(有益菌)”战胜“邪恶菌”的作用机制主要包括以下几方面：(1)通过分解阴道黏膜上皮中贮存的糖原产生乳酸、乙酸等酸性物质，维持阴道的酸性环境,以抑制病原菌的的生长；(2)产生过氧化氢和乳酸菌素等多种抑菌物质,用以杀死入侵的病原菌；(3)乳酸杆菌类有益菌通过在阴道黏膜上皮定植后,会形成先入为主的占位保护作用,阻止病原微生物的入侵。育龄妇女随年龄增长,阴道内弯曲乳杆菌或詹氏乳酸杆菌数量会逐渐减少。绝经后,卵巢雌激素分泌逐渐停止,阴道上皮细胞糖原储备缺乏,阴道pH上升,弯曲乳杆菌或詹氏乳酸杆菌会进一步减少,致病菌因而增多。所以，弯曲乳杆菌或詹氏乳酸杆菌对老年妇女的泌尿生殖健康也具有重要作用。微生态学理论认为,通过生态制剂调整疗法,扶正和保护阴道内的优势菌群的组成和比例,可以驱除外来“邪恶的”致病菌的侵扰,提高妇女本身固有的“扶正祛邪”的自我保护作用。乳杆菌是健康妇女阴道菌群的优势菌群，占阴道细菌总量90％以上，泌尿生殖道感染患者阴道乳酸杆菌明显减少，有的甚至完全检测不到，因此，丧失了抵御外来病原菌感染的能力。而通过补充缺失的乳杆菌，则有利于重建女性泌尿生殖道的优势菌群，恢复其固有的“扶正祛邪”的保护作用。泌尿生殖道感染是妇女的常见病、多发病、易于复发,用抗生素虽有较好的短期疗效,但却有40％的复发率。研究证明：有保护作用的优势菌株—弯曲乳杆菌或詹氏乳酸杆菌的制剂将更容易在阴道内定居和增殖,并产生抗菌物质,发挥持久的作用。因此，开发适应我国妇女特点的特异性阴道乳杆菌制剂市场前景广阔，改变以往在治疗泌尿生殖道感染上的纯粹杀菌的用药指导思想，避免由于大量应用抗生素作为治疗所带来的一系列不良反应和弊端，有利于恢复女性泌尿生殖道的优势菌群并重建其微生态平衡；从而有效降低泌尿生殖道感染的复发率，真正治愈女性泌尿生殖道感染。目前，国内女性泌尿生殖道感染用益生菌菌剂只有一种，其主要成分是德氏乳杆菌活菌。虽然它是从健康妇女阴道分离出来的一种乳杆菌，但不是我国妇女阴道菌群中的主要有益菌，我国健康妇女阴道细菌以弯曲乳杆菌为主。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株弯曲乳杆菌及其应用。本专利技术提供一株弯曲乳杆菌(Lactobacilluscrispatus)，其保藏编号为CGMCCNo.9388；所述弯曲乳杆菌的菌落直径大小约1-2毫米、不透明、突起的乳白色菌落，菌落边缘整齐、较湿润，大小形态稳定；革兰染色阳性；处于对数生长期的所述弯曲乳杆菌经鉴定为无芽胞的杆菌，无鞭毛；兼性厌氧，生长最适温度37-42℃，最适pH5.8-6.2，可发酵葡萄糖、果糖、蔗糖、海藻糖、麦芽糖等多种糖。一种菌剂也属于本专利技术的保护范围，含有上述弯曲乳杆菌和/或上述弯曲乳杆菌的发酵物。上述弯曲乳杆菌或上述菌剂在制备维持酸性环境的产品中的应用也属于本专利技术的保护范围；所述酸性环境具体为泌尿生殖道的酸性环境，再具体为人的泌尿生殖道的酸性环境；所述泌尿生殖道具体为阴道。上述弯曲乳杆菌或上述菌剂在制备抑制病原菌和/或条件致病菌的生长和/或繁殖的产品中的应用也属于本专利技术的保护范围；所述病原菌和/或条件致病菌具体为泌尿生殖道的病原菌和/或条件致病菌，再具体为人的泌尿生殖道的病原菌和/或条件致病菌；所述泌尿生殖道具体为阴道。上述弯曲乳杆菌或上述菌剂在制备对泌尿生殖道的上皮细胞具有粘附定植能力的产品中的应用也属于本专利技术的保护范围。上述弯曲乳杆菌或上述菌剂在制备预防和/或治疗泌尿生殖道感染的产品中的应用也属于本专利技术的保护范围。上述弯曲乳杆菌或上述菌剂在制备预防和/或治疗泌尿生殖道感染进而引发的疾病的产品中的应用也属于本专利技术的保护范围。上述任一所述的应用中，所述泌尿生殖道为阴道。本专利技术提供的弯曲乳杆菌(Lactobacillus.crispatus)IMC-12，具有较强的产生H2O2的能力，可有效抑制外来的病原菌和其他条件致病菌的生长，同时又具有较强的对阴道上皮细胞的粘附作用，保证了菌株在阴道上皮的定植。弯曲乳杆菌IMC-12在泌尿生殖道感染防治方面具有一定的应用前景。附图说明图1为弯曲乳杆菌IMC-12菌落。图2为弯曲乳杆菌IMC-12与阴道上皮细胞的粘附作用。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。健康妇女阴道分泌物样品由瀚思维康健康管理机构提供。MRS液体培养基的制备：将蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母膏5.0g，柠檬酸氢二铵2.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，乙酸钠(CH3COONa·3H2O)5.0g，磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)2.0g，硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.58g，硫酸锰(MnSO4·H2O)0.25g溶于蒸馏水，并用蒸馏水定容至1000mL，调至pH至6.2-6.6。实施例1、弯曲乳杆菌菌株的分离和鉴定一、弯曲乳杆菌菌株的分离将收集的200余例临床检测无阴道炎症状体征的健康妇女阴道分泌物样品依次编号，并接种于MRS液体培养基，37℃厌氧培养24h。每个样本随机挑选5个单菌落于2m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株弯曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)，其保藏编号为CGMCC No.9388。

【技术特征摘要】
1.一株弯曲乳杆菌(Lactobacilluscrispatus)，其保藏编号为CGMCCNo.9388。2.一种菌剂，含有权利要求1所述的弯曲乳杆菌(Lactobacilluscrispatus)和/或权利要求1所述的弯曲乳杆菌的发酵物。3.权利要求1所述的弯曲乳杆菌(Lactobacilluscrispatus)或权利要求2所述的菌剂在制备维持酸性环境的产品中的应用；所述酸性环境为泌尿生殖道的酸性环境；所述泌尿生殖道为阴道。4.权利要求1所述的弯曲乳杆菌(Lactobacilluscrispatus)或权利要求2所述的菌剂在制备抑制病原菌和/或条件致病菌的生长和/或繁殖的产品中的应用；所述病...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱宝利，张瑞芬，李晶，王江，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11