溶液样品中含长烷基链的离子液体的去除方法技术

本发明专利技术涉及一种含长烷基链的离子液体的去除方法，去除方法包括以下步骤：a)将含有离子液体的溶液调至碱性（pH≥8）；b)采用阳离子交换材料作为吸附剂，去除含长烷基链的离子液体；c)收集去除离子液体后的溶液。该方法能很好地去除溶液中的含长烷基链的离子液体，具有简单、高效、快速的优点，并在蛋白质组学、高分子化学及脂质体代谢组学方面有着广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种含长烷基链的离子液体的去除方法，去除方法包括以下步骤：a)将含有离子液体的溶液调至碱性（pH≥8）；b)采用阳离子交换材料作为吸附剂，去除含长烷基链的离子液体；c)收集去除离子液体后的溶液。该方法能很好地去除溶液中的含长烷基链的离子液体，具有简单、高效、快速的优点，并在蛋白质组学、高分子化学及脂质体代谢组学方面有着广阔的应用前景。【专利说明】
本专利技术涉及一种含长烷基链的离子液体的去除方法及其应用，可实现溶液中含长 烷基链的离子液体的有效去除，具有简单、高效、快速的优点，并且该方法可以广泛应用于 蛋白质组学、高分子化学及脂质体代谢组学的研究中。
技术介绍
膜蛋白质对执行细胞内外物质交换、细胞识别与免疫应答、信号传导和调控以及 能量传递等功能起着重要作用。真核生物中1/3的蛋白均整合在膜上。此外，膜蛋白质在 药物研究中也起着相当重要的作用，在已知的和正在研究的药物靶标中大约有70%为膜蛋 白质。然而，由于膜蛋白质疏水性强，导致其溶解性和酶解效率较差，分析困难。因此，选择 一种对膜蛋白质具有高溶解能力的溶剂是膜蛋白质研究的先决条件。 近年来，离子液体作为一种极具应用前景的绿色溶剂受到越来越多的关注。离 子液体是完全由阴阳离子组成，通常在室温下表现为液体或是熔点小于l〇〇°C的盐类。离 子液体具有良好的溶剂性、不挥发、热稳定、液程宽、阴阳离子可设计性等优点，已经被 广泛应用在化学合成、电化学、萃取分离、材料制备等诸多领域。由于其良好的溶解能 力，近来年离子液体成为膜蛋白质溶解的新型溶剂（Sun，L.L. ;Tao，D.Y. ;Han，B. ;Ma，J. F. ; Zhuj G. J. ;Liang,Z. ; Shan, Y. C. ;Zhang,L.H. ; Zhang, Y. K. Anal. Bioanal. Chem. 2011，399, 3387-3397.)。 "Bottom-up"技术是目前蛋白质组学分析鉴定中最常用的技术，该技术是先将蛋 白质酶解成肽段，然后通过一维或者多维分离技术进行分离及在线质谱鉴定。在膜蛋白质 分析中，为了膜蛋白质的增溶，添加的离子液体等增溶剂会严重影响蛋白质分析的质谱信 号。因此质谱分析前，需要对蛋白质样品进行离子液体等增溶剂的去除，以获得理想的质谱 信号。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术的目的在于发展一种含长烷基链的离子液体的去除方 法，通过该方法能高效、快速、简便地去除溶液中的离子液体，从而与后续的分析过程相兼 容，不对后续的分析造成不利的影响。 为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为： ，将含有长烷基链的离子液体的样 品溶液用碱性溶液调至PH > 8的碱性环境；然后采用阳离子交换材料作为吸附剂，去除含 长烷基链的离子液体，最后将吸附剂和溶液分离，收集溶液。 含长烷基链的离子液体可为：阳离子部分为烷基链部分，为含6个碳或7个以上碳 的咪唑类、吡啶类、季铵类、或季鱗类阳离子；阴离子部分为Cl'Br' Γ、NO3'ClO4'AlCl4' BF4' PF4' CF3COO' CF3SO3' (CF3SO2) 2仄或 SbF6' 将含有长烷基链的离子液体的样品溶液用碱性溶液调至pH为8-14的碱性环境。 含有长烷基链的离子液体的样品溶液可为：细胞提取液、胞浆提取液、血浆提取 液、蛋白质溶液、多肽溶液、脂质物溶液或呈电负性的聚合物溶液。 调节pH至碱性环境所采用的碱性溶液为pH为9-14的碳酸氢铵缓冲盐溶液、pH为 9-14的磷酸缓冲盐溶液、pH为9-14的三羟甲基氨基甲烷缓冲盐溶液、氨水、碳酸钠溶液、或 氢氧化钠溶液。 阳离子交换材料为含有磺酸基团和/或磷酸基团的硅胶或聚合物基质材料(如： 聚丙烯酸酯类基质、聚苯乙烯类基质、聚丙烯酰胺类基质）；材料可以是颗粒材料或者整体 材料。 将吸附剂和样品溶液接触和分离的方式可以为： 将吸附剂固载于固相载体上或填充于中空容器中，将含有离子液体的样品溶液通 过固相载体或中空容器，并与吸附剂接触后，直接收集； 或将吸附剂和样品溶液混合接触后，将吸附剂通过离心沉淀的方式，与含有离子 液体的溶液分离； 或将吸附剂包裹于磁性颗粒上，将吸附剂和样品溶液混合接触后，通过磁力作用， 与含有离子液体的样品溶液分离。 固相载体为：表面积为Icm2-IOm2,形状为长方体、正方体、圆锥体或圆柱体中一种 或二种以上，材质为聚合物材料，具体为硅胶、纤维素膜、聚醚砜膜、树脂、葡聚糖凝胶、琼脂 糖凝胶和磁性复合材料。 中空容器为：内部空腔径向横截面直径为50ym-5cm的不锈钢管、20-1000μ 1移 液器枪头、l_200ml固相萃取（SPE)管、l-200ml注射器针管、50-500 μ m内径毛细管或注射 器滤膜腔体。 所述样品溶液为蛋白质样品、脂质体样品及高分子样品中一种或二种以上混合， 该方法可用于蛋白质样品、脂质体样品及高分子样品的分析中。 具体： 1、将含有长烷基链的离子液体的样品溶液，用pH为9-14碳酸氢铵缓冲盐溶液、磷 酸缓冲盐溶液、三羟甲基氨基甲烷缓冲盐溶液，氨水、碳酸钠溶液、或氢氧化钠溶液碱性溶 液调至pH>8的碱性环境； 2、采用含有磺酸基团和/或磷酸基团的硅胶或聚合物基质的阳离子交换材料作 为吸附剂，吸附溶液中含长烷基链的离子液体。若吸附剂固载于固相载体上或填充于中 空容器中，则将含长烷基链离子液体的样品溶液以10-1 〇〇〇 μ L的流速直接通过吸附剂即 可；若吸附剂为未被固定化的颗粒，则直接将吸附剂加入含长烷基链离子液体的溶液中，振 荡 3-lOmin。 3、若吸附剂固载于固相载体上或填充于中空容器中，则直接收集流出液，即为去 除离子液体后的溶液；若吸附剂为未被固定化的颗粒，则通过离心的方法（l〇〇_3〇〇〇〇g)分 离吸附剂和溶液，收集溶液部分，即为去除离子液体后的溶液。 本专利技术具有如下优点： 1.去除效率高。pH>8的碱性范围内，绝大部分蛋白质或肽段成电负性，由于所带 负电荷和离子液体中含有长烷基链的阳离子的正电荷相反，采用强阳离子交换材料，含有 长烷基链的离子液体被保留，而蛋白质或肽段不保留，从而将离子液体和蛋白质/肽段分 开。 2.操作方便、快捷。强阳离子交换材料只需和含长烷基链的离子液体充分接触，即 可将两者分离。随后，采用离心或磁性分离等手段，即可回收去除离子液体后的溶液。若强 阳离子交换材料被填装于柱管内或被固定化，将含离子液体的溶液通过阳离子交换材料， 收集流出液即为去除离子液体后的溶液。 【专利附图】【附图说明】 图1为BSA酶解产物的MALDI-T0F质谱图。图1.用强阳离子交换材料为吸附剂 (A)将其填充于捕集柱内（B)直接放入溶液中，去除离子液体后的BSA酶解产物的质谱图； (C)不含离子液体的BSA酶解产物的质谱图；（D)含离子液体的BSA酶解产物的质谱图。 【具体实施方式】 实施例1 1.牛血清白蛋白（BSA)样品预处理：将Img BSA溶解于lmL4% (4g/100mL)的氯 化1-十二烷基-3-本文档来自技高网...

【技术保护点】
溶液样品中含长烷基链的离子液体的去除方法，其特征在于：将含有长烷基链的离子液体的样品溶液用碱性溶液调至pH≥8的碱性环境；然后采用阳离子交换材料作为吸附剂，去除含长烷基链的离子液体，最后将吸附剂和溶液分离，收集溶液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张丽华，赵群，杨开广，方菲，张玉奎，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁;21