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一种重组腺相关病毒rAAV载体的分离纯化方法技术

技术编号:10803737 阅读:170 留言:0更新日期:2014-12-24 10:58
本发明专利技术涉及一种重组腺相关病毒载体(rAAV)的分离纯化方法,通过添加磷灰石色谱中的钙离子,有效地改善磷灰石色谱对rAAV载体的结合与分离能力,通过所述方法获得的病毒载体,其纯度与二次氯化铯离心方法相当,并具有体内外生物活性,该方法纯化的重组腺相关病毒载体有望用于基因治疗。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种重组腺相关病毒载体rAAV的分离纯化方法,其特征是,所述方法是将rAAV载体细胞裂解液或细胞培养上清液经核酸内切酶处理,在钙离子存在下,采用磷灰石色谱与经缓冲液处理的细胞裂解液或者上清液中的rAAV载体结合,再经含钙离子的洗涤缓冲溶液洗涤和不含钙离子的洗脱缓冲溶液洗脱,然后经阴离子色谱进一步分离纯化rAAV。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:许瑞安曲伟红
申请(专利权)人:许瑞安
类型:发明
国别省市:福建;35

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