【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种基于肠上皮细胞对35.48nm的纳米银生物安全性的评价方法,其特征在于包括如下步骤:1)细胞培养:将人结肠癌上皮细胞Caco‑2细胞株加入含10%胎牛血清的DMEM培养基中,在培养箱内培养,细胞生长2~3 d换1次液,取对数生长期细胞进行后续实验;2)细胞传代:Caco‑2细胞贴壁生长,经过3~4 d,细胞生长至单层80%~95%时,弃掉上清液,用适量PBS轻轻冲洗,弃掉废液,加入0.25%胰蛋白酶进行消化3‑5 min,在倒置显微镜下观察到细胞刚刚变圆时,加入少量10%胎牛血清的DMEM培养基终止细胞消化过程,用吸管吸取培养基,轻轻吹打使细胞不再贴壁,将细胞悬液转移到新的培养瓶中,并加入适量培养基,放入培养箱中培养3‑4 d后,进行下一次传代培养;3)将纳米银和纳米氧化锌粉末分散在无血清的DMEM培养基中,制成不同浓度的纳米银、纳米氧化锌悬液,放入4 ℃冰箱中备用,因为这两种纳米材料易发生团聚,使得该分散体系不稳定,因此每次使用前,需使用超声波细胞破碎仪使纳米材料解聚;4)通过AO/EB双染法、WST‑1法进行细胞毒性分析,使用氧化应激法,通过Caco‑2细胞内ROS、SOD、G ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:关荣发,王彦波,宋益娟,伍义行,吕飞,刘明启,
申请(专利权)人:中国计量学院,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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